
洛克氏液琼脂培养基的制作(培养阿米巴原虫):1.固体部分牛肝浸膏3.5g,蛋白陈5.5g,琼脂粉15g,洛克氏液1000ml。2.洛克氏液成分氯化钠8g,氯化钾0.2g,氯化钙0.2g,氯化镁0.01g,磷酸氢二钠2g,磷酸二氢钾0.3g,蒸馏水1000ml。3.操作方法:接种前在每培养管内加入洛克氏液34ml,灭活小牛血清0.5ml,消毒米粉少许,青链霉素各3000~5000单位,最后加入虫种1~2滴即可。4.所需物品及具体配制步骤1)准备蒸馏水3000~5000ml;2000ml和1000ml三角烧瓶各1个;2)取蒸馏水2000ml,将1500ml放入2000ml的三角烧瓶内,加入氯化钠16g、氯化钾0.4g、磷酸氢二钠4g、磷酸二氢钾0.6g;将另500ml蒸馏水分装在已备的2个250ml的三角烧瓶内:3)取称量瓶2个,1个放入氯化镁0.02g,另一个放入氯化镁0.4g;再取2个500ml的盐水瓶,2个或3个100ml的三角烧瓶,待消毒。4)将以上物品放入高压消毒炉内,经15磅,20分钟高压灭菌后,取出待所有液体冷却后,分别将称量瓶中的氯化镁和氯化钙溶解在以上2个250ml的三角烧瓶内,先将溶解的氯化镁溶液加入盛有1500ml水的三角烧瓶内,然后再将溶解的氯化钙溶液缓慢加入其中,即配制成2000ml经过消毒灭菌的洛克氏液。5)配制固体部分①取洛克氏液1000ml,加入牛肝浸膏3.5g,蛋白陈5.5g,琼脂粉15g(或琼脂18g),经沸水浴使其完全溶化,趁热分装在已备的试管内,每管4~5ml。②将分装好的试管经高压灭菌(15磅20分钟),取出后趁热放木条上制成斜面,冷却后放入冰箱内储存备用。5.注意事项1)剩余的洛克氏液与培养基管放置在4℃冰箱保存:2)切记加氯化钙时,必须缓慢加入或滴入,最好在25℃以下操作
洛克氏液琼脂培养基的制作(培养阿米巴原虫): 1.固体部分 牛肝浸膏 3.5g,蛋白胨 5.5g,琼脂粉 15g,洛克氏液 1000ml。 2.洛克氏液成分 氯化钠 8g,氯化钾 0.2g,氯化钙 0.2g,氯化镁 0.01g,磷酸氢二钠 2g,磷酸二氢钾 0.3g,蒸馏水 1000ml。 3.操作方法:接种前在每培养管内加入洛克氏液 3~4ml,灭活小牛血清 0.5ml,消毒米粉 少许,青链霉素各 3000~5000 单位,最后加入虫种 1~2 滴即可。 4.所需物品及具体配制步骤 1) 准备蒸馏水 3000~5000ml; 2000ml 和 1000ml 三角烧瓶各 1 个; 2)取蒸馏水 2000 ml,将 1500ml 放入 2000ml 的三角烧瓶内,加入氯化钠 16g、氯化钾 0.4g、磷酸氢二钠 4g、磷酸二氢钾 0.6g;将另 500 ml 蒸馏水分装在已备的 2 个 250 ml 的三 角烧瓶内; 3)取称量瓶 2 个,1 个放入氯化镁 0.02g,另一个放入氯化镁 0.4g;再取 2 个 500ml 的盐 水瓶,2 个或 3 个 100 ml 的三角烧瓶,待消毒。 4)将以上物品放入高压消毒炉内,经 15 磅,20 分钟高压灭菌后,取出待所有液体冷却 后,分别将称量瓶中的氯化镁和氯化钙溶解在以上 2 个 250 ml 的三角烧瓶内,先将溶解的 氯化镁溶液加入盛有 1500ml 水的三角烧瓶内,然后再将溶解的氯化钙溶液缓慢加入其中, 即配制成 2000ml 经过消毒灭菌的洛克氏液。 5)配制固体部分 ①取洛克氏液 1000ml,加入牛肝浸膏 3.5g, 蛋白胨 5.5g,琼脂粉 15g(或琼脂 18g),经 沸水浴使其完全溶化,趁热分装在已备的试管内,每管 4~5 ml。 ②将分装好的试管经高压灭菌(15 磅 20 分钟),取出后趁热放木条上制成斜面,冷却后 放入冰箱内储存备用。 5.注意事项 1)剩余的洛克氏液与培养基管放置在 4℃冰箱保存; 2)切记加氯化钙时,必须缓慢加入或滴入,最好在 25℃以下操作