六第七章 免疫组化结果的分析和判断 (要求:理解,熟记,会用) (p120)
** 第七章 免疫组化结果的分析和判断 (要求:理解, 熟记, 会用) (p120)
第一节免疫组化结果的判断原则 免疫组化结果的判断原则概括起来有 以下几点
第一节 免疫组化结果的判断原则 免疫组化结果的判断原则概括起来有 以下几点:
1必须同时设对照染色。没有对照染 色的免疫组化染色结果是不可信的。 2抗原表达必须在特定部位。如LGA应 定位在细胞膜上;咪K应定位在细胞浆内; PcNA及p53蛋白应定位在细胞核内;EMA应 定位在细胞膜上,等等。不在抗原所在部 位的阳性着色,一概不能视为阳性
⒈必须同时设对照染色。没有对照染 色的免疫组化染色结果是不可信的。 ⒉抗原表达必须在特定部位。如LCA应 定位在细胞膜上;CK应定位在细胞浆内; PCNA及p53蛋白应定位在细胞核内;EMA应 定位在细胞膜上,等等。不在抗原所在部 位的阳性着色,一概不能视为阳性
3阴性结果不能视为抗原不表达。由 于检测方法灵敏度有高低之分,有时可因 染色方法灵敏度不够,而导致阴性反应, 判断时应注意
⒊阴性结果不能视为抗原不表达。由 于检测方法灵敏度有高低之分,有时可因 染色方法灵敏度不够,而导致阴性反应, 判断时应注意
4尽量避开出血、坏死及切片刀痕 和界面边缘细胞的阳性表达,特别是酶 免疫标记。因为这类阳性着色多系内源 干扰,或系人为因素所致
⒋尽量避开出血、坏死及切片刀痕 和界面边缘细胞的阳性表达,特别是酶 免疫标记。因为这类阳性着色多系内源 干扰,或系人为因素所致
5对免疫组化标记结果的意义不能 绝对化,应结合临床资料、X线等影像 学及实验结果综合分析
⒌对免疫组化标记结果的意义不能 绝对化,应结合临床资料、X线等影像 学及实验结果综合分析
*第二节 对照染色设计
* 第二节 对照染色设计
(一)对照染色的目的 设对照的目的是为了排除假阴性和 假阳性。假阴性的原因主要有三:⑦组织 处理不当,抗原丢失过多或被遮蔽;②抗 体失活、效价过低或稀释度不合适(主要 指一抗,即特异性抗体);③染色步骤遗 漏及差错,或显色剂的选择、缓冲液的pH 和离子强度不当等
(一)对照染色的目的 设对照的目的是为了排除假阴性和 假阳性。假阴性的原因主要有三:①组织 处理不当,抗原丢失过多或被遮蔽;②抗 体失活、效价过低或稀释度不合适(主要 指一抗,即特异性抗体);③染色步骤遗 漏及差错,或显色剂的选择、缓冲液的pH 和离子强度不当等
假阳性均系由多种因素造成的非特异 着色所致,原因主要有:①自发荧光或内 源酶等干扰;②抗体试剂不纯(特别是 抗);③操作失误,如污染、切片干枯或 显色剂操作不当等;④Fc受体的干扰,等 等
假阳性均系由多种因素造成的非特异 着色所致,原因主要有:①自发荧光或内 源酶等干扰;②抗体试剂不纯(特别是一 抗);③操作失误,如污染、切片干枯或 显色剂操作不当等;④Fc受体的干扰,等 等
(二)对照的种类及其选用目的 对照染色大致可分为:阻性组织 对照、阴性组织对照及阴性试剂对照 和自身对照四大类:
(二)对照的种类及其选用目的 对照染色大致可分为:阳性组织 对照、阴性组织对照及阴性试剂对照 和自身对照四大类: