第六 电泳技木和常用电泳仪
第六章 电泳技术和常用电泳仪
本章教学要求 了解常用的电泳仪 了解电泳仪临床应用 熟悉毛细管电泳仪基本原理、基本结构 熟悉常用电泳仪的基本结构、电泳方法 掌握电泳基本原理 掌握毛细管电泳的特点、分离模式 掌握电泳仪的维护保养及故障排除
本章教学要求 了解常用的电泳仪 了解电泳仪临床应用 熟悉毛细管电泳仪基本原理、基本结构 熟悉常用电泳仪的基本结构、电泳方法 掌握电泳基本原理 掌握毛细管电泳的特点、分离模式 掌握电泳仪的维护保养及故障排除
内容提要 第一节电泳原理 第二节常用电泳方法 第三节常用电泳仪的基本结构及技术指标第 四节常用电泳仪简介 第五节： 毛细管电泳 第六节 电泳仪的维护保养及故障排除 第七节 电泳仪的临床应用
内 容 提 要 第一节 电泳原理 第二节 常用电泳方法 第三节 常用电泳仪的基本结构及技术指标第 四节 常用电泳仪简介 第五节 毛细管电泳 第六节 电泳仪的维护保养及故障排除 第七节 电泳仪的临床应用
概述 电泳(electrophoresis)是指带电荷的溶质或粒子 在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现 象。利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术叫 做电泳技术(electrophoresis technique)。可以 实现电泳分离技术的仪器称之为电泳仪 (electrophoresister)
电泳（electrophoresis）是指带电荷的溶质或粒子 在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现 象。利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术叫 做电泳技术（electrophoresis technique）。可以 实现电泳分离技术的仪器称之为电泳仪 （electrophoresister）。 概 述
概述 临床常用的电泳分析方法主要有醋酸纤维素薄 膜电泳、凝胶电泳、等电聚焦电泳、双向电泳和毛 细管电泳等。 目前，电泳技术已广泛用于蛋白质、多肽、氨 基酸、核苷酸、无机离子等成份的分离和鉴定，甚 至还用于细胞与病毒的研究
临床常用的电泳分析方法主要有醋酸纤维素薄 膜电泳、凝胶电泳、等电聚焦电泳、双向电泳和毛 细管电泳等。 目前，电泳技术已广泛用于蛋白质、多肽、氨 基酸、核苷酸、无机离子等成份的分离和鉴定，甚 至还用于细胞与病毒的研究。 概 述
第一节电泳原理 电泳的基本原理 物质分子在正常情况下一般不带电，即所带正负电荷 量相等，故不显示带电性。但是在一定的物理作用或化学 反应条件下，某些物质分子会成为带电的离子（或粒子）， 不同的物质，由于其带电性质、颗粒形状和大小不同，因 而在一定的电场 ￥电泳 V电渗流 中它们的移动方向和移 动速度也不同，因此可 使它们分离。 电泳现象和电渗流现象
第一节 电泳原理 一、电泳的基本原理 物质分子在正常情况下一般不带电，即所带正负电荷 量相 等，故不显示带电性。但是在一定的物理作用或化学 反应条件下，某些物质分子会成为带电的离子（或粒子）， 不同的物质，由于其带电性质、颗粒形状和大小不同，因 而在一定的电场 中它们的移动方向和移 动速度也不同，因此可 使它们分离。 电泳现象和电渗流现象
第一节 电泳原理 若将带净电荷Q的粒子放入电场，则该粒子所受到的电荷引力为： F引EQ (16-1)》 在溶液中，运动粒子与溶液之间存在阻力F阻 F阻6nrnV (16-2) 当F引干阻时 E0=6πrnV V=EQ/6πrn (16-3) 由上式可以看出，粒子的移动速度（泳动速度）与电场 强度(E)和粒子所带电荷量(Q)成正比，而与粒子的半径()及溶 液的粘度(n)成反比
第一节 电泳原理 若将带净电荷Q的粒子放入电场，则该粒子所受到的电荷引力为： F引=E Q （16-1） 在溶液中,运动粒子与溶液之间存在阻力F阻 F阻=6πrηV （16-2） 当F引=F阻时 EQ= 6πrηV V = EQ/6πrη （16-3） 由上式可以看出,粒子的移动速度(泳动速度V)与电场 强度(E)和粒子所带电荷量(Q)成正比,而与粒子的半径(r)及溶 液的粘度(η)成反比
第一节电泳原理 二、影响电泳的外界因素 (一)电场强度 (二》 ,溶液的pH值 (三) 溶液的离子强度 (四) 电渗作用 (五) 粒子的迁移率 (六)吸附作用
第一节 电泳原理 二、影响电泳的外界因素 （一）电场强度 （二）溶液的pH值 （三）溶液的离子强度 （四）电渗作用 （五）粒子的迁移率 （六）吸附作用
第二节常用电泳方法 纸电泳 指用滤纸作为支持载体的电泳方法。是最早 使用的区带电泳。 将滤纸条水平地架设在 盖子 两个装有缓冲溶液的容器之 间，样品点于滤纸中央。当 滤纸条被缓冲液润湿后，再 电极(-) 电极(+) 盖上绝缘密封罩，即可由电 绝缘板 泳电源输入直流电压 平卧式电泳槽装置示意图 (100V~1000V)进行电泳
第二节 常用电泳方法 一、纸电泳 指用滤纸作为支持载体的电泳方 法。是最早 使用的区带电泳。 将滤纸条水平地架设在 两个装有缓冲溶液的容器之 间，样品点于滤纸中央。当 滤纸条被缓冲液润湿后，再 盖上绝缘密封罩，即可由电 泳电源输入直流电压 （100V～1000V）进行电泳。 平卧式电泳槽装置示意图
第二节常用电泳方法 二 醋酸纤维素薄膜电泳 电泳时经过膜的预处理、加样、电泳、染色、 脱色与透明即可得到满意的分离效果。此电泳的 特点是分离速度快、 电泳时间短、样品 点样线 蛋 蛋 蛋 白 用量少。因此特别 适合于病理情况下 微量异常蛋白的检测。 血清蛋白的电泳图谱
第二节 常用电泳方法 二、醋酸纤维素薄膜电泳 电泳时经过膜的预处理、加样、电泳、染色、 脱色与透明即可得到满意的分离效果。此电泳的 特点是分离速度快、 电泳时间短、样品 用量少。因此特别 适合于病理情况下 微量异常蛋白的检测。 血清蛋白的电泳图谱