三、填空题 1.RNA是由核糖核苷酸通过 键连接而成的一种 几乎所 有的RNA都是由 NA 而来,因此,序列和其中一条 链 2.多数类型的RNA是由加工 生的,真核生物前体tRNA的 包 括 的切除和 的拼接。随着 和 端的序列切 除,3’端加上了序列 在四膜虫中,前体tRNA的切除和 的拼接是通过 机制进行的。 3 RNase p是一种 含有 作为它的活性部位,这种酶在序 列的 切割 4.Ct1/2实验测定的是 5.假定摆动假说是正确的,那么最少需要』种邙RNA来翻译61种氨基酸密码子。 6写出两种合成后不被切割或拼接的RNA: 7.在DNA合成中负责复制和修复的酶 8.染色体中参与复制的活性区呈Y型结构,称为 9.在DNA复制和修复过程中修补DNA螺旋上缺口的酶称为」 10.在DNA复制过程中,连续合成的子链称 另一条非连续合成的子链 称为 11.如果DNA聚合酶把一个不正确的核苷酸加到3’末端,一个含3’→5’活性的独 立催化区会将这个错配碱基切去。这个催化区称为 12.DMA后随链合成的起始要一段短的 它是由 以核糖核 苷酸为底物合成的 13.复制叉上DMA双螺旋的解旋作用由」 催化的,它利用来源于ATP水解产 生的能量沿DNA链单向移动。 14.帮助DNA解旋的 与单链DNA结合,使碱基仍可参与模板反应 15.DNA引发酶分子与DNA解旋酶直接结合形成一个 单位,它可在复制 叉上沿后随链下移,随着后随链的延伸合成RNA引物。 16.如果DNA聚合酶出现错误,会产生一对错配碱基,这种错误可以被一个通过甲基 化作用来区别新链和旧链的特别系统进行校正 17.对酵母、细菌以及几种生活在真核生物细胞中的病毒来说,都可在DNA独特序列 处观察到复制泡的形成 可被看成一种可形成暂时单链缺口(Ⅰ型)或暂时双链缺口(Ⅱ型)的可逆 核酸酶 19.在大肠杆菌中发现了 种DNA聚合酶。DNA修复时需要DNA聚合酶 20.真核生物中有5种DNA聚合酶。它们是:(1)
51 三、填空题 1.RNA 是由核糖核苷酸通过 键连接而成的一种 。几乎所 有的 RNA 都是由 DNA 而来，因此，序列和其中一条 链 。 2.多数类型的 RNA 是由加工 产生的，真核生物前体 tRNA 的 包 括 的切除和 的拼接。随着 和 端的序列切 除，3’端加上了序列 。在四膜虫中，前体 tRNA 的切除和 的拼接是通过 机制进行的。 3.RNase P 是一种 ，含有 作为它的活性部位，这种酶在 序 列的 切割 。 4.Cot1／2 实验测定的是 。 5.假定摆动假说是正确的，那么最少需要 种 tRNA 来翻译 61 种氨基酸密码子。 6.写出两种合成后不被切割或拼接的 RNA： 和 。 7.在 DNA 合成中负责复制和修复的酶是 。 8.染色体中参与复制的活性区呈 Y 型结构，称为 。 9.在 DNA 复制和修复过程中修补 DNA 螺旋上缺口的酶称为 。 10. 在 DNA 复制过程中，连续合成的子链称 ，另一条非连续合成的子链 称为 。 11. 如果 DNA 聚合酶把一个不正确的核苷酸加到 3’末端，—个含 3’→5’活性的独 立催化区会将这个错配碱基切去。这个催化区称为 酶。 12. DNA 后随链合成的起始要一段短的 ，它是由 以核糖核 苷酸为底物合成的 。 13. 复制叉上 DNA 双螺旋的解旋作用由 催化的，它利用来源于 ATP 水解产 生的能量沿 DNA 链单向移动。 14.帮助 DNA 解旋的 与单链 DNA 结合，使碱基仍可参与模板反应。 15. DNA 引发酶分子与 DNA 解旋酶直接结合形成一个 单位，它可在复制 叉上沿后随链下移，随着后随链的延伸合成 RNA 引物。 16. 如果 DNA 聚合酶出现错误，会产生一对错配碱基，这种错误可以被一个通过甲基 化作用来区别新链和旧链的特别 系统进行校正。 17. 对酵母、细菌以及几种生活在真核生物细胞中的病毒来说，都可在 DNA 独特序列 处观察到复制泡的形成。 18. 可被看成一种可形成暂时单链缺口(Ⅰ型)或暂时双链缺口(Ⅱ型)的可逆 核酸酶。 19. 在大肠杆菌中发现了 种 DNA 聚合酶。 DNA 修复时需要 DNA 聚合酶 。 20.真核生物中有 5 种 DNA 聚合酶。它们是：(l) (2) (3) (4) (5)
21.在DNA修复过程中,需要第二种酶, 作用是将DNA中相邻的 碱基 起来 DNA聚合酶具有外切核酸酶的活性 有两种外切核酸酶的活性,它们分别从 和 降解 DNA。DNA聚合酶 只有 外切核酸酶活性。 22.只有真核DNA聚合酶 显 外切 核酸酶活性 23.DNA大多数自发变化都会通过称之为 的作用很快被校正。仅在 极少情况下,DNA将变化的部分保留下来导致永久的序列变化,称 为 24.偶然情况下,在同一基因两个稍微不同拷贝(等位基因)间发生重组的过程中,一个 等位基因经过 过程会被另一等位基因代替。 5.通过 基因重组,游动DNA序列和一些病毒可进入或离开一条目 的染色体。 26.DNA修复包括3个步骤 酶对DNA链上不正常碱基的识别与切除, 酶对已切除区域的重新合成, 酶对剩下切口的修补 27.一种主要的DNA修复途径称 包括一系列 酶,它们都 能识别并切去DNA上不正常碱基 28 途径可以切去任何造成DNA双螺旋大片段改变的DMA损伤。 29.大肠杆菌中,任何由于DNA损伤造成的DNA复制障碍都会诱导 信号,即允许跨过障碍进行复制,给细胞一个生存的机会 0.在 中,基因交换发生在同源DNA序列间,最常见是发生在同一染色 体的两个拷贝间。 31.在交换区域,一个DNA分子的一条链与另一个DNA分子的一条链相互配对,在两 个双螺旋间形成一个 32.通过 两个单链的互补DNA分子一起形成一个完全双链螺 旋,人们认为这个反应从一个慢的 步骤开始 33.大肠杆菌的染色体配对需要 它与单链DNA结合并使同源双链 DNA与之配对。 34.一般性重组的主要中间体是 也用它的发现者名字命名 为 35.产生单个碱基变化的突变叫 突变,如果碱基的改变产生一个并不改变 氨基酸残基编码的 并且不会造成什么影响,这就是 突 变。如果改变了氨基酸残基的密码,这就是 突变。这种突变对蛋白质 功能影响程度要根据被改变的氨基酸残基在蛋白质 或 结构中 的重要程度,或是与酶的 的密切性来决定,活性变化 范围可从 到接近正常 36.一种由于蛋白质序列中丢失了 残基引起的突变将会阻止 的形成,这种蛋白质更容易 如果在 温度是稳定
52 21. 在 DNA 修复过程中，需要第二种酶， ，作用是将 DNA 中相邻的 碱基 起来。 DNA 聚合酶具有外切核酸酶的活性。 有两种外切核酸酶的活性，它们分别从 和 降解 DNA。DNA 聚合酶 只有 外切核酸酶活性。 22. 只有真核 DNA 聚合酶 和 显示 外切 核酸酶活性。 23.DNA 大多数自发变化都会通过称之为 的作用很快被校正。仅在 极 少 情 况 下 ， DNA 将 变 化 的 部 分 保 留 下 来 导 致 永 久 的 序 列 变 化 ， 称 为 。 24.偶然情况下，在同一基因两个稍微不同拷贝(等位基因)间发生重组的过程中，一个 等位基因经过 过程会被另一等位基因代替。 25.通过 基因重组，游动 DNA 序列和一些病毒可进入或离开一条目 的染色体。 26.DNA 修复包括 3 个步骤： 酶对 DNA 链上不正常碱基的识别与切除， 酶对已切除区域的重新合成， 酶对剩下切口的修补。 27.一种主要的 DNA 修复途径称 ，包括一系列 酶，它们都 能识别并切去 DNA 上不正常碱基。 28. 途径可以切去任何造成 DNA 双螺旋大片段改变的 DNA 损伤。 29. 大肠杆菌中，任何由于 DNA 损伤造成的 DNA 复制障碍都会诱导 的 信号，即允许跨过障碍进行复制，给细胞一个生存的机会。 30. 在 中，基因交换发生在同源 DNA 序列间，最常见是发生在同一染色 体的两个拷贝间。 31. 在交换区域，一个 DNA 分子的一条链与另一个 DNA 分子的一条链相互配对，在两 个双螺旋间形成一个 。 32. 通过 ，两个单链的互补 DNA 分子一起形成一个完全双链螺 旋，人们认为这个反应从一个慢的 步骤开始。 33. 大肠杆菌的染色体配对需要 ；它与单链 DNA 结合并使同源双链 DNA 与之配对。 34. 一般性 重组的 主要 中间体 是 ，也用 它的 发现者 名字命名 为 。 35. 产生单个碱基变化的突变叫 突变，如果碱基的改变产生一个并不改变 氨基酸残基编码的 ，并且不会造成什么影响，这就是 突 变。如果改变了氨基酸残基的密码，这就是 突变。这种突变对蛋白质 功能影响程度要根据被改变的氨基酸残基在蛋白质 或 结构中 的重要程度，或是与酶的 的密切性来决定，活性变化 范围可从 到接近正常。 36. 一种由于蛋白质序列中丢失了 残基引起的突变将会阻止 的形成，这种蛋白质更容易 。如果在 温度是稳定
的而在_ 温度是不稳定的,将它称为 突变,是 突变的一个例子 37.无义突变是将一种氨基酸的 转变成 密码子,结果使 蛋白质链 。一个碱基的插入或 突变。由 于三联 的移动,突变位置 的整个氨基酸序列都会被 改变。上述两种类型的突变(插入和缺失)所产生的蛋白质同 的不 同,通常是完全 38.下面所列的是由突变而产生的一些异常表型(A),同时也列出了表型由突变而造成 的缺陷的可能原因(B)。请尽可能地将A项所列的异常表型同B项所列的可能原 因配对。 A异常表型 B缺陷可能出现在: (a)细菌的营养缺陷型 (t)合成途径 (b)细菌温度敏感突变体 (u)降解途径 (c)细菌的诱导酶变成组成酶 (v)DNA的修复 (d)果蝇的红眼变成白眼 (w)转录控制 (e)果蝇形成两个胸节 (x)细胞分裂控制 (f)人的镰刀状细胞贫血症 (y)胚胎发育控制 (g)人的原卟啉症 (z)蛋白质的稳定性 (h)人着色性干皮病 (i)苯丙酮尿症 (j)人肿瘤的发生 39.下面各句是对不同诱变剂作用的叙述,写出相应情况的诱变剂的名称 (1)通过同双螺旋的结合,引起变构,并激活修复性内切核酸酶的诱变剂 (2)引起总染色体的损伤如断裂和转位的诱变剂是: (3)取代正常的碱基而掺人到DNA中,并通过互变异构引起复制错误的诱变剂是: (4)只能够除去胞嘧啶和甲基胞嘧啶的氨基基团的诱变剂是: (5)主要是引起同一条链上的相邻嘧啶间的交联的诱变剂是 (6)主要是在DNA双螺旋的形变和链的错排过程中引起插入或缺失的诱变剂是 (7)可以除去DNA中任何一个带有氨基基团的碱基上氨基基团的诱变剂 40.据估计,单倍体人基因组包括50000个基因,如果每个世代每个基因的突变率为 5×10,那么,每个个体中存在 刚产生的突变。 41.DNA中两种常见的自发突变是由于腺嘌呤、鸟嘌呤与脱氧核糖间的N-糖基连接断 裂而导致的 和使胞嘧啶变为尿嘧啶而导致的 42.能够诱导操纵子但不是代谢底物的化合物称为 诱导物。能够诱导乳糖
53 的而在 温度是不稳定的，将它称为 突变，是 突变的一个例子。 37. 无义突变是将一种氨基酸的 转变成 密码子，结果使 蛋白质链 。一个碱基的插入或 叫 突变。由 于三联 的移动，突变位置 的整个氨基酸序列都会被 改变。上述两种类型的突变(插入和缺失)所产生的蛋白质同 的不 同，通常是完全 。 38. 下面所列的是由突变而产生的一些异常表型(A)，同时也列出了表型由突变而造成 的缺陷的可能原因(B)。请尽可能地将 A 项所列的异常表型同 B 项所列的可能原 因配对。 A 异常表型： B 缺陷可能出现在： (a)细菌的营养缺陷型 (t)合成途径 (b)细菌温度敏感突变体 (u)降解途径 (c)细菌的诱导酶变成组成酶 (v)DNA 的修复 (d)果蝇的红眼变成白眼 (w)转录控制 (e)果蝇形成两个胸节 (x)细胞分裂控制 (f)人的镰刀状细胞贫血症 (y)胚胎发育控制 (g)人的原卟啉症 (z)蛋白质的稳定性 (h)人着色性干皮病 (i)苯丙酮尿症 (j)人肿瘤的发生 39.下面各句是对不同诱变剂作用的叙述，写出相应情况的诱变剂的名称： (1) 通 过同 双 螺 旋的 结 合， 引 起 变构 ， 并 激活 修 复性 内 切 核酸 酶 的 诱变 剂 是： 。 (2)引起总染色体的损伤如断裂和转位的诱变剂是： 。 (3)取代正常的碱基而掺人到 DNA 中，并通过互变异构引起复制错误的诱变剂是： 。 (4)只能够除去胞嘧啶和甲基胞嘧啶的氨基基团的诱变剂是： 。 (5)主要是引起同一条链上的相邻嘧啶间的交联的诱变剂是： 。 (6)主要是在 DNA 双螺旋的形变和链的错排过程中引起插入或缺失的诱变剂是： 。 (7) 可以除去 DNA 中 任 何 一 个 带 有 氨 基 基 团 的 碱 基 上 氨 基 基 团 的 诱 变 剂 是： 。 40. 据估计，单倍体人基因组包括 50O00 个基因，如果每个世代每个基因的突变率为 5×10—5，那么，每个个体中存在 刚产生的突变。 41. DNA 中两种常见的自发突变是由于腺嘌呤、鸟嘌呤与脱氧核糖间的 N-糖基连接断 裂而导致的 和使胞嘧啶变为尿嘧啶而导致的 。 42．能够诱导操纵子但不是代谢底物的化合物称为 诱导物。能够诱导乳糖
操纵子的化合物 就是其中一例。这种化合物同 蛋白 质结合,并使之与 分离。乳糖操纵子的体内功能性诱导物 是 43.色氨酸是一种调节分子,被视为 它与一种蛋白质结合形 成 乳糖操纵子和色氨酸操纵于是两个 控制的例 子。cAMP一CAP蛋白通过 控制起作用。色氨酸操纵子受另一种系 统一的调控,它涉及到第一个结构基因被转录前的转录 44.负责把RNA转录成互补DNA分子的 酶可以解释由 引起 的永久性基因转变 45.利用自已的位点专一重组酶把自己从寄主基因组中的一个地方移到另一地方的遗 传元件叫 也叫作 46.酵母的Ty1元件是一种 它的转座需一段完整RNA转录物的合 成,这个转录物又被复制成一个双螺旋DNA,随后被整合到一个新的染色体位置 47.真核生物的mRMA加工过程中,5’端加上 在3’端加上 后 者由 催化。如果被转录基因是不连续的,那么, 定要被切 除,并通过 过程将 连接在一起。这个过程涉及许多 RNA分子,如U1和U2等,它们被统称为 。它们分别与一组蛋白质结 合形成 ,并进一步地组成40S或60S的结构, 叫 48.胶原蛋白通过在不同的脯氨酸残基上添加 基团而被化学修饰 这个反应是由两种酶催化的,它们是 和 其他的 蛋白质被 磷酸化。蛋白质上添加寡聚糖的过程叫 而添加脂肪酸链则叫 0一寡聚糖是一种同 残基上氧连接的寡聚糖,而N一寡聚糖是通过与 上的氮原子连接而成。N一寡聚糖又是从同一种叫做 脂的前体寡 聚糖衍生而来 阿黑皮素原是 被切割以后可以产生很多活性蛋白质的一个例子。 如 之类的RNA病毒也能合成类似的结构物。蛋白水解过程也 涉及细胞外毒素的活性,如蜜蜂的 和动物激素的活性,如 和 可使每个氨基酸和它相对应的tRNA分子相偶联形成一个 包括两个tRNA分子的结合位点 即P位点,紧密结合 与多肽链延伸尾端连接的tRNA分子,和 即A位点,结合带有一个氨 基酸的tRNA分子。 催化肽键的形成,一般认为这个催化反应是由核糖体大亚基上 分子介导的 53.释放因子蛋白与核糖体上A位点的 密码结合,导致肽基转移酶水
54 操 纵子的化合物 就是其中一例。这种化合物同 蛋白 质结 合， 并使 之与 分离 。乳 糖操 纵子 的 体内 功能 性诱 导 物 是 。 43.色 氨酸 是一 种调 节分 子， 被视 为 。它 与一 种蛋 白质 结合 形 成 。 乳糖操纵子和色氨酸操纵于是两个 控制的例 子。 cAMP—CAP 蛋白通过 控制起作用。色氨酸操纵子受另一种系 统一的调控，它涉及到第一个结构基因被转录前的转录 。 44.负责把 RNA 转录成互补 DNA 分子的 酶可以解释由 引起 的永久性基因转变。 45.利用自已的位点专一重组酶把自己从寄主基因组中的一个地方移到另一地方的遗 传元件叫 ，也叫作 。 46.酵母的 Tyl 元件是一种 ，它的转座需一段完整 RNA 转录物的合 成，这个转录物又被复制成一个双螺旋 DNA，随后被整合到一个新的染色体位置。 47.真核生物的 mRNA 加工过程中，5’端加上 ，在 3’端加上 ，后 者由 催化。如果被转录基因是不连续的，那么， 一定要被切 除，并通过 过程将 连接在一起。这个过程涉及许多 RNA 分子，如 Ul 和 U2 等，它们被统称为 。它们分别与一组蛋白质结 合形成 ，并进一步地组成 40S 或 60S 的结构， 叫 。 48.胶原蛋白通过在不同的脯氨酸残基上添加 基团而被化学修饰。 这个反应是由两种酶催化的，它们是 和 。其他的一些 蛋白质被 磷酸化。蛋白质上添加寡聚糖的过程叫 ， 而添加脂肪酸链则叫 。O—寡聚糖是一种同 或 残基上氧连接的寡聚糖，而 N—寡聚糖是通过与 上的氮原子连接而成。N—寡 聚糖又是从同一种叫做 脂的前体寡 聚糖衍生而来。 49. 阿黑皮素原是 被切割以后可以产生很多活性蛋白质的一个例子。 如 之类的 RNA 病毒也能合成类似的结构物。蛋白水解过程也 涉及细胞外毒素的活性，如蜜蜂的 和动物激素的活性，如 和 。 50. 可使每个氨基酸和它相对应的 tRNA 分子相偶联形成一个 分 子。 51. 包括两个 tRNA 分子的结合位点： ，即 P 位点，紧密结合 与多肽链延伸尾端连接的 tRNA 分子，和 ，即 A 位点，结合带有一个氨 基酸的 tRNA 分子。 52． 催化肽键的形成，一般认为这个催化反应是由核糖体大亚基上 的 分子介导的。 53．释放因子蛋白与核糖体上 A 位点的 密码结合，导致肽基转移酶水
解连接新生多肽与tRNA分子的化学键 54.任何mRNA序列能以三种 的形式被翻译,而且每一种都对应一种 完全不同的多肽链 55.蛋白质合成的起始过程很复杂,包括一系列被 催化的步骤。 56.在所有细胞中,都有一种特别的 识别 密码子 AUG,它携带一种特别的氨基酸,即」 作为蛋白质合成的起始氨基酸。 57.核糖体沿着mRNA前进,它需要另一个延伸因子 这一步需要的 水解。当核糖体遇到终止密码( )的时候,延长作用 结束,核糖体和新合成的多肽被释放出来。翻译的最后一步被称为」 并 且需要一套 因子 58.基因工程是 年代发展起来的遗传学的一个分支学科。基因工程技术的 诞生,使人们从简单地利用现存的生物资源进行诸如发酵、酿酒、制醋和酱油等 传统的生物技术时代,走向 的时代 59.随着基因工程技术的诞生和发展,人类可以通过 和 三种主要生产方式,大量取得过去只能从组织中提取的珍稀蛋 白,用于研究或治病 60. Cohen等在 年构建了第一个有功能的重组DNA分子。 61.基因工程的两个基本特点是:(1) (2) 62.基因克隆中三个基本要点是 年,美国斯坦福大学 上在发表了题为: 将新的遗传信息插入SV40病毒DNA的生物化学方法:含有λ噬菌体基因和 E.coli半乳糖操纵子的环状SV40DNA”的论文,标志着基因工程技术的诞生。这 一工作具有划时代的意义,但是他们并没有 64.克隆基因的主要目的有四:(1) (3) 65.严格地说限制性内切核酸酶( restriction endonuc lease)是指已被证明是 的酶。基因工程中把那些具有识别 内切核酸酶统称为限制性内切核酸酶。 年 Luria和 Human在T偶数噬菌体对大肠杆菌感染实验中首次发现了细 菌的 现象 67.1970年, Smith和 wilcox从流感嗜血杆菌中分离到一种限制酶,能够特异性的切 割DNA,这个酶后来被命名为 这是第一个分离到的Ⅱ类限制 性内切核酸酶 68.通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大 小的片段,可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的」 69.Ⅱ类限制性内切核酸酶分子量较小.一般在20~40kDa,通常由 亚基所 组成。它们的作用底物为双链DNA,极少数Ⅱ类酶也可作用于单链DNA,或DNA /RNA杂合双链。这类酶的专一性强,它不仅对酶切点邻近的两个碱基有严格要求
55 解连接新生多肽与 tRNA 分子的化学键。 54．任何 mRNA 序列能以三种 的形式被翻译，而且每一种都对应一种 完全不同的多肽链。 55．蛋白质合成的起始过程很复杂，包括一系列被 催化的步骤。 56．在所有细胞中，都有一种特别的 识别 密码子 AUG，它携带一种特别的氨基酸，即 ，作为蛋白质合成的起始氨基酸。 57．核糖体沿着 mRNA 前进，它需要另一个延伸因子 ，这一步需要 的 水解。当核糖体遇到终止密码( 、 、 )的时候，延长作用 结束，核糖体和新合成的多肽被释放出来。翻译的最后一步被称为 ，并 且需要—套 因子。 58.基因工程是 年代发展起来的遗传学的一个分支学科。基因工程技术的 诞生，使人们从简单地利用现存的生物资源进行诸如发酵、酿酒、制醋和酱油等 传统的生物技术时代，走向 的时代。 59.随着基因工程技术的诞生和发展，人类可以通过 、 和 三种主要生产方式，大量取得过去只能从组织中提取的珍稀蛋 白，用于研究或治病。 60. Cohen 等在 年构建了第一个有功能的重组 DNA 分子。 61.基因工程的两个基本特点是：(1) ，(2) 。 62.基因克隆中三个基本要点是： ； 和 。 63. 年，美国斯坦福大学 等 上在发表了题为： “将新的遗传信息插入 SV40 病毒 DNA 的生物化学方法：含有λ噬菌体基因和 E.coli 半乳糖操纵子的环状 SV40 DNA”的论文，标志着基因工程技术的诞生。这 一工作具有划时代的意义，但是他们并没有 。 64.克隆基因的主要目的有四：(1) ；(2) ； (3) ；(4) 。 65. 严 格 地 说 限 制 性 内 切 核 酸 酶 (restriction endonuclease) 是 指 已 被 证 明 是 的酶。基因工程中把那些具有识别 内切核酸酶统称为限制性内切核酸酶。 66. 年 Luria 和 Human 在 T 偶数噬菌体对大肠杆菌感染实验中首次发现了细 菌的 现象。 67.1970 年，Smith 和 wilcox 从流感嗜血杆菌中分离到一种限制酶，能够特异性的切 割 DNA，这个酶后来被命名为 ，这是第一个分离到的Ⅱ类限制 性内切核酸酶。 68.通过比较用不同组合的限制性内切核酸酶处理某一特定基因区域所得到的不同大 小的片段，可以构建显示该区域各限制性内切核酸酶切点相互位置的 。 69.Ⅱ类限制性内切核酸酶分子量较小．一般在 20～40kDa，通常由 亚基所 组成。它们的作用底物为双链 DNA，极少数Ⅱ类酶也可作用于单链 DNA，或 DNA ／RNA 杂合双链。这类酶的专一性强，它不仅对酶切点邻近的两个碱基有严格要求
而且对更远的碱基也有要求,因此,Ⅱ类酶既具有专一性,也具有 专 性,一般在识别序列内切割。切割的方式有 ,产生末端的 DNA片段或 的DNA片段。作用时需要作辅助因子,但不需要 和 完全的回文序列具有两个基本的特点,就是:(1) 71.Ⅱ类限制性内切核酸酶一般识别 个碱基,也有识别多序列的限制性 内切核酸酶。根据对限制性内切核酸酶识别序列的分析,限制性内切核酸酶识别 序列具有 倾向,即它们在识别序列中含量较高。 72.Ec丕是I类限制性内切核酸酶,分子组成是a2B2Y,分子量是300kDa。在这些 亚基中,a亚基具有 作用:β亚基具有 的活性; Y亚基的作用则是 73.个体之间DNA限制性片段长度的差异叫 74.限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的,第一个大写字母取自 ,第二、三两个字母取自 第四个 字母则用 表示。 75.限制性内切核酸酶AcyI识别的序列是5’- GRCGYG-3’,其中R 76.在酶切反应管加完各种反应物后,需要离心2秒钟,其目的是 77.部分酶切可采取的措施有:(1) 等 第一个分离的限制性内切核酸酶差异是 而第一个用于构建重组 体的限制性内切核酸酶是 79.限制性内切核酸酶BsRⅠ和Hael的来源不同,但识别的序列都是 它们属于 80.由于DNA是由4种碱基组成的,所以任何限制性内切核酸酶的切割频率的理论值 应该是 81.SalI和MotI都是哺乳动物中识别序列稀有的酶,在哺乳动物基因组的5kb片 段中,找到NotI切点的概率是 82.部分酶切是指控制反应条件,使得酶在DNA序列上的识别位点只有部分得到切割, 它的理论依据是 83.I类限制酶识别DNA的位点和切割的DNA位点是不同的,切割位点的识别结合有 两种模型,一种是 另一种是 84限制性内切核酸酶通常保存在 浓度的甘油溶液中 85.连接酶( ligase)是一类用于核酸分子连接形成 键的核酸合成酶,有DNA 连接酶和RNA连接酶之分
56 而且对更远的碱基也有要求，因此，Ⅱ类酶既具有专一性，也具有 专 一性，一般在识别序列内切割。切割的方式有 ，产生末端的 DNA 片段或 的 DNA 片段。作用时需要作辅助因子，但不需要 和 。 70.完全的回文序列具有两个基本的特点，就是：(1) (2) 。 71.Ⅱ类限制性内切核酸酶一般识别 个碱基，也有识别多序列的限制性 内切核酸酶。根据对限制性内切核酸酶识别序列的分析，限制性内切核酸酶识别 序列具有 倾向，即它们在识别序列中含量较高。 72.EcoK 是 Ⅰ类限制性内切核酸酶，分子组成是α2β2γ，分子量是 300kDa。在这些 亚基中，α亚基具有 作用；β亚基具有 的活性； γ亚基的作用则是 。 73.个体之间 DNA 限制性片段长度的差异叫 。 74.限制性内切核酸酶是按属名和种名相结合的原则命名的，第一个大写字母取自 ，第二、三两个字母取自 ，第四个 字母则用 表示。 75.限制性内切核酸酶 Acy Ⅰ识别的序列是 5’－GRCGYG-3’，其中 R ， Ｙ 。 76.在酶切反应管加完各种反应物后，需要离心 2 秒钟，其目的是 和 。 77.部分酶切可采取的措施有：(1) (2) (3) 等。 78.第一个分离的限制性内切核酸酶差异是 ；而第一个用于构建重组 体的限制性内切核酸酶是 。 79.限制性内切核酸酶 BsuR Ⅰ和ＨaeⅢ的来源不同，但识别的序列都是 ， 它们属于 。 80.由于 DNA 是由 4 种碱基组成的，所以任何限制性内切核酸酶的切割频率的理论值 应该是 。 81.Sal Ⅰ和 Not Ⅰ都是哺乳动物中识别序列稀有的酶,在哺乳动物基因组的 5kb 片 段中，找到Ｎot Ⅰ切点的概率是 。 82.部分酶切是指控制反应条件，使得酶在 DNA 序列上的识别位点只有部分得到切割， 它的理论依据是 。 83.Ⅰ类限制酶识别 DNA 的位点和切割的 DNA 位点是不同的，切割位点的识别结合有 两种模型，一种是 ，另一种是 。 84.限制性内切核酸酶通常保存在 浓度的甘油溶液中。 85.连接酶(ligase)是一类用于核酸分子连接形成 键的核酸合成酶，有 DNA 连接酶和 RNA 连接酶之分
86.原核生物主要有两种类型的DNA连接酶:E. coli DNA连接酶和T4DNA连接酶。 基因工程中使用的主要是T4DNA连接酶,它是从T4噬菌体感染的E.coli中分 离的一种单链多肽酶,分子量为 kDa,由T4噬菌体基因 编 码。E. coli dNA连接酶是由大肠杆菌基因 编码,也是一条多肽链的 单体,分子量为 kDa。这两种DNA连接酶有两个重要的差异 第一是它们在催化反应中所用的能量来源不同,T4DNA连接酶用 而E. cOli dNA连接酶则用 作为能源。第二是它们催化平末 端连接的能力不同,在正常情况下只有性4DNA连接酶能够连接平末端,E. cOli DNA 连接酶则不能。即使是调整反应条件,E. cOli dNa连接酶催化平末端的连接效 率也只有T4DNA连接酶的 87.DNA连接酶的单位通常用 Weiss单位表示,一个 Weiss单位是: 88.DNA聚合酶Ⅰ是 在1965年从大肠杆菌细胞中分离的,所以 又称为 聚合酶。该酶由大肠杆菌基因 编码 是一种单链球蛋白,分子量为109kDa,酶蛋白中含有一个Zn原子。 89.T4DNA聚合酶与 Klenow酶一样,具有5→3’聚合酶和3’→5’外切酶两种活 性,但是它的3’→5’外切酶的活性比 Klenow酶强 倍。该酶的3 5’外切活性既能作用于单链DNA也能作用于双链DNA,不过作用于 链的活性要强于 0.反向转录酶( reverse transcriptase)是由 和 kDa两个亚 单位组成的二聚体,作用时以RNA为模板合成DNA 91.从小牛胸腺中分离纯化的末端转移酶催化的基本反应是将 同时释放出游离的无机磷。催化反应时不需 但 需要引物,单链DNA是最好的引物,单链DNA受体的长度最短需有 个 dNTP。具有3’突出末端的双链DNA也是较好的反应底物。二价离子和DNA末端 状态对催化反应影响较大,但是用 作为辅助离子,可以催化任何形 式的末端(突出的、隐含的、平齐的)加接单核苷酸,但突出的3’端效率较高。以 Mn2/Mg2作为辅助因子,只能在单链DNA或双链DNA的3’突出端加尾c 92.S1核酸酶(S1 nuclease)是从米曲霉( Aspergillus oryzae)中分离纯化的一种含 的金属蛋白,分子量为32kDa,是一种耐热的酶(37-65℃)。 93.在S1保护实验中,S1切割的温度有两种:20℃和45℃,这是因为:在20℃时 在45℃时 技术可以用来鉴定DNA分子中与DNA结合蛋白相互作用 的特定序列。 95.真核生物有两种DNA连接酶,连接酶I主要是参与 而连接酶 Ⅱ则是参与 96.T4RNA连接酶是1972年发现的,并于1977年纯化。该酶是由T4噬菌体基因
57 86.原核生物主要有两种类型的 DNA 连接酶： E．coli DNA 连接酶和 T4 DNA 连接酶。 基因工程中使用的主要是 T4 DNA 连接酶，它是从 T4 噬菌体感染的 E．coli 中分 离的一种单链多肽酶，分子量为 kDa，由 T4 噬菌体基因 编 码。E．coli DNA 连接酶是由大肠杆菌基因 编码，也是一条多肽链的 单体，分子量为 kDa。这两种 DNA 连接酶有两个重要的差异： 第一是它们在催化反应中所用的能量来源不同，T4 DNA 连接酶用 ， 而 E．coli DNA 连接酶则用 作为能源。第二是它们催化平末 端连接的能力不同，在正常情况下只有 T4 DNA 连接酶能够连接平末端，E．coli DNA 连接酶则不能。即使是调整反应条件，E．coli DNA 连接酶催化平末端的连接效 率也只有 T4 DNA 连接酶的 。 87.DNA 连接酶的单位通常用 Weiss 单位表示，一个 Weiss 单位是： 。 88.DNA 聚合酶Ⅰ是 在 1965 年从大肠杆菌细胞中分离的，所以 又称为 聚合酶。该酶由大肠杆菌基因 编码， 是一种单链球蛋白，分子量为 109kDa，酶蛋白中含有一个 Zn 原子。 89.T4 DNA 聚合酶与 Klenow 酶一样，具有 5’→3’聚合酶和 3’→5’外切酶两种活 性，但是它的 3’→5’外切酶的活性比 Klenow 酶强 倍。该酶的 3’ → 5’外切活性既能作用于单链 DNA 也能作用于双链 DNA，不过作用于 链的活性要强于 链。 90.反向转录酶(reverse transcriptase)是由 kDa 和 kDa 两个亚 单位组成的二聚体，作用时以 RNA 为模板合成 DNA。 91．从小牛胸腺中分离纯化的末端转移酶催化的基本反应是将 ， 同时释放出游离的无机磷。催化反应时不需 ，但 需要引物，单链 DNA 是最好的引物，单链 DNA 受体的长度最短需有 个 dNTP。具有 3’突出末端的双链 DNA 也是较好的反应底物。二价离子和 DNA 末端 状态对催化反应影响较大，但是用 作为辅助离子，可以催化任何形 式的末端(突出的、隐含的、平齐的)加接单核苷酸，但突出的 3’端效率较高。以 Mn2+／Mg2+作为辅助因子，只能在单链 DNA 或双链 DNA 的 3’突出端加尾。 92. S1 核酸酶(S1 nuclease)是从米曲霉(Aspergilluc oryzae)中分离纯化的一种含 的金属蛋白，分子量为 32kDa，是一种耐热的酶(37—65℃)。 93．在 S1 保护实验中， S1 切割的温度有两种：20℃和 45℃，这是因为：在 20℃时， ;在 45℃时， 。 94. 技术可以用来鉴定 DNA 分子中与 DNA 结合蛋白相互作用 的特定序列。 95.真核生物有两种 DNA 连接酶，连接酶Ⅰ主要是参与 ，而连接酶 Ⅱ则是参与 。 96．T4RNA 连接酶是 1972 年发现的，并于 1977 年纯化。该酶是由 T4 噬菌体基因
编码,作用是不需要模板。它在体内的作用是参与T4噬菌体 不 参与DNA合成的连接,但在 中可能有作用。 97.DNA聚合酶I的 Klenow大片段是用 切割DNA聚合酶I得到的分子 量为76KDa的大片段,具有两种酶活性:(1) 勺活性 98.反向转录酶除具有以DNA和RNA为摸板合成DNA的5’→3’合成酶的活性外, 还具有4种酶的活性:(1 (4) 99.RNA连接酶作用时除了需要ATP和Mg2外,还需要 100.DNA聚合酶Ⅰ是一种单体酶,分子量为109kDa,它含有金属离 子 101.为了防止DNA的自身环化,可用 脱去双 链DNA_ 102.T4单核苷酸激酶进行DNA片段的5’端标记时,主要是通过两种反应即 和 103.CIP催化脱磷酸时有两种最适温度,一种是37℃,适用于 端脱磷酸 另一种是56℃,适用于 端脱磷酸 104.λ外切核酸酶可从双链DNA的5’端依次切下5’单核背酸,但对不同末端的底 物来说,作用效率不同 最高, 最低 105.EGTA是 离子螯合剂。 106.测序酶是修饰了的T7DMA聚合酶,它只有 酶的活性,而没 有 酶的活性。 107.切口移位 nick translation)法标记DNA的基本原理在于利用 的作用 108.欲将某一具有突出单链末端的双链DNA分子转变成平末端的双链形式,通常可 采用 或 109.反转录酶除了催化DNA的合成外,还具有 的作用,可以将 DNA-RNA杂种双链中的 水解掉。 110.基因工程中有3种主要类型的载体: 111.由于不同构型的DNA插入EB的量不同,它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不 同, SC DNA的泳动速度 ,0CDNA泳动速度 DNA 居中,通过凝胶电泳和EB染色的方法可将不同构型的DNA分别开来。 112.质粒的复制像染色体的复制一样,是从特定的起始点区开始的。然而,质粒的复 制可以是 向的、或是 向的。在杂种质粒中,每个复制子 的起点都可以有效地加以使用。但是在正常条件下只有一个起点可能居支配地 位。并认为:当某些具有低拷贝数的严紧型质粒与松弛性质粒融合后,在正常情 况下的复制起点可能被关闭
58 编码，作用是不需要模板。它在体内的作用是参与 T4 噬菌体 不 参与 DNA 合成的连接，但在 中可能有作用。 97．DNA 聚合酶 Ⅰ的 Klenow 大片段是用 切割 DNA 聚合酶Ⅰ得到的分子 量为 76KDa 的大片段，具有两种酶活性：(1) 。 (2) 的活性。 98．反向转录酶除具有以 DNA 和 RNA 为摸板合成 DNA 的 5’→3’合成酶的活性外， 还具有 4 种酶的活性：(1) ； (2) ； (3) ；(4) 。 99．RNA 连接酶作用时除了需要 ATP 和 Mg2+外，还需要 。 100 ．DNA 聚合酶 Ⅰ 是 一 种 单 体 酶 ， 分 子 量 为 109kDa ，它含有金属离 子 。 101. 为了防止 DNA 的自身环化，可用 脱去双 链 DNA 。 102．T4 单核苷酸激酶进行 DNA 片段的 5’端标记时，主要是通过两种反应即 和 。 103．CIP 催化脱磷酸时有两种最适温度，一种是 37℃，适用于 端脱磷酸； 另一种是 56℃，适用于 端脱磷酸。 104. λ外切核酸酶可从双链 DNA 的 5’端依次切下 5’单核背酸，但对不同末端的底 物来说，作用效率不同， 最高， 最低。 105．EGTA 是 离子螯合剂。 106．测序酶是修饰了的 T7 DNA 聚合酶，它只有 酶的活性，而没 有 酶的活性。 107．切口移位(nick translation)法标记 DNA 的基本原理在于利用 的 和 的作用。 108．欲将某一具有突出单链末端的双链 DNA 分子转变成平末端的双链形式，通常可 采用 或 。 109．反转录酶除了催化 DNA 的合成外，还具有 的作用，可以将 DNA-RNA 杂种双链中的 水解掉。 110．基因工程中有 3 种主要类型的载体： 、 、 。 111．由于不同构型的 DNA 插入 EB 的量不同，它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不 同， SC DNA 的泳动速度 ，OC DNA 泳动速度 ， LDNA 居中，通过凝胶电泳和 EB 染色的方法可将不同构型的 DNA 分别开来。 112．质粒的复制像染色体的复制一样，是从特定的起始点区开始的。然而，质粒的复 制可以是 向的、或是 向的。在杂种质粒中，每个复制子 的起点都可以有效地加以使用。但是在正常条件下只有一个起点可能居支配地 位。并认为：当某些具有低拷贝数的严紧型质粒与松弛性质粒融合后，在正常情 况下的复制起点可能被关闭
113.就克隆一个基因(DNA片段)来说,最简单的质粒载体也必需包括三个部 分 另外,一个理想的质粒载体必须具有低分子量 114.如果两个质粒不能稳定地共存于同一个寄主细胞中,则属于 群 这是因为它们的 所致。 115.质粒拷贝数是指细胞中 116.复制子由三部分组成:(1) (2) 117.酵母的2μm质粒有 可以配对形成哑铃结构。 118.一个带有质粒的细菌在有EB的培养液中培养一段时间后,一部分细胞中已测不 出质粒,这种现象叫 119.pBR322是一种改造型的质粒,它的复制子来源于 它的四环 素抗性基因来自于 它的氨苄青霉素抗性基因来自于 120.质粒的消失同染色体基因的突变是不同的,前者不能恢复,后者可以通过恢 复该基因的性状。 121. ColEl质粒复制的起始需要三种酶,即 122.YAC的最大容载能力是 BAC载体的最大容载能力是 123.pSC101是一种 复制的质粒 124.把那些没有可检测表型的质粒称为 125.转座子主要由下列部分组成:(1) (2) 126.pUC18质粒是目前使用较为广泛的载体。pUC系列的载体是通过」 和 两种质粒改造而来。它的复制子来自 抗性基因则是来自 127在基因型的表示中,符号Ω表示 符号A表示 128.噬菌体之所以被选为基因工程载体,主要有两方面的原因: 是 二是 129.第一个报道的全测序的单链DNA噬菌体是φⅪ174,DNA长5386个碱基对,共个 基因,为一环状DNA分子,基因组的最大特点是 130.λ噬菌体的基因组DNA为 多个基因。在体内, 它有两种复制方式,扩增时(早期复制)按 复制,成熟包装(晚期 复制)则是按 复制。它有一个复制起点,进行 向复制 λ噬菌体的DNA既可以以线性存在又可以环状形式存在,并且能够自然成环 其原因主要是在λ噬菌体线性DNA分子的两端各有一个 个碱基组成的 天然粘性末端。这种粘性末端可以自然成环。成环后的粘性末端部位就叫做 位点。 131.根据噬菌体的包装能力,将野生型λ噬菌体的基因组DNA改造成插入型载体,该 载体的最小分子大小约为 kb,插入的外源片段最大不超过
59 113 ．就 克隆 一 个基 因(DNA 片段) 来说 ， 最简 单的 质 粒载 体 也必 需包 括 三个 部 分： 、 、 。 另外，一个理想的质粒载体必须具有低分子量。 114．如果两个质粒不能稳定地共存于同一个寄主细胞中，则属于 群， 这是因为它们的 所致。 115．质粒拷贝数是指细胞中 。 116. 复制子由三部分组成：(1) (2) (3) 。 117．酵母的 2μm 质粒有 ，可以配对形成哑铃结构。 118．一个带有质粒的细菌在有 EB 的培养液中培养一段时间后，一部分细胞中已测不 出质粒，这种现象叫 。 119．pBR322 是一种改造型的质粒，它的复制子来源于 ，它的四环 素抗性基因来自于 ，它的氨苄青霉素抗性基因来自于 。 120．质粒的消失同染色体基因的突变是不同的，前者不能恢复，后者可以通过 恢 复该基因的性状。 121．Co1El 质粒复制的起始需要三种酶，即 、 和 。 122．YAC 的最大容载能力是 ，BAC 载体的最大容载能力是 。 123．pSC101 是一种 复制的质粒。 124．把那些没有可检测表型的质粒称为 。 125．转座子主要由下列部分组成：(l) （2） (3) 。 126. pUC18 质粒是目前使用较为广泛的载体。 pUC 系列的载体是通过 和 两种质粒改造而来。它的复制子来自 ， Amp 抗性基因则是来自 。 127.在基因型的表示中，符号Ω表示 ；符号 A 表示 。 128. 噬 菌 体 之 所 以 被 选 为 基 因 工 程 载 体 ， 主 要 有 两 方 面 的 原 因 ： 一 是 ；二是 。 129.第一个报道的全测序的单链 DNA 噬菌体是φX174，DNA 长5386 个碱基对，共 个 基因，为一环状 DNA 分子，基因组的最大特点是 。 130.λ噬菌体的基因组 DNA 为 kb，有 多个基因。在体内， 它有两种复制方式，扩增时(早期复制)按 复制，成熟包装(晚期 复制)则是按 复制。它有一个复制起点，进行 向复制。 λ噬菌体的 DNA 既可以以线性存在又可以环状形式存在，并且能够自然成环。 其原因主要是在λ噬菌体线性 DNA 分子的两端各有一个 个碱基组成的 天然粘性末端。这种粘性末端可以自然成环。成环后的粘性末端部位就叫做 位点。 131.根据噬菌体的包装能力，将野生型λ噬菌体的基因组 DNA 改造成插入型载体，该 载体的最小分子大小约为 kb，插入的外源片段最大不超过 kb
132.野生型的M13不适合用作基因工程载体,主要原因是 133.粘粒( cosmid)是质粒-噬菌体杂合载体,它的复制子来自 点序列来自 最大的克隆片段达到 134.有两类改造型的λ噬菌体载体,即插入型和取代型。从酶切点看,插入型为 个 取代型为 135.野生型的λ噬菌体DNA不宜作为基因工程载体,原因是:(1) (3) 136.M13单链噬菌体的复制分为三个阶段:(1) 137.噬菌粒是由质粒和噬菌体DNA共同构成的,其中来自质粒的主要结构 是,而来自噬菌体的主要结构是 138.M3单链噬菌体基因2和基因4之间的IG区有三个最重要的功能,即(1) (3) 139.野生型的M13有10个基因,分为三个功能集团,其中与复制有关的两个基因是: 140.以λ噬菌体载体和粘粒载体构建文库时,起始DNA的长度是不同的,前者为 kb后者为 141.λ噬菌体载体由于受到包装的限制,插入外源DNA片段后,总的长度应在噬菌体 基因组的 的范围内 142.不同的宿主细胞其核酸酶的活性是不同的,如细菌中的HB101菌株及JM系列的 宿主菌所含核酸酶的活性比DH1、LE392等菌株 143.SDS是分离DNA时常用的一种阴离子除垢剂,它有四个作用: 144.酚是蛋白变性剂,用酚抽提细胞DNA时,具有两方面的作用:(1) 145.用酚一氯仿抽提DNA时,通常要在氯仿或酚一氯仿中加少许异戊醇。这是因为: 异戊醇 另外,异戊醇有助 于分相,使离心后的上层含DNA的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维 持稳定。 146.同其他水解蛋白酶相比,蛋白水解酶K具有两个显著的优点:(1) 147.在分离DNA时要使用金属离子整合剂,如EDTA和柠檬酸钠等,其目的是」 148.用乙醇沉淀DNA时,通常要在DNA溶液中加入单价的阳离子,如NaCl和NaAc
60 132.野生型的 M13 不适合用作基因工程载体，主要原因是 和 。 133.粘粒(cosmid)是质粒-噬菌体杂合载体，它的复制子来自 、cos 位 点序列来自 ，最大的克隆片段达到 kb。 134.有两类改造型的λ噬菌体载体，即插入型和取代型。从酶切点看，插入型为 个， 取代型为 个。 135.野生型的λ噬菌体 DNA 不宜作为基因工程载体，原因是：(1) (2) (3) 。 136.M13 单链噬菌体的复制分为三个阶段：(1) （2） (3) 。 137. 噬菌粒是由质粒和噬菌体 DNA 共同构成的，其中来自质粒的主要结构 是 ，而来自噬菌体的主要结构是 。 138.M13 单链噬菌体基因 2 和基因 4 之间的 IG 区有三个最重要的功能，即(l) (2) (3) 。 139.野生型的 M13 有 10 个基因，分为三个功能集团，其中与复制有关的两个基因是： 和 。 140.以λ噬菌体载体和粘粒载体构建文库时，起始 DNA 的长度是不同的，前者为 kb 后者为 kb。 141.λ噬菌体载体由于受到包装的限制，插入外源 DNA 片段后，总的长度应在噬菌体 基因组的 的范围内。 142.不同的宿主细胞其核酸酶的活性是不同的，如细菌中的 HB101 菌株及 JM 系列的 宿主菌所含核酸酶的活性比 DHl、 LE392 等菌株 。 143. SDS 是分离 DNA 时常用的一种阴离子除垢剂，它有四个作用： (1) ； (2) ； (3) ； (4) 。 144.酚是蛋白变性剂，用酚抽提细胞 DNA 时，具有两方面的作用：(1) (2) 。 145.用酚—氯仿抽提 DNA 时，通常要在氯仿或酚—氯仿中加少许异戊醇。这是因为： 异戊醇 。另外，异戊醇有助 于分相，使离心后的上层含 DNA 的水相、中间的变性蛋白相及下层有机溶剂相维 持稳定。 146.同其他水解蛋白酶相比，蛋白水解酶 K 具有两个显著的优点：(1) (2) 。 147.在分离 DNA 时要使用金属离子整合剂，如 EDTA 和柠檬酸钠等，其目的是 。 148.用乙醇沉淀 DNA 时，通常要在 DNA 溶液中加入单价的阳离子，如 NaCl 和 NaAc