生物化学实验教学大纲Biochemistry Experiment（供临床医学专业用）二00八年十月
1 生物化学实验教学大纲 Biochemistry Experiment （供临床医学专业用） 二 OO 八年十月
开课学期：第三学期本课程课内总学时：实验课45学时教学对象：临床医学专业本科学生一、教学目的：二、新世纪培养的高等医学院校的大学生，应了解和掌握一定的现代分子生物学与分子生物学实验的基本理论和方法。为了培养基础扎实、知识面宽、适应性强、有创新意识和能力的高素质人才，本着继承传统试验教学中重视医学基础理论和技能训练的思想，精简了验证性内容和重复性内容，增加了综合性、设计性实验比例，增加了现代分子生物学技术的基本理论和方法。生物化学实验课主要的教学目的使学生掌握作为21世纪的医务工作者必须了解和掌握生物化学与分子生物学实验技术的基本原理和方法并具有现代化和系统化的知识和技能（一）实验基本理论知识加深、巩固、验证生物化学基础理论知识，掌握生物化学实验技能，光谱光度分析技术，离心技术，层析技术，电泳技术的基础理论，了解和掌握分子生物实验技术的基本原理和方法，了解和掌握实验仪器操作原理及方法。（二）实验基本技能加强生物化学基本技术与技能训练，随着设备与仪器的更新，逐步对高、精、新技术与仪器有所了解与掌握，例如离心技术从一般的制备离心方法到分析离心方法，仪器从一般用途低速离心机到超速，高速及特殊用途的离心机：电泳技术，从低压电泳到高压电泳，以用途上分，制备电泳，分析电泳、定量免疫电泳：光谱光度分析技术，从可见分光光度分析技术到紫外分光光度分析技术；层析技术，从精典的柱液相色谱到高压液相层析技术。生化试验，从一般的定性试验，到对某一生物物质较系统、完整综合性的提取、纯化、鉴定和定量，例如：血清V球蛋白的提取，纯化、鉴定和定量。并掌握分子生物学实验技术的基本原理和方法。（三）基本素质1、学习态度：培养学生热爱党，热爱祖国，用所学专业更好的为人类服务，有良好的职业道德，培养严肃认真，实事求是的科学态度和工作作风。2、科学思维：通过试验课，培养学生多种能力，即观察分析，逻辑思维，描素表达，科学总结，创新能力。3、动手能力：通过实验课，培养学生的各种实验操作能力，力求试验操作熟练，结果准确。作到心灵手巧，学以致用。2
2 开课学期：第三学期 本课程课内总学时：实验课 45 学时 一、 教学对象：临床医学专业本科学生 二、 教学目的： 新世纪培养的高等医学院校的大学生，应了解和掌握一定的现代分子生物学 与分子生物学实验的基本理论和方法。为了培养基础扎实、知识面宽、适应性强、 有创新意识和能力的高素质人才，本着继承传统试验教学中重视医学基础理论和 技能训练的思想，精简了验证性内容和重复性内容，增加了综合性、设计性实验 比例，增加了现代分子生物学技术的基本理论和方法。生物化学实验课主要的教 学目的使学生掌握作为 21 世纪的医务工作者必须了解和掌握生物化学与分子生 物学实验技术的基本原理和方法并具有现代化和系统化的知识和技能. (一)实验基本理论知识 加深、巩固、验证生物化学基础理论知识，掌握生物化学实验技能，光谱光 度分析技术，离心技术，层析技术，电泳技术的基础理论，了解和掌握分子生物 实验技术的基本原理和方法，了解和掌握实验仪器操作原理及方法。 （二）实验基本技能 加强生物化学基本技术与技能训练，随着设备与仪器的更新，逐步对高、精、 新技术与仪器有所了解与掌握，例如离心技术从一般的制备离心方法到分析离心 方法，仪器从一般用途低速离心机到超速，高速及特殊用途的离心机；电泳技术， 从低压电泳到高压电泳，以用途上分，制备电泳，分析电泳、定量免疫电泳；光 谱光度分析技术，从可见分光光度分析技术到紫外分光光度分析技术；层析技术， 从精典的柱液相色谱到高压液相层析技术。 生化试验，从一般的定性试验，到对某一生物物质较系统、完整综合性的提取、 纯化、鉴定和定量，例如：血清 v 球蛋白的提取，纯化、鉴定和定量。并掌握 分子生物学实验技术的基本原理和方法。 （三）基本素质 1、学习态度：培养学生热爱党，热爱祖国，用所学专业更好的为人类服务， 有良好的职业道德，培养严肃认真，实事求是的科学态度和工作作风。 2、科学思维：通过试验课，培养学生多种能力，即观察分析，逻辑思维，描 素表达，科学总结，创新能力。 3、动手能力：通过实验课,培养学生的各种实验操作能力,力求试验操作熟练， 结果准确。作到心灵手巧，学以致用
4、自学创造能力：培养学生查找、阅读和运用学习资料，在掌握一定的知识和技能的基础上，力求创新、发明、在事业上有所发展。三、教学要求在教务处统一组织下实施教学，试验课以小班分组操作进行教学。四、教学内容，学时分配（见附表）3
3 4、自学创造能力：培养学生查找、阅读和运用学习资料，在掌握一定的知识 和技能的基础上，力求创新、发明、在事业上有所发展。 三、 教学要求 在教务处统一组织下实施教学，试验课以小班分组操作进行教学。 四、 教学内容，学时分配 （见附表）
附表：石河子大学实验课程教学大纲撰写人签名：罗星医 学院、医学系生化实验室BIOCHEMISTRY生物化学英文名称课程名称EXPERIMENT117学时/45学时/开设实验实验总学时32项课程总学时本科班本科班项目数本大纲属1、统编2、自编3、借用实验教材或指导书1、√统编2、自编实验者类别1、√本科2、√专科3、√研究生4、进修生?其它（专升本5、1、√融立设课实验成绩占实验考试理论技能课程类型20%考核方式课程成绩比例综合考核2、非独立设课面向专业临床医学、药学和中药学专业开出实验项目名称序号学时实验类型实验项目名称31纸层析鉴定转氨基作用验证性实验62 酶的影响因素实验：1.温度对酶活性的影响验证性实验2.激活剂和抑制剂对酶活性的影响3.PH对酶活性的影响33蛋白质等电点的测定验证性实验34 学生自行设计实验精氨酸酶的作用35学生自行设计实验琥珀酸对丙二酸的竞争性抑制作用36综合实验碱性磷酸酶的纯化3综合实验7碱性磷酸酶比活性测定38碱性磷酸酶蛋白含量测定综合实验39综合实验碱性磷酸酶的Km测定310综合试验血清v-球蛋白的盐析分离311血清v-球蛋白凝胶层析脱盐综合试验312离子交换层析纯化血清v-球蛋白综合试验313综合试验电泳鉴定纯化的血清V-球蛋白3综合试验14血清v-球蛋白的紫外分光光度法定量315综合试验血清总胆固醇测定316甘油三酯的测定综合试验317脂肪的消化作用综合试验318综合试验血清脂蛋白琼脂糖电泳319综合试验脂类的薄层层析320酮体的生成和利用综合试验321核酸的提取（盐析，无机溶剂法）综合试验322综合试验核酸的纯化(无机溶剂法323核酸的浓缩(醇法)综合试验324DNA,RNA的定量(紫外分光光度法)综合试验4
4 附表： 石河子大学实验课程教学大纲 医 学院 医学 系 生化 实验室 撰写人签名： 罗星 课程名称 生物化学 英文名称 BIOCHEMISTRY EXPERIMENT 课程总学时 117学时/ 本科班 实验总学时 45学时/ 本科班 开设实验 项目数 32项 本大纲属 1、统编2、√自编 3、借用 实验教材或指导书 1、√统编 2、自编 实验者类别 1、√本科 2、√专科 3、√研究生 4、进修生 5、√其它（专升本） 课程类型 1、√独立设课 2、非独立设课 实验考试 考核方式 理论技能 综合考核 实验成绩占 课程成绩比例 20％ 面向专业 临床医学、药学和中药学专业 开出实验项目名称 序号 实验项目名称 实验类型 学时 1 纸层析鉴定转氨基作用 验证性实验 3 2 酶的影响因素实验：1.温度对酶活性的影响 2.激活剂和抑制剂对酶活性的影响 3. PH对 酶活性的影响 验证性实验 6 3 蛋白质等电点的测定 验证性实验 3 4 精氨酸酶的作用 学生自行设计实验 3 5 琥珀酸对丙二酸的竞争性抑制作用 学生自行设计实验 3 6 碱性磷酸酶的纯化 综合实验 3 7 碱性磷酸酶比活性测定 综合实验 3 8 碱性磷酸酶蛋白含量测定 综合实验 3 9 碱性磷酸酶的Km测定 综合实验 3 10 血清v-球蛋白的盐析分离 综合试验 3 11 血清v-球蛋白凝胶层析脱盐 综合试验 3 12 离子交换层析纯化血清v-球蛋白 综合试验 3 13 电泳鉴定纯化的血清v-球蛋白 综合试验 3 14 血清v-球蛋白的紫外分光光度法定量 综合试验 3 15 血清总胆固醇测定 综合试验 3 16 甘油三酯的测定 综合试验 3 17 脂肪的消化作用 综合试验 3 18 血清脂蛋白琼脂糖电泳 综合试验 3 19 脂类的薄层层析 综合试验 3 20 酮体的生成和利用 综合试验 3 21 核酸的提取(盐析,无机溶剂法) 综合试验 3 22 核酸的纯化(无机溶剂法) 综合试验 3 23 核酸的浓缩(醇法) 综合试验 3 24 DNA,RNA的定量(紫外分光光度法) 综合试验 3
325综合试验核酸的凝胶电泳326酵母RNA的提取和鉴定综合试验3综合试验27血糖的测定(邻一甲苯胺法)328综合试验葡萄糖标准曲线的制备及回收实验329综合试验胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响3综合试验30饱食与饥饿对肝糖原含量的影响3综合试验31红细胞糖酵解的测定332运动对血中乳酸含量的变化综合试验5
5 25 核酸的凝胶电泳 综合试验 3 26 酵母RNA的提取和鉴定 综合试验 3 27 血糖的测定(邻—甲苯胺法) 综合试验 3 28 葡萄糖标准曲线的制备及回收实验 综合试验 3 29 胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响 综合试验 3 30 饱食与饥饿对肝糖原含量的影响 综合试验 3 31 红细胞糖酵解的测定 综合试验 3 32 运动对血中乳酸含量的变化 综合试验 3
纸层析法鉴定转氨基作用实验实验类型@学时3学时开出时间1980年2人2人计划每组人数现在每组人数1实验的目的：用纸层析法鉴定转氨基作用实验的内容：观察α-酮酸与丙氨酸在肝脏谷丙转氨酶催化下的转氨基作用实验操作要点及注意事项：1.酶液的制备2.取圆形滤纸一张，点样时，斑点不可过大，而且每点一滴，用吹风机吹干后方可点第2滴3.纸芯不可以突出滤纸面主要仪器设备序号数量主要设备名称规格型号金额购置日期1玻璃组织匀浆器62水浴箱234水浴锅44吹风机5Conmay II126喷雾器4注：实验类型包括：①基础操作训练②验证性实验③综合性实验④设计性实验③开放实验③其它类型实验6
6 纸层析法鉴定转氨基作用 实 验 实验类型 ① 学时 3 学时 开出时间 1980 年 计划每组人数 2 人 现在每组人数 2 人 实验的目的： 用纸层析法鉴定转氨基作用 实验的内容： 观察 α-酮酸与丙氨酸在肝脏谷丙转氨酶催化下的转氨基作用 实验操作要点及注意事项： 1. 酶液的制备 2. 取圆形滤纸一张，点样时，斑点不可过大，而且每点一滴，用吹风机吹干后方可点第 2 滴 3. 纸芯不可以突出滤纸面 主要仪器设备 序号 主要设备名称 规格型号 数量 金额 购置日期 1 玻璃组织匀浆器 6 2 水浴箱 2 3 水浴锅 4 4 吹风机 4 5 Conmay 皿 12 6 喷雾器 4 注：实验类型包括：①基础操作训练 ②验证性实验 ③综合性实验 ④设计性实验 ⑤开放实验 ⑥其它类型 实验
精氨酸酶的作用实验实验类型@学时3学时开出时间1980年2人2人计划每组人数现在每组人数实验的目的：间接测定精氨酸酶的活性实验的内容：1.肝匀浆的配置2.取Conway氏扩散血，分别标记测定和对照，按顺序加入试剂3.比较测定皿和对照血的颜色实验操作要点及注意事项：取肝匀浆煮沸后冷却备用1. 2.勿使内室和外室试剂相混3.按顺序加入试剂主要仪器设备序号数量主要设备名称规格型号金额购置日期16玻璃组织匀浆器212Conway氏扩散皿32恒温箱注：实验类型包括：①基础操作训练②验证性实验③综合性实验④设计性实验③开放实验③其它类型实验7
7 精氨酸酶的作用 实 验 实验类型 ① 学时 3 学时 开出时间 1980 年 计划每组人数 2 人 现在每组人数 2 人 实验的目的： 间接测定精氨酸酶的活性 实验的内容： 1. 肝匀浆的配置 2. 取 Conway 氏扩散皿，分别标记测定和对照，按顺序加入试剂 3. 比较测定皿和对照皿的颜色 实验操作要点及注意事项： 1. 取肝匀浆煮沸后冷却备用 2. 勿使内室和外室试剂相混 3. 按顺序加入试剂 主要仪器设备 序号 主要设备名称 规格型号 数量 金额 购置日期 1 玻璃组织匀浆器 6 2 Conway 氏扩散皿 12 3 恒温箱 2 注：实验类型包括：①基础操作训练 ②验证性实验 ③综合性实验 ④设计性实验 ⑤开放实验 ⑥其它类型 实验
酶的影响因素实验实验类型@学时3学时开出时间1980年2人2人计划每组人数现在每组人数实验的目的：掌握对酶活性的影响因素实验的内容：1.温度对酶活性的影响因素2.抑制剂和激活剂对酶活性的影响因素PH对酶活性的影响3.实验操作要点及注意事项：1.严格按照操作顺序2.注意试剂的名称3.分析结果，认真比较各管的颜色变化主要仪器设备序号规格型号数量金额购置日期主要设备名称1水浴锅42PH计4注：实验类型包括：①基础操作训练②验证性实验③综合性实验④设计性实验开放实验③其它类型实验8
8 酶的影响因素 实 验 实验类型 ① 学时 3 学时 开出时间 1980 年 计划每组人数 2 人 现在每组人数 2 人 实验的目的： 掌握对酶活性的影响因素 实验的内容： 1. 温度对酶活性的影响因素 2. 抑制剂和激活剂对酶活性的影响因素 3. PH 对酶活性的影响 实验操作要点及注意事项： 1. 严格按照操作顺序 2. 注意试剂的名称 3. 分析结果，认真比较各管的颜色变化 主要仪器设备 序号 主要设备名称 规格型号 数量 金额 购置日期 1 水浴锅 4 2 PH 计 4 注：实验类型包括：①基础操作训练 ②验证性实验 ③综合性实验 ④设计性实验 ⑤开放实验 ⑥其它类型 实验
琥珀酸对丙二酸的竞争性抑制作用实验学时实验类型?3学时开出时间1985年2人2人计划每组人数现在每组人数实验的目的：掌握竞争性抑制作用实验的内容：1.肌肉提取液的制备2.按照样品顺序加入试剂3.将各管摇匀，静置于37℃水浴中保温，随时观察各管褪色情况，并作出记录实验操作要点及注意事项：用干净大试管5支分别加样，注意试管要匹配，可用笔作好标记1.2.加样时，可横着加样，避免污染试剂和吸管摇匀后，于溶液上滴加液体石蜡，以隔绝空气2主要仪器设备序号规格型号数量金额主要设备名称购置日期16组织匀浆器22恒温水浴箱注：实验类型包括：①基础操作训练②验证性实验③综合性实验④设计性实验③开放实验③其它类型实验9
9 琥珀酸对丙二酸的竞争性抑制作用 实 验 实验类型 ③ 学时 3 学时 开出时间 1985 年 计划每组人数 2 人 现在每组人数 2 人 实验的目的： 掌握竞争性抑制作用 实验的内容： 1. 肌肉提取液的制备 2. 按照样品顺序加入试剂 3. 将各管摇匀，静置于 37℃水浴中保温，随时观察各管褪色情况，并作出记录 实验操作要点及注意事项： 1. 用干净大试管 5 支分别加样,注意试管要匹配，可用笔作好标记 2. 加样时，可横着加样，避免污染试剂和吸管 3. 摇匀后，于溶液上滴加液体石蜡，以隔绝空气 主要仪器设备 序号 主要设备名称 规格型号 数量 金额 购置日期 1 组织匀浆器 6 2 恒温水浴箱 2 注：实验类型包括：①基础操作训练 ②验证性实验 ③综合性实验 ④设计性实验 ⑤开放实验 ⑥其它类型 实验
碱性磷酸酶实验?学时实验类型12学时开出时间2000年2人计划每组人数2人现在每组人数实验的目的：掌握酶的纯化、比活性、酶蛋白含量测定和酶Km值测定的原理与方法实验的内容：碱性磷酸酶酶的纯化12.碱性磷酸酶比活性测定碱性磷酸酶蛋白含量测定3.碱性磷酸酶Km值测定（含数据的微机优化处理）4.实验操作要点及注意事项：酶的纯化所用有机试剂必须预先冷冻，所有离心均为冷冻离心12.比活性测定时取量要准确制备标准曲线要准确3.双缩脲比色法测蛋白含量，Km值测定时呈色反应必须充分混合4.主要仪器设备序号数量金额主要设备名称规格型号购置日期14低温冰箱2722分光光度计631冷冻离心机4微机45低温匀浆器4注：实验类型包括：①基础操作训练②验证性实验③综合性实验④设计性实验③开放实验③其它类型实验10
10 碱性磷酸酶 实 验 实验类型 ③ 学时 12 学时 开出时间 2000 年 计划每组人数 2 人 现在每组人数 2 人 实验的目的： 掌握酶的纯化、比活性、酶蛋白含量测定和酶 Km 值测定的原理与方法 实验的内容： 1. 碱性磷酸酶酶的纯化 2. 碱性磷酸酶比活性测定 3. 碱性磷酸酶蛋白含量测定 4. 碱性磷酸酶 Km 值测定（含数据的微机优化处理） 实验操作要点及注意事项： 1. 酶的纯化所用有机试剂必须预先冷冻，所有离心均为冷冻离心 2. 比活性测定时取量要准确 3. 双缩脲比色法测蛋白含量，制备标准曲线要准确 4. Km 值测定时呈色反应必须充分混合 主要仪器设备 序号 主要设备名称 规格型号 数量 金额 购置日期 1 低温冰箱 4 2 分光光度计 722 6 3 冷冻离心机 1 4 微机 4 5 低温匀浆器 4 注：实验类型包括：①基础操作训练 ②验证性实验 ③综合性实验 ④设计性实验 ⑤开放实验 ⑥其它类型 实验