主要内容 一CYP450(P450)简介 二药用植物及低氧条件对cYP450的影响 冷1、甘草、芫花对P450的影响 2、银杏叶提取物对大鼠肝细胞P450蛋白表达的 影响 令3、慢性间断性低氧对大鼠肝细胞P450的影响
主要内容 ❖ 一 CYP450(P450)简介 ❖ 二 药用植物及低氧条件对CYP450的影响 ❖ 1、甘草、芫花对P450的影响 ❖ 2、银杏叶提取物对大鼠肝细胞P450蛋白表达的 影响 ❖ 3、慢性间断性低氧对大鼠肝细胞P450的影响
cYP450简介 细胞色素P450(cYP450或P450):是广泛存在于生物体内的一类含血红 素和硫羟基的蛋白,由结构和功能相关的基因超家族编码形成的超家族 酶系,在450nm处有最大吸收峰,因其还原态与co结合后在450nm 有特异性吸收峰而得名,相对分子质量50kDa。本质为末端氧化酶。 分布及存在状态 原核生物:cYP450游离于胞质中,为一种可溶性蛋白; 真核生物:cYP450作为一种膜结合蛋白,主要分布在内质网和线粒体内 膜上。 生理功能:CYP450主要参与內源性物质(胆酸、维生素D、脂肪酸和激素 等)和外源性物质(药物、毒物、杀虫剂等)的生物转化
一 CYP450简介 细胞色素P450 (CYP450或P450):是广泛存在于生物体内的一类含血红 素和硫羟基的蛋白,由结构和功能相关的基因超家族编码形成的超家族 酶系,在450 nm处有最大吸收峰,因其还原态与CO结合后在450nm 有特异性吸收峰而得名,相对分子质量 50 kDa。本质为末端氧化酶。 分布及存在状态: 原核生物:CYP450游离于胞质中,为一种可溶性蛋白; 真核生物:CYP450作为一种膜结合蛋白,主要分布在内质网和线粒体内 膜上。 生理功能:CYP450主要参与内源性物质(胆酸、维生素D、脂肪酸和激素 等)和外源性物质(药物、毒物、杀虫剂等)的生物转化
P450的命名: 1993年 Nelso等科学家制定了根据氨基酸序列,能反映种族间P450酶 基因超家族内进化关系的统一命名法 凡氨基酸同源性大于40%的视为同一家族( (family),用CYP后标一阿拉 伯数字表示,如cYP2;氨基酸同源性大于55%以上者为同一亚族 ( subfamily),在家族的后面加一个大写字母表示,如CYP2D每一个亚 族中的单个形式的P450酶( (individua),则是在表达式后再加一个阿拉 伯数字,如cYP2D6。目前己知哺乳动物体内有14个CYP家族(包含26 个亚族),涉及体内大多数药物代谢的主要有3个基因家族(CYP1,CYP2 和cYP3) 在哺乳动物肝脏中,参与药物代谢的P450酶系主要是CYP1-CYP3家族 的7种酶,分别为: CYP1A、CYP2A6、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1和 cYP3A4
P450的命名: 1993年Nelso等科学家制定了根据氨基酸序列,能反映种族间P450酶 基因超家族内进化关系的统一命名法: 凡氨基酸同源性大于40%的视为同一家族(family),用CYP后标一阿拉 伯数字表示,如CYP2;氨基酸同源性大于55%以上者为同一亚族 (subfamily),在家族的后面加一个大写字母表示,如CYP2D,每一个亚 族中的单个形式的P450酶(individual),则是在表达式后再加一个阿拉 伯数字,如CYP2D6。目前己知哺乳动物体内有14个CYP家族(包含26 个亚族),涉及体内大多数药物代谢的主要有3个基因家族(CYP1, CYP2 和CYP3) ❖ 在哺乳动物肝脏中,参与药物代谢的P450酶系主要是CYP1-CYP3家族 的7种酶,分别为: CYP1A、CYP2A6、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6、CYP2E1和 CYP3A4
P450的催化反应机制: HO CO,(CH,) H=CH CO,(CH,) CH=CH 2e,2H+ rH+o ROH+h,o AlkOH 1驰豫态 P450 AnkH x·ROH AnkH + ArcOaH e HO Cpdb P450 AnkH Fen 2e CpdO Electrode Alkh 0 SIkH Lewis碱 未端加氧功能使其在碳同化、激素合成、 外源物质降解、前致癌物的活化等 方面起着重要作用。 p450催化反应机制
P450的催化反应机制: p450催化反应机制 Lewis碱 末端加氧功能使其在碳同化、激素合成、 外源物质降解、前致癌物的活化等 方面起着重要作用。 1 驰豫态 CpdI CpdO
P450是自然界中最具催" (m) Dohydrogonebion 化作用多样性的生物催 (b)Alkene epoxidation / Alkyne oxygenation 化剂。它有很广的底物 (c) Arene epoxidation, aromatic hydroxylation, NIH shift 谱,包括外源物如药物, R-c=N·HO (d)N-Doalkylation 工业化合物、抗体等;二 N-CH2OH R-NH2+ HCHO (o Reductive dehalogenation RsM一Rs-cH2→RBH+HCH 醇、荷尔蒙以及其他生“>m (p) N-Oxido roduction go#20(+2. (h)N-Oxidation 理过程产生的脂类等。→y P450参与的反应可以归 R-S-Me X-C-OOH *2 0)OxidatIve deamination (O)NO roduction 纳为包括羟基化,环氧 M+220+0 化,脱烷基化等在内的 Prost end Ha (PGH2) Thromboxane A (xA2) HX (u)Oxidative C-C bond cleavage 数十种类型 ( Alcohol and ±+2H p450催化的各种类型的化学反应
❖ P450是自然界中最具催 化作用多样性的生物催 化剂。它有很广的底物 谱,包括外源物如药物、 工业化合物、抗体等; 也包括多种内源物如甾 醇、荷尔蒙以及其他生 理过程产生的脂类等。 ❖ P450参与的反应可以归 纳为包括羟基化,环氧 化,脱烷基化等在内的 数十种类型. p450催化的各种类型的化学反应
二药用植物及低氧条件对cYP450的影响 1、甘草、芫花提取液对P450的影响 令目的:研究甘草、芫花对主要药物代谢酶cYP1A2、 cYP2EL、CYP3A1/2酶活性的影响,为阐明基于药物代谢 酶的中药相反作用的机制提供参考 方法:制取甘草、芫花提取液;将大鼠随机分为空白组、甘 草组(0.75g/kg/d)、芜花组(0.25g/kg/d)、甘草芫花合 用组(1.00g/kg/d),每组6只。空白组给予生理盐水各药 物组连续灌胃给药7d后处死动物 取肝脏采用超速离心法制备微粒体高效液相色谱法测定微粒 体中CYP1A2、CYP2E1活性采用紫外可见分光光度法测定 cYP3A1/2活性
二 药用植物及低氧条件对CYP450的影响 1、甘草、芫花提取液对P450的影响 ❖ 目的:研究甘草、芫花对主要药物代谢酶CYP1A2、 CYP2E1、CYP3A1/2 酶活性的影响,为阐明基于药物代谢 酶的中药相反作用的机制提供参考。 ❖ 方法:制取甘草、芫花提取液;将大鼠随机分为空白组、甘 草组(0.75g/kg/d) 、芫花组(0.25 g/kg/d ) 、甘草芫花合 用组(1.00g/kg/d ) ,每组6 只。空白组给予生理盐水,各药 物组连续灌胃给药7 d 后处死动物. 取肝脏,采用超速离心法制备微粒体,高效液相色谱法测定微粒 体中CYP1A2、CYP2E1 活性;采用紫外可见分光光度法测定 CYP3A1/2 活性