第一章生物化学实验基本知识与操作 第一节生物化学实验基本知识 第二节 第二章分光光度技术 实验一双缩脲法测定蛋白质浓度 实验二 Folin-酚试剂法(Lowry 法)测定蛋白质浓度 实验三紫外分光光度法测定蛋白质浓度 实验四考马斯(Comessie)亮兰结合法测定蛋白质浓度 实验五BCA 法测定蛋白质浓度 实验六激素对血糖浓度的影响及血糖的测定 第三章生物大分子的提取、沉淀和离心分离技术 第一节生物材料的选取与预处理 第二节生物大分子的沉淀分离技术 第三节生物大分子离心分离技术 实验七鸡血SOD的提取、分离及活力测定 实验八碱性磷酸酶的制备及活力测定 实验九酪蛋白的制备 实验十动物肝脏中提取DNA 实验十一猪心肌细胞线粒体可溶性ATP合酶的提 第四章电泳技术 实验十二DNA 琼脂糖凝胶电泳 实验十三血浆脂蛋白琼脂糖凝胶电泳 实验十四聚丙烯酰胺凝胶电泳分离乳酸脱氢酶同工酶 实验十五蛋白质分子量的测定——SDS-聚丙烯凝胶电泳 实验十六聚丙烯酰胺等电聚焦电泳 第五章层析技术 第一节 层析技术概述 吸附层析 第三节 分配层析 第四节 离子交换层析 第五节 凝胶层析 第六节亲和层析 第七节 高效液相层析 实验十七氨基酸的纸上层析与氨基酸的转氨基作用 实验十八血清-球蛋白的分离纯化与鉴定 实验十九 亲和层析纯化胰蛋白酶 实验十二离子交换层析分离氨基酸 实验二十一蛋白质分子量测定——凝胶过滤层析法 第六章 分子生物学基本技术 核酸分子杂交 聚合酶链反应 第三节分子克隆 实验二十二Southern杂交分析 实验二十三 Northern 杂交分析 实验二十四 PCR 基因扩增 验二十五质粒DNA的提取及酶切 实验二十六 DNA重组实验 实验二十七大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 附录一常用缓冲液的配制方法 附录二易变质及需要特殊方法保存的试剂 附录三一般化学试剂的分级 附录四 English words in the lab

第一章 蛋白质（酶）、核酸的分离纯化 第一节 引言 一、分离纯化的意义 二、分离纯化的要求 三、分离纯化的一般程序 第二节 蛋白质（酶）、核酸分离纯化的前处理 一、材料的选择与预处理 二、细胞的破碎 三、细胞器的分离 四、提取 第三节 分离纯化 一、 粗提纯 二、 精提纯 三、 纯度鉴定 第四节 生物大分子的浓缩、干燥及保存 第二章 离心技术 ▪ 离心技术概论 ▪ 一般制备离心 ▪ 超离心技术 第三章 层析技术 引言 层析法的基本原理 层析法的分类 第一节 吸附层析技术 第二节 分配层析技术 第三节 凝胶过滤层析技术 第四节 离子交换层析法 第五节 亲和层析法 第六节 高压液相层析（HPLC） 第四章 电泳技术 引言 第一节 电泳的基本原理 第二节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 第三节 琼脂糖凝胶电泳 第四节 免疫电泳 一、概述 二、聚丙烯酰胺凝胶的制备 三、凝胶浓度和交联度与孔径大小的关系 四、不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳

▪ 1 层析法概述 ▪ 2 柱层析 ▪ 3 纸层析 ▪ 4 薄层层析 ▪ 5 吸附层析 ▪ 6 分配层析 ▪ 7 凝胶过滤 ▪ 8 电泳法 ▪ 9 毛细管电泳 ▪ 10高效液相色谱

第四节 凝胶过滤层析 ( Gel filtration chromatography，GFC ) 第五节 离子交换层析 Ion exchange chromatography, IEC 第六节 疏水性相互作用层析 第七节 亲和吸附层析 Immunoaffinity chromatography

根据上述假设导出的平衡塔板理论，初步阐明了溶质的分布随柱内流动相 体积的变化规律，导出了层析洗脱曲线方程（曲线方程从略）。它形象定量地描 述了层析柱的柱效率等，初步揭示了层析分离的真实过程。对层析技术的发展 起了重要的推动作用

第一节 层析原理与分类 第二节 常用的层析介质 第三节 层析过程的基本原理 第四节 分离度

第一章概论-生命大分子物质的制备 第二章沉淀法 第三章吸附层析 第四章疏水层析 第五章离子交换层析 第五章凝胶过滤 第六章亲和层析 第七章SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 第八章等电聚焦电泳 第九章鉴定方法

一、纸层析和薄层层析分离过程 二、操作技术 三、特点及应用

要熟悉流管柱层析法需要适当的练习。此影片将会让从你填充 的适当条件技巧开始、填充及进行管柱层析,甚至用管子做一个微 管柱层析。 It takes considerable practice to master the art of \running a column\. This video will get you started, with tips on picking appropriate conditions, packing and running a column, monitoring separation, and even making a micro-column from a pipet

一、实验目的 1. 了解凝胶层析的原理及其应用。 2. 通过测定蛋白质分子量的训练，初步掌握凝胶层析技术