BUCT 第七章层析 (chromatography）
BUCT 1 第七章 层析 （chromatography）
第一节层析原理与分类 BUCT 一.分离依据 层析是根据混合物中，溶质在互不混溶的两相之间分配 行为的差别，引起移动速度的不同而进行分离。 二.应用 分离精度高，设备简单，操作方便 定量分析与检测； 制备分离和纯化： 最重要的纯化技术
BUCT 2 第一节 层析原理与分类 层析是根据混合物中，溶质在互不混溶的两相之间分配 行为的差别，引起移动速度的不同而进行分离。 分离精度高，设备简单，操作方便 ◼ 定量分析与检测； ◼ 制备分离和纯化； ◼ 最重要的纯化技术。 一. 分离依据 二．应用
三，层析原理 BUCT 三通阀 层析柱 泵泵个 互不混溶的 两相： 柱内 层析带 流 固定相(stationary phase 液 流动相 mobile phase） 检测器 一收集器 图7.1柱层析设备和操作示意图
BUCT 3 三. 层析原理 固定相（stationary phase） 流动相（mobile phase） 互不混溶的 两相：
8 人：BUCT 送 ▣ 吕日会 口4 0000 ▣▣ 000 吕日
BUCT 4
四.分类 BUCT 溶质通过固定相时，分子吸附在 吸附色谱 上面，后解吸，必须更换流动相 根据原 靠各物质与固定相之间的离子交 离子交换层析 换能力的不同而分离： 靠各物质与固定相之间的疏水作 类 疏水色谱 用的强弱不同而分离： 亲和色谱 生物大分子与各种配基的生物识 别能力的差异而分离：
BUCT 5 四． 分类 根 据 原 理 分 类 吸附色谱 溶质通过固定相时，分子吸附在 上面，后解吸，必须更换流动相 离子交换层析 靠各物质与固定相之间的离子交 换能力的不同而分离； 疏水色谱 靠各物质与固定相之间的疏水作 用的强弱不同而分离； 亲和色谱 生物大分子与各种配基的生物识 别能力的差异而分离；
反向色谱： 溶质与固定相和流动相的作用力 的不同 没有吸附在固定相上，由于分子 迁移色谱： 性质的差异使其出来的先后次序 不同 凝胶色谱： 靠各物质的大小或形状不同而 分离
BUCT 6 靠各物质的大小或形状不同而 分离。 反向色谱： 溶质与固定相和流动相的作用力 的不同 迁移色谱： 没有吸附在固定相上，由于分子 性质的差异使其出来的先后次序 不同 凝胶色谱：
根据流动相与固定相分类 BUCT 流动相的相 气相层析法 状态 液相层析法大 超临界流体层析法 固定相有固体、液体和以固体为载体的液体薄层
BUCT 7 根据流动相与固定相 分类 流动相的相 状态 气相层析法 液相层析法 ★ 超临界流体层析法 固定相有固体、液体和以固体为载体的液体薄层
固定相的形状 BUCT 根据固定相或层析装置形状的不同，液相层析又分为： 纸层析法(Paper chromatography) 多用 薄层层析法(Thin-layer chromatography) 柱层析法(Column chromatography) 易于放大，适合于大量制备放大
BUCT 8 柱层析法(Column chromatography) 固定相的形状 根据固定相或层析装置形状的不同，液相层析又分为： 纸层析法（Paper chromatography） 薄层层析法(Thin-layer chromatography) 多用 于分 析 ――易于放大，适合于大量制备放大
BUCT 径向流层析 易放大： 优点： 柱效率高： Column Porous packing filter 适宜大规模生产 ● 缺点： 888 5数88 柱设备造价高： 实际应用少
BUCT 9 径向流层析 易放大； 柱效率高； 适宜大规模生产 优点： 柱设备造价高； 实际应用少 缺点：
分离操作方式： BUCT 洗脱展开(elution derelopment) 迎头分析(frontal analysis) P163 J顶替展开(displacement development) √洗脱展开：料液中的溶 质根据其在固定相和流动 相（洗脱液）间分配行为 B 的不同，在层析柱出口处 翠 被展研形成相互分离的层 析峰 时间（或流出液体积） 10
BUCT 10 洗脱展开(elution derelopment) 迎头分析(frontal analysis) 顶替展开(displacement development) 分离操作方式： P163 √ 洗脱展开：料液中的溶 质根据其在固定相和流动 相（洗脱液）间分配行为 的不同，在层析柱出口处 被展开形成相互分离的层 析峰