一、针对不同的产物表达形式采取不同的策略 二、针对不同性质的重组蛋白选择不同的层析类型 三、多种分离纯化技术的联合运用 四、合适分离纯化介质的选择

A高等哺乳动物基因工程的基本概念 B高等哺乳动物的受体系统 C高等哺乳动物的载体系统 D高等哺乳动物的基因转移 E利用哺乳动物工程细胞生产重组蛋白

第一节 基因工程(Genetic Engineering)概述 第二节 工具酶 第三节 常用的目的基因制备方法 第三节 载体（Vector)和宿主细胞 第四节 目的基因和载体的体外连接 第五节 将重组DNA分子导入宿主细胞 第六节 目的基因的筛选和鉴定 第七节 克隆基因的表达 第八节 外源蛋白表达产物的鉴定 第九节、基因工程在医学中的的应用

第一节 基因工程概述 (Genetic Engineering) 第二节 工具酶 第三节 常用的目的基因制备方法 第四节 载体（Vector)与宿主细胞 第五节 目的基因和载体的体外连接 第六节 将重组DNA分子导入宿主细胞 第七节 目的基因的筛选和鉴定 第八节 克隆基因的表达 第九节 外源蛋白表达产物的鉴定 第十节 基因工程在医学中的应用

第一节 基因工程概述 第二节 基因工程的一般技术 第三节 基因工程的应用发展前景 一、基因工程的应用 （1）基因工程在农业方面的应用 （2）基因工程在工业及环境保护方面的应用 （3）基因工程在医药方面的应用 二、基因工程的发展趋势 ①各国对基因的争夺呈现白热化 ②单基因生物性抗逆向持久性抗逆的转变 ③生物性抗逆向非生物性抗逆的转变 ④目标性状的研究重点将从目前的“抗性”向“品质”转变 ⑤利用转基因植物生产稀有蛋白等产品

一、基因克隆的目的与意义 二、基因文库技术 三、功能蛋白组技术 四、图位克隆法 五、mRNA差异显示法 六、转座子、T-DNA标签法 七、同源序列法 八、功能互补法 九、基因组扣除杂交法 十、酵母双杂交系统

从烟草根际土壤中成功筛选出10株解钾细菌,并选择其中四种透明圈明显且生长量较大的菌种进行了解钾活性测定,其中解钾细菌GJ07的发酵液中K+离子质量浓度高出空白对照组54.5%.对GJ07进行16S rDNA的鉴定,确定其为巨大芽孢杆菌.采用批量发酵培养,通过改变碳源、氮源、碳氮比、温度、pH值、装液量等研究了解钾细菌GJ07生长的优化控制条件.结果表明蔗糖和蛋白胨为GJ07生长的最佳碳源和氮源（碳氮质量比为10：1）,最适宜生长温度为35℃,最适宜初始pH值为7.00,最佳装液量为25 mL

1培养基的组成及配制 1.2种子培养基 培养基组成: 200ml:豆粉6g,饴糖1g,酵母膏0.2g,MSO40.4g,KH2P40.4g.放入高压灭菌锅,121℃,20min灭菌。 灭菌操作完毕,将上述物品并洗耳球转入超净台,接种前20min进行紫外空气灭菌。 1.3产酶培养基 培养基组成:

A高等哺乳动物基因工程的基本概念 B高等哺乳动物的受体系统 C高等哺乳动物的载体系统 D高等哺乳动物的基因转移 E利用哺乳动物工程细胞生产重组蛋白

第一篇 基因工程制药综合实验. 7 实验一 基因的 PCR 扩增反应. 8 实验二 水平式琼脂糖凝胶电泳法检测 DNA. 11 实验三 DNA 的重组连接. 14 实验四 重组质粒的转化 . 18 实验五 转化子 DNA 的快速提取. 22 实验六 重组转化子的 PCR 鉴定. 24 第二篇 细胞工程制药综合实验. 26 实验一 细胞培养. 26 实验二 PEI 转染动物细胞 . 28 实验三 动物细胞蛋白的提取方法 . 31 实验四 蛋白浓度测定方法. 32 实验五 SDS-PAGE 电泳. 33 实验六 WESTERN BLOT 检测 . 35 第三篇 酶工程制药综合实验. 41 高产淀粉酶菌株的筛选 . 41 第四篇 沙棘粗多糖的提取、纯化及鉴定. 45 第五篇 免疫组织化学检测. 48 第六篇 发酵罐说明及使用. 51 实验一 气升式生化反应器的应用 . 51 实验二 中试发酵设备的使用方法 . 53 附录 发酵罐的简介. 56