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第一节 碱基互补的能力 第二节 限制性内切酶 第三节 重组DNA 第四节 重组DNA方法学 第五节 DNA序列分析 第六节 基因工程 第七节 遗传病——基因诊断和基因治疗 第八节 基因工程生物技术和社会伦理问题
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把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫 载体(Vector).细菌质粒是重组DNA技术中常用的载体。 质粒(Plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子,大小从1-200kb不等,为双链、闭环的DNA分子, 并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中,它具有自主复制 和转录能力能在子代细胞中保持恒定的拷贝数并表达所携带的遗传信息
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近年来,重组DNA技术(基因工程)已开始由实验室走向工业生产,走向实 用。它不仅为我们提供了一种极为有效的菌种改良技术和手段,也为攻克医学上的 疑难杂症—癌、遗传病及艾滋病的深入研究和最后的治愈提供了可能;为农业的 第三次革命提供了基础;为深入探索生命的奥秘提供了有力的手段。现在由工程菌 产生的珍稀药物,如胰岛素、干扰素、人生长激素、乙肝表面抗原等等部已先后面 市,基因工程不仅保证了这些药物的来源,而且可使成本大大下降。但是从许多研 究中发现,工程菌在保存过程中及发酵生产过程中表现出不稳定性,因而工程菌不 稳定性的解决已日益受到重视并成为基因工程这一高技术成就转化为生产力的关键 之一
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包括①凝胶电泳②细菌的转化和转染③核酸分子杂交④定点突变⑤PCR⑥RFLP⑦RAPD⑧DNA序列分析⑨目的基因的分离和转基因植物、转基因动物等技术
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1.掌握:重组DNA技术、限制性核酸内切酶、载体的概念;II型限制性内切酶的作用特点;重组DNA技术的操作步骤。2.熟悉:转化、转导及转染的概念;抗生素抗性基因筛选和蓝白斑筛选的原理。3.了解:DNA重组技术的应用及与医学的关系
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基因诊断是利用DNA分子杂交等分子生物学技术,直接探查人体基因组DNA存在的缺陷或是基 因表达产物的异常,从而对人体状态和疾病作出诊断。基因诊断也称DNA诊断或DNA探针技术或基因探针技术,是20世纪70年代末迅速发展起来的一 项应用技术。快速灵敏、准确可靠的现代分子生物学技术是基因诊断的先决条件
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现代生物技术(生物工程)的概念 建立在分子遗传学、生物化学、微生物学以及化学工程 计算技术等基础上的现代生物技术,是20世纪后半叶蓬勃 发展起来的新技术领域,为人类保健、农牧业、食品工业 环境保护等提供了强大的发展动力
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第一节、重组DNA技术-基因工程 第二节、分子杂交及相关技术 第三节、聚合酶链反应的原理和应用 第四节、基因定位的常用方法
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11.1重组DNA技术是基因工程的核心技术 11.2获得需要的目的基因(外源基因) 11.3构建重组质粒和基因克隆 11.4转化受体细胞和转化子的筛选 11.5转化子的分析 Southern杂交
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第一节 概述 第二节 原理与方法 重组子的构建 启动子 目的基因 终止子 第四节 外源基因的整合、表达与遗传 第五节 转基因水产动物的安全性
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