把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫 载体(Vector).细菌质粒是重组DNA技术中常用的载体。 质粒(Plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子,大小从1-200kb不等,为双链、闭环的DNA分子, 并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中,它具有自主复制 和转录能力能在子代细胞中保持恒定的拷贝数并表达所携带的遗传信息

实验一 质粒DNA的小量提取 实验二 质粒DNA的酶切和电泳鉴定 实验三 重组DNA分子的构建 实验四 重组子的检测及限制性酶切鉴定 实验五 大肠杆菌感受态细胞的制备 实验六 质粒DNA分子导入原核细胞 实验七 聚合酶链式反应（PCR）扩增DNA片断 实验八 植物基因组DNA的提取 实验十 植物总RNA的提取及其电泳鉴定

1.Cacl2法制备感受态细胞 2.目的基因与载体的连接 3.重组质粒转化大肠杆菌并筛选转化体

实验一：移液器使用. 4 实验二：质粒DNA的限制性内切酶消化.9 实验三：琼脂糖凝胶电泳检测DNA.11 实验四、五：目的片段的切胶回收与 DNA 重组.14 实验六、七：大肠杆菌感受态细胞的制备及转化.17 实验八：（重组）质粒 DNA 的提取.21 实验九：PCR 基因扩增技术筛选重组子.24 实验十：外源基因在大肠杆菌中的诱导表达和检测.26

第一节 遗传的物质基础 第二节 微生物的基因组结构 重点：原核及真核微生物基因组的基本特征 第三节 质粒和转座因子 重点：质粒与转座因子的基本特征及类型 第四节 基因突变及修复 重点：基因突变的规律 第五节 细菌基因转移和重组 重点：三种基因水平转移方式及其应用 第六节 菌种保藏方法

第四节 基因突变及修复 第五节 细菌基因的水平转移和重组 第三节 质粒和转座因子 第六节 真核微生物的遗传学特性 第七节 微生物育种 第八节 菌种保藏

11.1重组DNA技术是基因工程的核心技术 11.2获得需要的目的基因(外源基因) 11.3构建重组质粒和基因克隆 11.4转化受体细胞和转化子的筛选 11.5转化子的分析 Southern杂交

第一节 遗传的物质基础 第二节 微生物的变异(variation) 第三节 基因重组 第四节 遗传工程技术与环境保护中的应用 质粒育种 基因工程 PCR

第一节 遗传变异的物质基础 第二节 微生物的基因组结构 第三节 质粒和转座因子 第四节 基因突变及修复 第五节 基因重组 第六节 微生物育种 第七节 菌种的衰退、复壮与保藏

第一节 遗传变异的物质基础 第二节 微生物的基因组结构 第三节 质粒和转座因子 第四节 基因突变及修复 第五节 基因重组 第六节 微生物育种 第七节 菌种的衰退、复壮与保藏