《系统软件与软件安全》课程教学课件（PPT讲稿，英文）Lecture-8-SDS-vision

厦门大学：《生物化学实验》课程教学资源（讲稿）SDS-PAGE+蛋白质电泳检测碱性磷酸酶

第一篇 基因工程制药综合实验. 7 实验一 基因的 PCR 扩增反应. 8 实验二 水平式琼脂糖凝胶电泳法检测 DNA. 11 实验三 DNA 的重组连接. 14 实验四 重组质粒的转化 . 18 实验五 转化子 DNA 的快速提取. 22 实验六 重组转化子的 PCR 鉴定. 24 第二篇 细胞工程制药综合实验. 26 实验一 细胞培养. 26 实验二 PEI 转染动物细胞 . 28 实验三 动物细胞蛋白的提取方法 . 31 实验四 蛋白浓度测定方法. 32 实验五 SDS-PAGE 电泳. 33 实验六 WESTERN BLOT 检测 . 35 第三篇 酶工程制药综合实验. 41 高产淀粉酶菌株的筛选 . 41 第四篇 沙棘粗多糖的提取、纯化及鉴定. 45 第五篇 免疫组织化学检测. 48 第六篇 发酵罐说明及使用. 51 实验一 气升式生化反应器的应用 . 51 实验二 中试发酵设备的使用方法 . 53 附录 发酵罐的简介. 56

3.1蛋白质表达系统 3.1.1 E. coli蛋白表达系统 3.1.2哺乳动物表达系统 3.1.3昆虫表达系统 3.1.4硒代蛋白表达 3.2蛋白纯化技术 3.2.1 AKTA使用规则及使用实例 3.2.2蛋白纯化柱子的介绍及清洁方法 3.2.3透析袋的使用 3.2.4浓缩管的使用 3.2.5 TEV蛋白酶的使用 3.2.6金属螯合层析 3.2.7分子筛 3.2.8疏水作用层析 3.2.9离子交换层析 3.2.10 Protein A/G 纯化抗体 3.2.11谷胱甘肽转移酶 (GST) 亲和层析 3.2.12 Fab的蛋白表达 3.2.13植物种子蛋白的提取方案 3.2.14包涵体复性 3.2.15 SDS-PAGE凝胶电泳 3.2.16 GraphPad Prism软件的使用 3.3筛选与蛋白互作的分子 3.3.1酵母双杂交技术从文库中筛选与蛋白X结合的蛋白 3.3.2噬菌体展示 3.3.3配体指数富集的系统进化技术筛选核酸适配体 3.4检测蛋白与互作分子的互作 3.4.1酵母双杂交 Yeast two hybrid 3.4.2双分子荧光互补Bimolecular fluorescence complementation 3.4.3 Western Blotting 3.4.4免疫共沉淀Co-Immunoprecipitation 3.4.5差示扫描荧光技术Differential Scanning Fluorimetry 3.4.6荧光偏振Fluorescence polarization 3.4.7等温滴定微量热Isothermal Titration Calorimetry 3.4.8表面等离子共振技术Biacore 3.4.9蛋白质交联Crosslink 3.4.10 Native-PAGE 3.4.11静态光散射Static light scattering 3.4.12凝胶阻滞实验EMSA-electrophoretic mobility shift assay 3.5蛋白生化实验技术 3.5.1蛋白酶活性检测 3.5.2 ATP酶活检测 3.5.3解旋酶活性检测 3.5.4体外转录实验

实验一 淀粉的提取和水解. 4 实验二 总糖与还原糖的测定. 6 实验三 蛋白质等电点测定. 9 实验四 酪蛋白的制备. 11 实验五 氨基酸的分离鉴定－纸层析法. 13 实验六 蛋白质含量的测定. 16 实验七 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳. 29 实验八 SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质亚基分子量. 36 实验九 底物浓度对酶活力的影响（米氏常数的测定） . 41 实验十 影响酶活性的因素. 45 实验十一 猪脾 DNA 的制备. 49 实验十二 DNA 的定量测定. 52 实验十三 维生素 C 的定量测定. 54 仪器的使用. 60

实验 1 韦克斯勒儿童智力量表（WISC-CR）. 2 实验 2 联合型瑞文测验（CRT） . 6 实验 3 明尼苏达多项个性调查表（MMPI） . 9 实验 4 卡特尔 16 种人格因素问卷（16PF） .13 实验 5 艾森克人格问卷（EPQ） .17 实验 6 90 项症状清单（SCL－90）.19 实验 7 抑郁自评量表（SDS）与焦虑自评量表（SAS） .22 实验 8 生活事件量表（LES）.26 实验 9 社会支持评定量表.29 实验 10 应对方式问卷.31 实验 11 霍兰德职业性向测验 .33 实验 12 多项职业技能测定（综合性）.35

实验一 动物DNA的提取 . 3 实验二 琼脂糖凝胶电泳检测DNA. 8 实验三 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳检测外源蛋白的表达. 10 实验四 PCR体外扩增DNA片段与扩增产物的检测分析 . 错误！未定义书签。 实验五 从琼脂糖凝胶中回收DNA片断. 错误！未定义书签。 实验六 目的基因片段与载体连接. 错误！未定义书签。 实验七 RAPD和ISSR技术. 20 实验八 SSR简单序列重复标记 . 22 实验九 PCR 单链构象多态性分析. 错误！未定义书签。 实验十 DNA指纹图谱分析. 24 实验十一 动物总 RNA 的提取及含量测定 . 27 实验十二 动物组织mRNA提取实验方法.34 实验十三 RNA的定量和完整性分析.35 实验十四 综合实验：逆转录 PCR .38 附录：常用缓冲液的配置.41

锦州医科大学：《分子医学实验技术》课程教学课件（讲稿）SDS-PAGE 聚丙烯酰胺凝胶电泳

第一篇 基因工程制药综合实验. 7 实验一 基因的 PCR 扩增反应. 8 实验二 水平式琼脂糖凝胶电泳法检测 DNA. 11 实验三 DNA 的重组连接. 14 实验四 重组质粒的转化 . 18 实验五 转化子 DNA 的快速提取. 22 实验六 重组转化子的 PCR 鉴定. 24 第二篇 细胞工程制药综合实验. 26 实验一 细胞培养. 26 实验二 PEI 转染动物细胞 . 28 实验三 动物细胞蛋白的提取方法 . 31 实验四 蛋白浓度测定方法. 32 实验五 SDS-PAGE 电泳. 33 实验六 WESTERN BLOT 检测 . 35 第三篇 酶工程制药综合实验. 41 高产淀粉酶菌株的筛选 . 41 第四篇 沙棘粗多糖的提取、纯化及鉴定. 45 第五篇 免疫组织化学检测. 48 第六篇 发酵罐说明及使用. 51 实验一 气升式生化反应器的应用 . 51 实验二 中试发酵设备的使用方法 . 53 附录 发酵罐的简介. 56

第一章 生物化学部分.1 实验一、双缩脲法测定血清蛋白质含量. 1 实验二、纸层析法观察转氨基作用. 2 实验三、血清醋酸纤维薄膜电泳. 4 实验四、血清丙氨酸氨基转移酶活性测定. 7 实验五、胰酶对蛋白质的消化和影响酶作用的因素. 10 实验六、酶的竞争性抑制作用. 13 实验七、血糖浓度的测定. 16 实验八、血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定. 18 第二章 分子生物学部分.25 实验一、质粒 DNA 的提取制备与检测. 25 实验二、PCR 技术. 28 实验三、DNA 的限制性酶切与电泳. 31 实验四、DNA 连接实验. 38 实验五、重组 DNA 转化与篮白斑筛选. 41 实验六、SDS-PAGE 测定蛋白质的相对分子量. 44