第一节 基因工程概述 第二节 微生物与基因工程工具酶 第三节 微生物与克隆载体 第四节 微生物作为克隆载体的宿主 第五节 基因工程的常用技术和方法

第一节 基因工程概述 第二节 微生物与基因工程工具酶 第三节 微生物与克隆载体 第四节 微生物作为克隆载体的宿主 第五节 基因工程的常用技术和方法

载体必备条件: 1.是一个复制子; 2.载体在受体细胞中能大量繁殖,其携带的外源基因才能在受体细胞中得到大量扩增; 3.有1到几个限制内切酶的单一识别与切割位点,便于外源基因的插入; 4.具有选择性的遗传标记(如抗生素抗性标记等)以此知道它是否已进入受体细胞,并据此标记将受体细胞从其他细胞中分离出来

基因诊断与基因治疗能够在比较短的时间从理论设想变为现实,主要是由于分子生物学 的理论及技术方法,特别是重组DNA技术的迅速发展,使人们可以在实验室构建各种载 体、克隆及分析目标基因。所以对疾病能够深入至分子水平的研究,并取得了重大的进 展。因此在20世纪70年代末诞生了基因诊断(gene diagnosis):随后于1990年美国实施了第 一个基因治疗(gene therapy)的临床试验方案。可见,基因诊断和基因治疗是现代分子生物学 的理论和技术与医学相结合的范例

11.1重组DNA技术是基因工程的核心技术 11.2获得需要的目的基因(外源基因) 11.3构建重组质粒和基因克隆 11.4转化受体细胞和转化子的筛选 11.5转化子的分析 Southern杂交

第一节 基因工程(Genetic Engineering)概述 第二节 工具酶 第三节 常用的目的基因制备方法 第三节 载体（Vector)和宿主细胞 第四节 目的基因和载体的体外连接 第五节 将重组DNA分子导入宿主细胞 第六节 目的基因的筛选和鉴定 第七节 克隆基因的表达 第八节 外源蛋白表达产物的鉴定 第九节、基因工程在医学中的的应用

第一节 基因工程概述 (Genetic Engineering) 第二节 工具酶 第三节 常用的目的基因制备方法 第四节 载体（Vector)与宿主细胞 第五节 目的基因和载体的体外连接 第六节 将重组DNA分子导入宿主细胞 第七节 目的基因的筛选和鉴定 第八节 克隆基因的表达 第九节 外源蛋白表达产物的鉴定 第十节 基因工程在医学中的应用

第三节 DNA重组技术过程 1、制备目的基因和相关载体 2、将目的基因和有关载体进行连接 3、将重组本DNA导入受体细胞 4、DNA重组体的筛选和鉴定 5、DNA重组体的扩增、表达和其他研究 第五节 利用重组DNA技术可对基因进行改造 第六节 克隆基因在适当宿主细胞内表达

(一)基因工程的概念 1.遗传工程广义;细胞工程-体细胞、原生质体的培养与杂交细器---细胞核的移植:回交,克隆羊染色体----条染色体或染色体片断的切割或转移基因工程狭义:基因工程:体外不经过有性繁殖,有目的地使DNA发生重组的技术体系。故又称重组DNA技术

第三节 DNA重组技术过程 1、制备目的基因和相关载体 2、将目的基因和有关载体进行连接 3、将重组本DNA导入受体细胞 4、DNA重组体的筛选和鉴定 5、DNA重组体的扩增、表达和其他研究 第五节 利用重组DNA技术可对基因进行改造 第六节 克隆基因在适当宿主细胞内表达