第一节 酶类药物的原料来源 第二节 酶类药物的提取和纯化 第三节 酶类药物

细胞产生的酶有二类: 1.由细胞内产生后分泌到胞外发挥作用的酶,称为细胞外 酶。这类酶大部分属于水解酶。此类酶通常含量高,容易 得到。 2.在细胞内合成后并不分泌到细胞外,而在细胞内起催化 作用,称为细胞内酶,该类酶在细胞内往往与细胞器结合, 不仅有一定的区域性,而且催化的反应具有一定顺序性

DNA克隆(DNA cloning)：应用酶学的方法，在 体外将目的基因与载体DNA结合成一具有自我复 制能力的DNA分子—复制子，继而通过转化或转 染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子细胞， 再进行扩增、提取获得大量同一DNA分子的过程。 DNA克隆又称基因克隆（gene cloning）

第一章 生物化学部分.1 实验一、双缩脲法测定血清蛋白质含量. 1 实验二、纸层析法观察转氨基作用. 2 实验三、血清醋酸纤维薄膜电泳. 4 实验四、血清丙氨酸氨基转移酶活性测定. 7 实验五、胰酶对蛋白质的消化和影响酶作用的因素. 10 实验六、酶的竞争性抑制作用. 13 实验七、血糖浓度的测定. 16 实验八、血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定. 18 第二章 分子生物学部分.25 实验一、质粒 DNA 的提取制备与检测. 25 实验二、PCR 技术. 28 实验三、DNA 的限制性酶切与电泳. 31 实验四、DNA 连接实验. 38 实验五、重组 DNA 转化与篮白斑筛选. 41 实验六、SDS-PAGE 测定蛋白质的相对分子量. 44

• 基因工程 ( genetic engineering)、基因 克隆、DNA重组、DNA克隆、分子克隆 • 克隆（clone） 无性繁殖 – 应用酶学的方法，在体外将目的基因与载体 DNA结合成一具有自我复制能力的DNA分 子（复制子、重组体），继而通过转化或转 染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子 细胞，再进行扩增、提取获得大量同一DNA 分子拷贝，或其表达产物

a淀粉酶食用酶的提取:发酵液350U/mL加入先溶好的Na2PO4,CaCl2各1-2%,调pH6.5加热至65℃,立即冷却至室温压滤

实验一、植物染色体DNA的提取及纯度鉴定 实验二、大肠杆菌质粒DNA的提取 实验三、琼脂糖凝胶电泳 实验四、DNA的限制性酶切 实验五、大肠杆菌感受态细胞的制备及外源DNA的转化 实验六、PCR基因扩增技术

实验一 利用 TSL 从全血中直接制备人类染色体 DNA 实验二 外周血基因组 DNA 的提取 实验三 基因突变分析(PCR-SSCP) 实验四 质粒 DNA 的提取 实验五 DNA 的限制性酶切和琼脂糖凝胶电泳 实验六 DNA 片段的回收与纯化 实验七 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化

实验一 植物基因组DNA的提取及其定性定量分析 实验二 PCR扩增目的片段和胶回收 实验三 目的片段和载体的连接 实验四 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化效率检测 实验五 重组质粒的转化 实验六 重组质粒DNA的提取及酶切鉴定

第一节酶的概念 第二节酶的命名与分类 第三节酶的组成与结构 第四节酶的作用机理 第五节影响酶促反应速度的因素 第六节构酶、同工酶、诱导酶 第七节酶的活力测定及分离提取