一、实验目的 1. 学习胰蛋白酶的纯化及其结晶的基本方法。 2. 学习用紫外法测定酶活性，搞清酶活性与比活性的概念

福州大学：《酶学及其应用》课程教学课件（PPT讲稿）第三章 酶的纯化 3.4

福州大学：《酶学及其应用》课程教学课件（PPT讲稿）第三章 酶的纯化 3.6

福州大学：《酶学及其应用》课程教学课件（PPT讲稿）第三章 酶的纯化 3.7

福州大学：《酶学及其应用》课程教学课件（PPT讲稿）第三章 酶的纯化 3.5

福州大学：《酶学及其应用》课程教学课件（PPT讲稿）第三章 酶的纯化 3.3

任务1 菌种保藏 任务2 菌种复壮 任务3 种子扩大培养 任务4 发酵罐的使用和维护 任务5 发酵控制、分离纯化及活性测定

本章学习内容分为三节：第一节： 酶通论；1、酶催化作用的特点；酶与催化剂的比较、酶作为生物催化剂的特点；2、酶的化学本质及其组成；3、酶的命名与分类。4、酶催化反应的专一性；5、酶活力的测定及酶的分离纯化。第二节：酶促反应动力学，1、化学动力学概念；2、底物对酶反应速率的影响；3、酶的抑制作用；4、温度、pH对酶反应的影响；5、激活剂对酶反应的影响。第三节：酶的作用机理，1、酶的活性部位；2、酶催化的高效性研究；3、酶活性的调节控制

第一章 蛋白质（酶）、核酸的分离纯化 第一节 引言 一、分离纯化的意义 二、分离纯化的要求 三、分离纯化的一般程序 第二节 蛋白质（酶）、核酸分离纯化的前处理 一、材料的选择与预处理 二、细胞的破碎 三、细胞器的分离 四、提取 第三节 分离纯化 一、 粗提纯 二、 精提纯 三、 纯度鉴定 第四节 生物大分子的浓缩、干燥及保存 第二章 离心技术 ▪ 离心技术概论 ▪ 一般制备离心 ▪ 超离心技术 第三章 层析技术 引言 层析法的基本原理 层析法的分类 第一节 吸附层析技术 第二节 分配层析技术 第三节 凝胶过滤层析技术 第四节 离子交换层析法 第五节 亲和层析法 第六节 高压液相层析（HPLC） 第四章 电泳技术 引言 第一节 电泳的基本原理 第二节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 第三节 琼脂糖凝胶电泳 第四节 免疫电泳 一、概述 二、聚丙烯酰胺凝胶的制备 三、凝胶浓度和交联度与孔径大小的关系 四、不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳

本课程共计32学时;共分为7章,授课时间是1-11周。讲 课內容包括:第一章绪论2学时;第二章酶的分类与命名2 学时,重点国际系统分类法;第三章酶的生产4学时重点 产酶菌的培养,酶的模拟;第四章酶的分离纯化与制备8学时 重点酶的纯化;第五章固定化酶6学时重点固定化酶的制 备;第六章酶分析6学时重点酶活力测定酶法分析;第七 章酶的生物学4学时重点酶在生物体内的功能