第一节. 概述 第三节. 基因工程工具酶 第四节. 基因工程载体 第五节. 目的基因的获得 第六节. 目的基因导入受体细胞 第七节. 重组体的筛选 第八节. 应用

附录 附录一中国科学院1999年攻读硕士 学位研究生(生物化学)试卷 A卷 一、是非题:20题,每题1分,共20分。答“是”写“”,答“非”写“-”,写在 题后的()中 1.单克隆和多克隆抗体的差别在于制备方式的不同() 2.气体分子,如NO,是可以作为信号分子在生物体内行使功能的() 3.二硫键和蛋白质的三级结构密切有关,因此没有二硫键的蛋白质就只有一级和二级结构() 4.所有信号肽的位置均在新生肽的N端()

基因诊断与基因治疗能够在比较短的时间从理论设想变为现实,主要是由于分子生物学 的理论及技术方法,特别是重组DNA技术的迅速发展,使人们可以在实验室构建各种载 体、克隆及分析目标基因。所以对疾病能够深入至分子水平的研究,并取得了重大的进 展。因此在20世纪70年代末诞生了基因诊断(gene diagnosis):随后于1990年美国实施了第 一个基因治疗(gene therapy)的临床试验方案。可见,基因诊断和基因治疗是现代分子生物学 的理论和技术与医学相结合的范例

第一节生物技术的基本概况 第二节转基因动物技术 第三节动物克隆技术 第四节胚胎生物工程技术 第五节分子生物技术与家畜育种

生命科学的核心问题： 生命是什么？ 终极问题,最后Boss 一个 DNA （Gene）---- Gain/lost of function 多个或一组 DNA （Genes/ genome）----系统，网络 合成生物？ 干细胞组织工程？克隆动物（人）？ 肿瘤，转基因动物（绿色荧光小鼠），遗传病 DNA is very important ! • DNA的碱基排列（ATGC）顺序（sequence） 储存着遗传信息，进而决定物种性状； • 人的核内DNA有3X10^9个碱基对，以23对染 色体形式存在。 Decoding the genome: classical methods and ideas Mapping open chromatin in cd28/ctl4/icos locus region during T cells activation

第一节 分子杂交与印迹技术 Molecular Hybridization & Blotting Technology 第二节 聚合酶链反应 Polymerase Chain Reaction 第三节 核酸序列分析 Nucleic Acid Sequence Analysis 第四节 基因文库 Gene Library 第五节 疾病相关基因的克隆与鉴定 Cloning and Identification of Disease Relative Genes 第六节 遗传修饰动物模型的建立及应用 The Establishment and Application of Heredity Modified Animal Model 第七节 生物芯片技术 Biological Chip Technology 第八节 蛋白质相互作用研究技术 Research Technology of Interaction of Protein

不同基因通过不同机制导致疾病发生 血红蛋白结构 基因结构和表达与疾病的研究策略 核糖核酸酶切分析 基因表达系列分析 (Serial Analysis of Gene Expression, SAGE) 抑制性差减杂交 (suppressive subtractive hybridization, SSH) 核酶技术确定基因在疾病中的作用 RNAi现象的发现 定位克隆 HGP与疾病相关基因的研究 双向凝胶电泳技术的应用

第三节 DNA重组技术过程 1、制备目的基因和相关载体 2、将目的基因和有关载体进行连接 3、将重组本DNA导入受体细胞 4、DNA重组体的筛选和鉴定 5、DNA重组体的扩增、表达和其他研究 第五节 利用重组DNA技术可对基因进行改造 第六节 克隆基因在适当宿主细胞内表达

第一节 杂交瘤技术的基本原理 一、杂交瘤技术 二、阳性杂交瘤细胞的克隆化培养与冻存 第二节 单克隆抗体的制备 一、单克隆抗体的产生 二、单克隆抗体的纯化 三、单克隆抗体的性质鉴定 四、单克隆抗体的特性 第三节 基因工程抗体制备 一、人源化抗体 二、小分子抗体 三、抗体融合蛋白 四、双特异性抗体 五、噬菌体抗体库技术 第四节 单克隆抗体的应用 一、检验医学诊断试剂 二、蛋白质的提纯 三、小分子抗体的应用 四、抗体融合蛋白的应用 五、双特异抗体的应用 六、抗体库技术的应用和前景

第一节 杂交瘤技术的基本原理 一、杂交瘤技术 二、阳性杂交瘤细胞的克隆化培养与冻存 第二节 单克隆抗体的制备 一、单克隆抗体的产生 二、单克隆抗体的纯化 三、单克隆抗体的性质鉴定 四、单克隆抗体的特性 第三节 基因工程抗体制备 一、人源化抗体 二、小分子抗体 三、抗体融合蛋白 四、双特异性抗体 五、噬菌体抗体库技术 第四节 单克隆抗体的应用 一、检验医学诊断试剂 二、蛋白质的提纯 三、小分子抗体的应用 四、抗体融合蛋白的应用 五、双特异抗体的应用 六、抗体库技术的应用和前景 思考题 小结