第一节 分子克隆载体的特点 第二节 分子克隆载体的种类

• 重组DNA（分子克隆） • 分子杂交

第一节制性核酸内切酶与DNA分子的体外切割 第二节DNA连接酶和DNA分子的体外连接 第三节其他工具

第一节质粒载体 第二节噬菌体载体 第三节真核细胞的克隆载体

载体必备条件: 1.是一个复制子; 2.载体在受体细胞中能大量繁殖,其携带的外源基因才能在受体细胞中得到大量扩增; 3.有1到几个限制内切酶的单一识别与切割位点,便于外源基因的插入; 4.具有选择性的遗传标记(如抗生素抗性标记等)以此知道它是否已进入受体细胞,并据此标记将受体细胞从其他细胞中分离出来

第一节 限制性内切核酸酶 第二节 DNA甲基化酶 第三节 核酸酶 第四节 DNA聚合酶 第五节 RNA聚合酶 第六节 连接酶 第七节 核酸末端修饰酶 第八节 其它酶类

Chapter 1: Plasmids and Their Usefulness in Molecular Cloning Chapter 2: Bacteriophage and Its Vectors Chapter 3: Working with Bacteriophage M13 Vectors Chapter 4: Working with High-Capacity Vectors Chapter 5: Gel Electrophoresis of DNA and Pulsed-Field Agarose

➢基因克隆(gene cloning) ➢基因表达(gene expression) -原核基因表达 -真核基因表达

• 基础知识 • 克隆载体及基因克隆 • cDNA文库/Genomic DNA文库 • 表达载体 • 重组DNA技术的应用

• 基因工程 ( genetic engineering)、基因 克隆、DNA重组、DNA克隆、分子克隆 • 克隆（clone） 无性繁殖 – 应用酶学的方法，在体外将目的基因与载体 DNA结合成一具有自我复制能力的DNA分 子（复制子、重组体），继而通过转化或转 染宿主细胞、筛选出含有目的基因的转化子 细胞，再进行扩增、提取获得大量同一DNA 分子拷贝，或其表达产物