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实验一 质粒的制备 实验二 DNA 的琼脂糖凝胶电泳 实验三 外源 DNA 片段在质粒载体中的克隆 实验四 感受态细胞的制备 实验五 质粒的转化及转化子的鉴定 实验六 PCR 技术 实验七 植物总 DNA 的快速少量抽提( CTAB 法) 实验八 总 DNA 质量检测及酶切 实验九 电泳、转膜 实验十 RNA Extraction (mini prep) 实验十一 RT-PCR 实验 附录 试剂配方 一 细菌培养试剂 二 质粒抽提试剂 三 DNA 操作试剂 四 RNA 操作试剂
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第一章 生物化学部分.1 实验一、双缩脲法测定血清蛋白质含量. 1 实验二、纸层析法观察转氨基作用. 2 实验三、血清醋酸纤维薄膜电泳. 4 实验四、血清丙氨酸氨基转移酶活性测定. 7 实验五、胰酶对蛋白质的消化和影响酶作用的因素. 10 实验六、酶的竞争性抑制作用. 13 实验七、血糖浓度的测定. 16 实验八、血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定. 18 第二章 分子生物学部分.25 实验一、质粒 DNA 的提取制备与检测. 25 实验二、PCR 技术. 28 实验三、DNA 的限制性酶切与电泳. 31 实验四、DNA 连接实验. 38 实验五、重组 DNA 转化与篮白斑筛选. 41 实验六、SDS-PAGE 测定蛋白质的相对分子量. 44
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毛细管简介 电泳作为一种分离工具已有近百年历史。1937年瑞 典科学家 Arne Tisel lus首次采用电泳分离技术从人 的血清中分离出白蛋白a—球蛋白、β—球蛋白的 Y—球蛋白。由此而获得1948年的诺贝尔奖。为了 克服电泳产生自热而使分离效率不高等问题,1967 年 Hjerten提出在强电场作用高,3mm直径的毛细管 内进行自由溶液的区带电泳(CZE),开始了毛细管电 泳仪的发展历程。直到1989年2月第一届国际毛细管 电泳学术研讨会召开,全球仪器供应商才推出第一 批商品化的高效毛细管电泳仪
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1、有丝分裂 2、减数分裂 3、果蝇性状观察与雌雄鉴别 4、果蝇一对相对性状的遗传分析 5、果蝇两对相对性状的遗传分析 6、果蝇的伴性遗传 7、果蝇唾腺染色体的制片与观察 8、核酸的琼脂糖凝胶电泳 9、PCR技术
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包括①凝胶电泳②细菌的转化和转染③核酸分子杂交④定点突变⑤PCR⑥RFLP⑦RAPD⑧DNA序列分析⑨目的基因的分离和转基因植物、转基因动物等技术
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实验一:果蝇性状观察与雌雄鉴别 实验二:果蝇一对相对性状的遗传分析 实验三:果蝇两对相对性状的遗传分析 实验四:伴性遗传试验 实验五:西藏特色鱼类染色体观察与分析 实验六:西藏特色畜禽染色体观察与分析 实验七:果蝇唾腺染色体标本制备和观察 实验八:核酸的琼脂糖凝胶电泳 实验九:PCR技术与分析
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现代分析技术进展作为专业课,以提高学生解决实问题的能力为目标,介绍了包括电 化学、光谱、核磁共振、质谱、色谱、免疫分析、电泳、显微镜分析技术等方法在内的各类 现代仪器分析技术的原理与应用,特别关注那些近期发展起来的联用技术,以及与分析过程 相关的样品制备等技术,使学生能充分了解现代分析技术的进展,把握相关科学发展的前沿, 为今后的科研和工作打下基础
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性质与任务 生物化学实验是生物化学教学的重要组成部分它和生物化学理论教学都具有同等重要的地位。生化实验技术广泛用于生命科学许多领域的研究。 通过实验课的教学,使学生掌握比色层析、电泳、离心等生物化学基本实验方法的原理和操作技能,学会选择正确的方法进行生物材料中多种物质的分离,提纯及鉴定
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1.鉴定。鉴定所培养的单菌落中是否含有重组质粒,或仅含有自身环化的质粒。如 前所述,前者电泳后会出现大小不等的两条DNA条带,一条为线性质粒载体的DNA,另 条为插入的目的基因;后者仅有一条载体的DNA条带。比如 DDPCR、 RACEPCR、细 胞库筛选、基因重组,等
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本书共包括十四章,70个实验内容,其中定量化学分析实验15个,仪器分析实验48个,综合分析实验7个。实验重点内容是滴定分析法、重量分析法、电位分析法、极谱分析与溶出伏安法、电解分析法、紫外-可见分光光度法、原子发射光谱法、原子吸收及原子荧光光谱法、红外吸收光谱法、荧光分析法、磷光分析法、化学发光分析法、气相色谱法、高效液相色谱法。此外,根据现代测试技术的发展适当增加了气相色谱-质谱、核磁共振光谱、流动注射分析、毛细管电泳等实验内容
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