动物遗传实验室09年开设的实验内容如 下 1、有丝分裂 2、减数分裂 3、果蝇性状观察与雌雄鉴别 4、果蝇对相对性状的遗传分析 5、果蝇两对相对性状的遗传分析 6、果蝇的伴性遗传 7、果蝇唾腺染色体的制片与观察 8、核酸的琼脂糖凝胶电泳 9、PCR技术
1、有丝分裂 2、减数分裂 3、果蝇性状观察与雌雄鉴别 4、果蝇一对相对性状的遗传分析 5、果蝇两对相对性状的遗传分析 6、果蝇的伴性遗传 7、果蝇唾腺染色体的制片与观察 8、核酸的琼脂糖凝胶电泳 9、PCR技术 动物遗传实验室09年开设的实验内容如 下:
有丝分裂 一一洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察 一、 实验目的和要求 本次实验通过对植物根尖的制片和观察,要求学生初步 会对植物组织、细胞的固定、离棕和底片方法 了解 的美过程賀染色体的哥态变花情况,拿握有 二 实验原理 有丝分裂是细胞均等增殖的过程,是体细胞分裂的丰 要方式在有丝分裂过程钟细晅丙每系染笔体都能复制 份然后分配到子细胞中,因此两个字细胞与母细胞所 拿的英色滋和能质夏拍的量轻 长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂
有丝分裂 --洋葱根尖有丝分裂染色体标本制备及观察; 一、实验目的和要求 本次实验通过对植物根尖的制片和观察, 要求学生初步 学会对植物组织、细胞的固定、离析和压片方法,了解 有丝分裂的全过程及其染色体的动态变化情况,掌握有 丝分裂各时期的特征。 二、实验原理 有丝分裂是细胞均等增殖的过程, 是体细胞分裂的主 要方式.在有丝分裂过程中.细胞内每条染色体都能复制 一份, 然后分配到子细胞中,因此两个子细胞与母细胞所 含的染色体在数目,形态和性质上均是相同的,在各种 生长旺盛的植物组织中均存在着有丝分裂
三、实验用品 洋葱改良苯酚品红1NHc(浓HCl82.5m→1000ml) 附:改良苯酚(石炭酸)品红染液 ((见:遗传学实验-第二版,刘祖洞,江绍慧编。P.209) 母液A:取3g碱性品红,溶解在100ml的70%洒精(可长期保存)。 母液B:取母液A10m,加入90ml的5%苯酚水溶液。 苯酚品红:取45ml的母液B,加入6ml冰醋酸和6m37%甲醛。 改良苯酚品红:取210ml苯酚品红染液,加入98-90ml的45% 礼势2暖清爱密南, 卡诺氏固定液(Carnoy'李s Fluid)】适用于一般植物组织和细胞的固定常 用宇根类花药压片及子房右蜡切片等,有极快的渗透力,根尖材料固 定1520min即可花药则需1h在右,此液道定最多不超过24h,▣ 差用95%酒精冲洗至不含冰醋酸为正如果材料不马上用,需转入 706酒精中保存. 配方无水酒精3份:冰醋酸1份
三、实验用品 洋葱 改良苯酚品红 1N Hcl (浓HCl82.5ml→1000ml) 附:改良苯酚(石炭酸)品红染液 (见:遗传学实验--第二版,刘祖洞,江绍慧编。P.209) 母液A:取3g碱性品红,溶解在100ml的70%洒精(可长期保存)。 母液B:取母液A10ml,加入90ml的5%苯酚水溶液。 苯酚品红:取45ml的母液B,加入6ml冰醋酸和6ml 37%甲醛。 改良苯酚品红:取2-10ml 苯酚品红染液,加入98-90ml 的45% 冰醋酸和1.8g山梨醇即可。改良苯酚品红配成后可立即使用,但 着色能力较差,一般在配制两周后染色能力显著增加。 卡诺氏固定液(Carnoy's Fluid) 适用于一般植物组织和细胞的固定,常 用于根尖,花药压片及子房石蜡切片等.有极快的渗透力,根尖材料固 定15—20min即可,花药则需1h左右,此液固定最多不超过24h,固 定后用95%酒精冲洗至不含冰醋酸为止;如果材料不马上用,需转入 70%酒精中保存. 配方:无水酒精3份:冰醋酸1份
四、实验方法 1、取材:大蒜、洋葱根尖,恒温箱 2、预处理:药物处理(秋水仙素)或冷冻处理(冰箱) 3、固定:卡诺氏固定液 4、解离:恒温水浴锅,1N盐酸如或05%的果胶酶和 纤维素酶 5、染色及压片:染色液(改良苯酚品红或醋酸洋红), 载玻片、盖玻片 6、染色体观察:显微镜 7、永久封片(示范):二甲苯、中性树胶
四、实验方法 1、取材:大蒜、洋葱根尖,恒温箱 2、预处理:药物处理(秋水仙素)或冷冻处理(冰箱) 3、固定:卡诺氏固定液 4、解离: 恒温水浴锅,1N盐酸或0·5%的果胶酶和 纤维素酶 5、染色及压片:染色液(改良苯酚品红或醋酸洋红), 载玻片、盖玻片 6、染色体观察:显微镜 7、永久封片(示范):二甲苯、中性树胶
五、注意事项 1)取材:取分生区,尽量要可小 (2)解离要软,水洗要彻底,否测不易着色: 3)压片前先敲,可使细胞分散开; (4)防业出气泡。 六、作业和思考 绘制有丝分裂各个时期的分裂相,并说明是有 丝分裂的哪一个时期
五、注意事项 (1)取材:取分生区,尽量要小; (2)解离要软,水洗要彻底,否则不易着色; (3)压片前先敲,可使细胞分散开; (4)防止出气泡。 六、作业和思考 绘制有丝分裂各个时期的分裂相,并说明是有 丝分裂的哪一个时期
实验二、减数分裂 大葱花粉母细胞涂片及观察 实验目的和要求 本次实验通过对植物花粉母细胞的制片,了解 小孢子形成过程及减数分裂中染色体的变化情况 并进步掌握植物细胞染色体的制片方法,掌握减 数分裂过程中各时期染色体的基本特征。 二、实验原理 减数分裂是配子形成过程中发生的一种特殊方 式的细胞分裂,在减数分裂过程中染色体只复制 次,而细胞却连续分裂两次,因此一个二倍体的性 母细胞便形成为四个单倍体的性细胞
实验二、减数分裂 -- 大葱花粉母细胞涂片及观察 一、实验目的和要求 本次实验通过对植物花粉母细胞的制片,了解 小孢子形成过程及减数分裂中染色体的变化情况, 并进一步掌握植物细胞染色体的制片方法,掌握减 数分裂过程中各时期染色体的基本特征。 二、实验原理 减数分裂是配子形成过程中发生的一种特殊方 式的细胞分裂,在减数分裂过程中染色体只复制一 次,而细胞却连续分裂两次,因此一个二倍体的性 母细胞便形成为四个单倍体的性细胞
三、实验用品 固定的大葱雄穗改良苯酚品红 四、实验方法 1、取材:大葱花蕾 2、固定:Carnoy固定液固定,70%的乙醇保存 3、取花药或取精巢 4、染绝及压片: 载玻片、盖玻片 色液(改良苯酚品红或醋酸洋红), 5、染色体观察:显微镜 6、封片:封蜡,Eupral树胶
三、实验用品 固定的大葱雄穗 改良苯酚品红 四、实验方法 1、取材:大葱花蕾, 2、固定:Carnoy固定液固定,70%的乙醇保存 3、取花药或取精巢 4、染色及压片:染色液(改良苯酚品红或醋酸洋红), 载玻片、盖玻片 5、染色体观察:显微镜 6、封片:封蜡,Eupral树胶
五、注意事项 取大中小三种不同的花进行制片,以保 证得到减数分裂各个时期的分裂相。 2. 花粉母细胞大而圆,壁薄,注意与花药 壁细胞区分。 六、作业和思考 1·绘制你所观察到的减数分裂过程的分裂相 2.比较花粉母细胞与花药壁细胞的不同
五、注意事项 1. 取大中小三种不同的花进行制片,以保 证得到减数分裂各个时期的分裂相。 2. 花粉母细胞大而圆,壁薄,注意与花药 壁细胞区分。 六、作业和思考 1.绘制你所观察到的减数分裂过程的分裂相。 2. 比较花粉母细胞与花药壁细胞的不同
实验三:果蝇性状观察与雌雄鉴别 1,果蝇的生活史 果蝇属于昆虫纲,双翅目,与家蝇是不同的种。黑腹果 蝇(Drosophila melanogaster)是最广泛用于遗传 学研究的昆虫,这种果蝇容易饲养,生命周期短,在 25℃条件下,从卵到成虫约10天;25℃时成虫约活15 天。在21°℃的新鲜培养基上两周就可产生新成虫。卵 和幼虫阶段为8天,蛹阶段为6天,果蝇成虫可以活上 几个星期。一只雌蝇在10天中可以产500多个卵。因为 果蝇很小,故饲养所古的空间也小,但对于迅速标出突 变特征来说,果蝇是足够大了。 目 果蝇的一生分四个明显的阶段:卵、幼虫、蛹和成虫 (图1、图2)
实验三:果蝇性状观察与雌雄鉴别 1.果蝇的生活史 果蝇属于昆虫纲,双翅目,与家蝇是不同的种。黑腹果 蝇(Drosophila melanogaster)是最广泛用于遗传 学研究的昆虫,这种果蝇容易饲养,生命周期短,在 25℃条件下,从卵到成虫约10天;25℃时成虫约活15 天。在21℃的新鲜培养基上两周就可产生新成虫。卵 和幼虫阶段为8天,蛹阶段为6天,果蝇成虫可以活上 几个星期。一只雌蝇在10天中可以产500多个卵。因为 果蝇很小,故饲养所占的空间也小,但对于迅速标出突 变特征来说,果蝇是足够大了。 果蝇的一生分四个明显的阶段:卵、幼虫、蛹和成虫 (图1、图2)
卵 幼虫 蛹 成虫 图1果蝇的一生
卵 幼虫 蛹 成虫 图1 果蝇的一生