第十二章高效毛细管电泳 High Performance Capillary Electrophoresis 而效毛仪
第十二章 高效毛细管电泳 High Performance Capillary Electrophoresis
123基本概念 电泳:一个“自由”的带电粒子在一定介质中在 电场作用下的迁移。 淌度,卩:表述物质电泳特性的参数,与粒子 电荷、质量、半径、介质等有关
12.3 基本概念 电泳：一个“自由”的带电粒子在一定介质中在 电场作用下的迁移。 淌度 ， μep ：表述物质电泳特性的参数，与粒子 电荷、质量、半径、介质等有关
电渗,μ eo 由于粘滞阻力的存在,离子的电泳会带动溶剂 同向运动。正负离子当量数相同时,溶剂受到 大小相等方向相反的作用力,因此通常观测不 到溶剂的运动。若设法使某种离子不运动,则 作用于溶剂的力便失去了平衡,溶剂发生单向 流动,这种流动称电渗
电渗，μeo： 由于粘滞阻力的存在，离子的电泳会带动溶剂 同向运动。正负离子当量数相同时，溶剂受到 大小相等方向相反的作用力，因此通常观测不 到溶剂的运动。若设法使某种离子不运动，则 作用于溶剂的力便失去了平衡，溶剂发生单向 流动，这种流动称电渗
在不考虑相互作用的前提下,粒子在毛细管介 质中的运动速度是泳流速度和渗流速度的矢量和。 般情况下,电渗流速度是电泳流速度的5-7倍, 混合物中所有的组份随电渗流朝一个方向迁移。 V=Veo+Vep=u eo +uep)e 式中E:场强 ua电渗淌度 μ电泳淌度
在不考虑相互作用的前提下，粒子在毛细管介 质中的运动速度是泳流速度和渗流速度的矢量和。 一般情况下，电渗流速度是电泳流速度的5-7倍， 混合物中所有的组份随电渗流朝一个方向迁移。 式中 E：场强 μeo电渗淌度 μep电泳淌度 V Veo Vep (μ eo μ ep)E = + = +
122原理 电渗流方向:高电位→低电位 正溶质离子所受的力:电场力+电渗力 负溶质离子所受的力:电场力一电渗力 中性分子所受的力:电渗力 溶质迁移方向由电场力和电渗力的矢量和决定, 般来说,溶质迁移方向与电渗流同。 流出顺序:①正离子②中性粒子③负离子
12.2 原理 •电渗流方向：高电位 低电位 •正溶质离子所受的力：电场力 + 电渗力 •负溶质离子所受的力：电场力 − 电渗力 •中性分子所受的力：电渗力 •溶质迁移方向由电场力和电渗力的矢量和决定， 一般来说，溶质迁移方向与电渗流同。 流出顺序：①正离子 ②中性粒子 ③负离子
柱效:N=5.54(t/W12)2t、W12取同一单位 华通常采用石英毛细管柱,一般情况下,表面带负电荷。当 其与溶液接触时,在溶液中产生了一种过剩的正电荷与上 述的负电荷平衡。在电场作用下,这层正电荷向负极移动, 带动溶剂裹着溶质分子一起移动 ④ ④⌒电渗流 高压e Q 地
高压 (+) Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ 电渗流 (-) 地 柱效：N＝5.54（tR /W1/2) 2 tR、W1/2取同一单位 通常采用石英毛细管柱，一般情况下，表面带负电荷。当 其与溶液接触时，在溶液中产生了一种过剩的正电荷与上 述的负电荷平衡。在电场作用下，这层正电荷向负极移动， 带动溶剂裹着溶质分子一起移动。 Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ Θ
「12,3高傚毛绅管电游 裝置图 清洗 毛细管 记录 检测器 高压电源 电解液
12.3 高效毛细管电泳仪器 装置图 清洗 记录 检 测 器 高 压 电 源 毛细管 电解液
1231高压电源 0-30KV输出,恒压恒流,正负极性可调。Pt丝电极 1232进样系统 A、重力(高度差)进样 B、负压进样 C、电渗法进样 123.3分离系统 毛细管:ID.50μum-75um,长30-100cm
12.3.1 高压电源 0-30KV输出，恒压恒流，正负极性可调。Pt丝电极 12.3.2 进样系统 A、重力（高度差）进样 B、负压进样 C、电渗法进样 12.3.3 分离系统 毛细管：I.D. 50m-75m，长30-100cm
1234检测系统 商品仪器:UV-ⅥS,加石英聚焦镜;激光荧光 实验室:质谱,电分析 123.5清洗系统 般用负压法,NaOH洗液,减少吸附 清洗对重现性影响重大
12.3.4 检测系统 商品仪器：UV-VIS，加石英聚焦镜；激光荧光 实验室：质谱，电分析 12.3.5 清洗系统 一般用负压法，NaOH洗液，减少吸附 清洗对重现性影响重大
124分类 口常规区带电泳(CZE) 口胶束电动毛细管色谱(MECC 口毛细管离子分析
12.4 分类 ❑ 常规区带电泳（CZE） ❑ 胶束电动毛细管色谱（MECC） ❑ 毛细管离子分析