《医学微生物学与免疫学实验指导》为适应我国高等医学教育改革和发展的需要，培养新世纪的实用型医学人才，提高学生的动手、合作能力，在院校有关部门的组织支持下，经过教研室全体教师的共同努力，编写了这本实用性医学微生物学和免疫学实验指导，为了使学生在有限的时间内熟练掌握基础理论知识和基本技能。希望能借此提高学生的实验课质量，为今后的临床工作打下扎实的基础。 实验一 细菌基本形态的观察 实验二 细菌特殊结构的染色和观察 实验三 细菌培养 实验四 细菌的分布与无菌操作技术 实验五 消毒灭菌 实验六 抗链球菌溶血素“O”试验 实验七 厌氧性细菌 实验八 分枝杆菌属 实验九 螺旋体 实验十 其他细菌 实验十一 病原性真菌的检测 实验十二 病毒的分离培养 实验十三 病毒血凝试验 综合设计性实验 实验十四 细菌的生化反应 实验十五 病原性球菌感染检查与鉴定 实验十六 肠道杆菌的检测 免疫学部分 实验室规则 实验一 凝集反应 实验二 沉淀反应 实验三 细胞分离技术及 E 花环形成试验 实验四 变态反应试验 实验五 免疫标记技术 实验六 吞噬功能的检测 实验七 白细胞介素-2（IL-2）生物学活性测定

第一节、实验室规则及安全防护 一、实验室规则 二、实验室安全防护 第二节、分子生物学常用研究技术 一、核酸分离纯化 二、聚合酶链反应技术 三、分子杂交技术 四、分子克隆技术 五、其它新技术 第三节、常用仪器使用 一、离心机 二、分光光度计 三、PCR 仪 第四节、如何撰写实验报告 第五节 核酸分离纯化技术 实验一、基因组 DNA 的提取制备与检测 实验二、总 RNA 的提取制备与检测 实验三、质粒 DNA 的提取制备与检测 第六节 PCR 技术 实验四、常规 PCR 技术 实验五、定量 PCR 技术 第七节 分子克隆技术 实验六、DNA 的限制性酶切与电泳 实验七、凝胶中 DNA 片断的纯化回收 实验八、DNA 连接实验 实验九、感受态细胞的制备 实验十、重组 DNA 转化与篮白斑筛选 第八节 分子杂交技术 实验十一、Southern 印迹杂交 实验十二、Northern 印迹杂交 实验十三、Western 印迹 实验十四、核酸原位杂交 第九节 综合性实验 实验十五、蛋白质双向电泳 实验十六、酵母双杂交实验 实验十七、RNA 干扰实验

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实验一 常用培养基的制备、灭菌与消毒.5 实验二 普通光学显微镜的使用.12 实验三 革兰氏染色法.18 实验四 显微镜直接计数法.21 实验五 微生物接种技术.24 实验六 细菌简单染色法.30 实验七 酸乳中乳酸菌的测定.33 实验八 水中细菌总数的测定.36 实验九 细菌总 DNA 的提取.39 实验十 微生物菌种保藏方法.41 实验十一 微生物遗传实验-抗药性突变株的分离.46 实验十二 大肠杆菌生长曲线的测定.48 实验十三 霉菌的形态观察.50 实验十四 酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴定.52 实验十五 新型污水处理絮凝剂——生物絮凝剂的制备.54 实验十六 乳酸菌的分离纯化和酸奶的制作.58 实验十七 金霉素发酵.62

实验一 植物基因组DNA的提取及其定性定量分析. 1 实验二 PCR扩增目的片段和胶回收. 8 实验三 目的片段和载体的连接. 15 实验四 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化效率检测. 18 实验五 重组质粒的转化. 20 实验六 重组质粒DNA的提取及酶切鉴定. 23 实验七 RNA的提取（TRIzol法）. 30 实验八 mRNA的分离与纯化. 36 实验九 RT-PCR技术. 38 实验十 用mRNA差异显示法分离特异表达的基因片段 . 40 实验十一 cDNA文库的构建. 46 实验十二 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） . 51 实验十三 Southern印迹杂交法（Southern blot）. 56 实验十四 RNA分子杂交（Northern blot）. 62 实验十五 固定化蛋白质的免疫生化鉴定（Western blot）. 67 实验十六 RFLP技术. 71 实验十七 RAPD技术. 74 实验十八 细胞分裂中期染色体的荧光原位杂交技术(FISH). 76 附录一 常用缓冲液及其配制. 80 附录二 常用抗生素溶液. 85 附录三 常用贮存液的配制. 85 附录四 常用核酸蛋白换算数据. 93 附录五 染料在凝胶中的迁移速度. 94 附录六 实验中的一些好习惯. 95

第一节酶的催化性质 一、酶是生物催化剂 二、酶的化学本质 第二节酶的命名与分类 一、分类 二、系统命名及编号 三、其它命名分类法 第三节酶的作用机制 一、活化能与酶的催化作用 二、中间产物学说 三、酶的活性中心 四、诱导契合学说 五、催化机理 六、酶原和酶原激活 第四节影响酶反应速度的因素 一、底物浓度的影响 二、酶浓度对酶反应速度的影响 三、温度对酶促反应速度的影响 四、pH对酶促反应速度影响 五、抑制剂与激活剂 第五节酶的分离提纯及活力测定 一、酶的分离提纯 二、活力测定 第六节多酶体系与调节酶 一、多酶体系及其自我调节 二、调节酶

《环境水文学》 《海洋科学导论》 《海洋环境监测与评价》 《海洋化学》 《海洋环境保护》 《海洋环境监测与评价》实习（实践） 《海洋学导论》 《地学基础》(理论课) 《海岸工程》 《大地景观—文化、感知和生命》 《富营养化水体的环保策略》 《揭秘绿潮浒苔》 《生态伦理学》 《环境与海洋》 《河口与人类活动》（理论） 《极地探险与科考》 《现代海洋生态安全导论》 《国际船舶压载水管理》 《大国海洋（二）》 《海洋生态学（双语）》 《城市生态学》 《景观生态学》 《恢复生态学》 《环境生态学》 《景观生态工程》 《植物与植物生理学实验》 《植物与植物生理学》 《动物生物学》 《动物生物学》实验 《生物分离技术》 《水环境化学》 《水环境化学（1）》 《水环境化学实验》 《分子生物学基础》 《分子生物学基础实验》 《普通生物学》 《风景园林概论》 《水生生物学实验》实验 《资源与环境概论》(理论课) 《海洋生态系统动力学》 《海洋生态环境监测与保护》 《GIS 与遥感概论》 《龟鳖文化与龟鳖鉴赏》 《给水处理》 《排水工程》 《给排水工程设计》实践 《水处理工艺设计》 《水处理原理与技术》 《环境毒理学》 《环境化学》 《环境科学概论》 《环境生物学》 《环境激素与人类未来》 《环境化学（双语）》 《环境化学实验》实验 《环境评价》 《环境土壤学》 《湿地生态学》 《入侵生态学》 《生态毒理学》(理论课) 《环境科学专业》毕业设计（论文） 《环境工程专业》毕业设计（论文） 《地下水污染与防治》 《分子生态学》 《海岸带生态环境观测实习》（实践） 《海滨系统生态学》 《海洋化学》实验 《海洋环境分析技术》 《海洋环境分析技术实验》实验 《海洋生态工程》 《海洋生物与海洋生态》实习（实践） 《环境毒理学实验》 《环境工程 CAD》 《环境工程生产实习》实习（实践） 《环境工程实验》 《环境工程微生物学》 《环境工程微生物学实验》 《环境工程学实习》实习（实践） 《环境工程专业认识实习》实习（实践） 《环境监测》 《环境监测实验》 《环境监测与评价实习》实习 《环境监测与评价》实习（实践） 《环境科学导论（全英语）》 《环境生态学实习》实习 《环境生物地球化学》 《环境统计学》 《恢复生态与景观生态工程实习》 《近海生态修复工程》 《经典环境著作导读》 《绿色化学》 《气象学与

为了探讨极端嗜热菌在高铁、高酸和高温条件下生物脱硫的可行性,采用从腾冲热海酸性温泉分离出的一株新型极端嗜热硫杆菌开展了四组不同初始pH值条件下的黄铁矿生物柱浸实验.该菌株能耐受pH值为0.58、全铁质量浓度为38.9 g·L-1的高酸高铁环境,同时维持580~640 mV的较低电位.初始pH值为2时,浸出28 d后黄铁矿浸出率达到最高为17.8%.生物浸出时,菌株生长依次表现出较明显的迟缓期、对数期和稳定期,且降低初始pH值会延长其到达稳定期的时间.此外,70℃高温和全铁质量浓度为38.9 g·L-1的高铁体系能促进生成黄钾铁矾和少量单质硫沉淀,而菌株能在pH值小于0.9时将大部分S0氧化为SO42-

从生物接触氧化池的生物膜中筛选分离出10株在高盐条件下对蒽醌染料中间体溴氨酸有降解脱色作用的菌株.通过对10株菌株的逐级驯化复筛,得到一株脱色效果好且脱色能力稳定的菌株C-7,经鉴定为弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundil).菌株C-7的耐盐性试验结果表明,盐的质量分数为1%～3%时,对菌株的生长和脱色没有影响,脱色率为80%以上;盐的质量分数为7%时,菌株C-7也具有较高的耐受力,脱色率可达到50%以上;盐的质量分数为10%时,对菌株的生长产生抑制作用,不能降解溴氨酸.菌株最适生长条件为:蛋白胨7g·L-1,pH7.0,摇床转速160r·min-1,250mL摇瓶中装液量120mL,接种量10%,在此条件下,在盐的质量分数为1%、蛋白胨为唯一氮源的培养基中,溴氨酸(100mg·mL-1)的脱色率可达85%以上

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