中国科学院 一九九六年攻读硕士学位研究生人学试题 《细胞生物学》B卷 一、是非题(每题1分,共20分,不答不得分,答错倒扣0.5分) 1.原代培养物经首次传代后即成细胞株(是,否) 2.癌组织中细胞间隙连接的数目显减少,细胞间通讯发生障碍…(是,否) 3.类病毒仅由裸的DNA所构成,不能制造衣壳蛋白(是,否)

概述 定义 一种或多种糖以共价键连接到肽链上的蛋白质。 特点 蛋白质含量较多,糖所占比例变动大,表现为蛋白质的特性。 分布 细胞膜、溶酶体、细胞外液

第三章细胞破碎方法 一、细胞壁的组成和结构 细菌类 组成一肽聚糖(多糖、氨基酸)、脂类 肽聚糖是细菌细胞壁的主要成份,它是由n-乙酰胞壁酸(nam)、n-乙 酰葡萄糖胺(NAG)和肽“尾”(一般是4个氨基酸)组成,NAM与NAG通过B-1.4 糖苷键相连,肽“尾”则是通过D-乳酰羧基连在NAM的第位碳原子上,肽 尾之间通过肽“桥”肽键或少数几个氨基酸)连接,NAM、NAG、肽“尾”与 肽“桥”共同组成了肽聚糖的多层网状结构

考试科目:细胞生物学(99) 一.填空(20分) 1.指出构成质膜最常见的脂类 和 等5种,其中常分布在双脂层面,使其带负电 2.近年来把动物的细应连接归成3类,它们是 和 其中还起交流胞信息的作用肌钙蛋白由

考试科目:细胞生物学(99) 一.填空(20分) 请指出构成质膜最常见的脂类 和 等5种,其中 常分布在双脂层面,使其带负电 2.近年来把动物的细应连接归成3类,它们是 和 其中 还起交流胞信息的作用 肌钙蛋白由 等3种亚单位组成,它们

实验一 植物基因组DNA的提取及其定性定量分析. 1 实验二 PCR扩增目的片段和胶回收. 8 实验三 目的片段和载体的连接. 15 实验四 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化效率检测. 18 实验五 重组质粒的转化. 20 实验六 重组质粒DNA的提取及酶切鉴定. 23 实验七 RNA的提取（TRIzol法）. 30 实验八 mRNA的分离与纯化. 36 实验九 RT-PCR技术. 38 实验十 用mRNA差异显示法分离特异表达的基因片段 . 40 实验十一 cDNA文库的构建. 46 实验十二 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE） . 51 实验十三 Southern印迹杂交法（Southern blot）. 56 实验十四 RNA分子杂交（Northern blot）. 62 实验十五 固定化蛋白质的免疫生化鉴定（Western blot）. 67 实验十六 RFLP技术. 71 实验十七 RAPD技术. 74 实验十八 细胞分裂中期染色体的荧光原位杂交技术(FISH). 76 附录一 常用缓冲液及其配制. 80 附录二 常用抗生素溶液. 85 附录三 常用贮存液的配制. 85 附录四 常用核酸蛋白换算数据. 93 附录五 染料在凝胶中的迁移速度. 94 附录六 实验中的一些好习惯. 95

第一节、实验室规则及安全防护 一、实验室规则 二、实验室安全防护 第二节、分子生物学常用研究技术 一、核酸分离纯化 二、聚合酶链反应技术 三、分子杂交技术 四、分子克隆技术 五、其它新技术 第三节、常用仪器使用 一、离心机 二、分光光度计 三、PCR 仪 第四节、如何撰写实验报告 第五节 核酸分离纯化技术 实验一、基因组 DNA 的提取制备与检测 实验二、总 RNA 的提取制备与检测 实验三、质粒 DNA 的提取制备与检测 第六节 PCR 技术 实验四、常规 PCR 技术 实验五、定量 PCR 技术 第七节 分子克隆技术 实验六、DNA 的限制性酶切与电泳 实验七、凝胶中 DNA 片断的纯化回收 实验八、DNA 连接实验 实验九、感受态细胞的制备 实验十、重组 DNA 转化与篮白斑筛选 第八节 分子杂交技术 实验十一、Southern 印迹杂交 实验十二、Northern 印迹杂交 实验十三、Western 印迹 实验十四、核酸原位杂交 第九节 综合性实验 实验十五、蛋白质双向电泳 实验十六、酵母双杂交实验 实验十七、RNA 干扰实验

实验一 细菌感受态的制备和质粒的转化 实验二 碱变性法提取质粒 DNA 实验三 水平式琼脂糖凝胶电泳法检测 DNA 实验四 DNA 的限制性内切酶酶切 实验五 DNA 的回收与连接 实验六 基因的 PCR 扩增 实验七 用温度敏感型启动子表达系统表达目的基因 实验八 基因组合生物合成新化合物 实验九 药用甘草片中甘草酸含量的分析及其质量评价 实验十 牛奶中酪蛋白和乳蛋白素粗品的制备 实验十一 固定化细胞法生产 L-天冬氨酸和 L-丙氨 实验十二 重组水蛭素Ⅲ的制备 实验十三 酸醇提取法制备猪胰岛素 实验十四 多肽缩宫素的 Fmoc 固相合成 实验十五 酵母 RNA 的制备和单核苷酸的离子交换柱层析分析 实验十六 单核苷酸衍生物制备 实验十七 胰弹性蛋白酶的制备及活力测定 实验十八 超氧化物歧化酶的分离纯化 实验十九 重组门冬酰胺酶Ⅱ的纯化与分析

实验一 细菌感受态的制备和质粒的转化. 2 实验二 碱变性法提取质粒 DNA . 6 实验三 水平式琼脂糖凝胶电泳法检测 DNA . 11 实验四 DNA 的限制性内切酶酶切 . 15 实验五 DNA 的回收与连接 . 18 实验六 基因的 PCR 扩增. 23 实验七 用温度敏感型启动子表达系统表达目的基因. 29 实验八 基因组合生物合成新化合物. 36 实验九 药用甘草片中甘草酸含量的分析及其质量评价. 47 实验十 牛奶中酪蛋白和乳蛋白素粗品的制备. 48 实验十一 固定化细胞法生产 L-天冬氨酸和 L-丙氨酸. 50 实验十二 重组水蛭素Ⅲ的制备. 57 实验十三 酸醇提取法制备猪胰岛素. 65 实验十四 多肽缩宫素的 Fmoc 固相合成法. 70 实验十五 酵母 RNA 的制备和单核苷酸的离子交换柱层析分析. 76 实验十六 单核苷酸衍生物制备. 82 实验十七 胰弹性蛋白酶的制备及活力测定. 85 实验十八 超氧化物歧化酶的分离纯化. 89 实验十九 重组门冬酰胺酶Ⅱ的纯化与分析. 97

结缔组织的一般特点： 1.细胞少，间质多，细胞分散，种类多 2.细胞无极性 3.有丰富的血管、淋巴管 4.来源于胚胎间充质（中胚层的细胞先形成间充质，然后分化为各种结缔组织、肌组织、血管等） 5.功能：连接、支持、营养、运输、保护 固有结缔组织 （胶体状基质） 结缔组织的分类：依据基质的物理性状 疏松结缔组织 致密结缔组织 脂肪组织 网状组织 血液、淋巴（液体状基质） 软骨与骨（固体状基质） 本章重点： 1.结缔组织的一般特点和分类 2.成纤维C、巨噬C、浆C、肥大C的结构特点、功能 3.胶原纤维和弹性纤维的形态特点、分子构成、特性 4.基质的分子构成和作用