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酶的分离纯化是酶工程的主要内容, 也是酶学研究过程中必不可少的环节。酶的分离纯化是指将酶从细胞或其他 含酶原料中提取出来,再与杂质分开 ,以获得符合研究或使用要求的酶的过程。其主要内容包括细胞破碎、酶的提取、离心分离、过滤与膜分离、 生沉淀分离、层析分离、电泳分离、萃命取分离、结晶等
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第一节 酶的概念 第二节 酶的命名与分类 一、酶的分类 二、酶的命名 第三节 酶的组成与结构 第四节 酶的催化作用机理 第五节 影响酶促反应速度的因素 第六节 别构酶 同工酶 诱导酶 抗体酶 核酶 第七节 酶活力测定与分离提纯 第八节 酶工程简介
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第十五章酶类药物 第一节酶类药物的原料来源 一、原料选择 (1)不同酶的用料选择 乙酰化酶(鸽肝)、凝血酶(牛血)、透明质酸酶(羊睾丸) 二、溶菌酶(鸡蛋清),超氧化物歧化酶(血、肝) (2)注意不同生长发育情况及营养状况 (3)原料来源丰富 (4)从简化提纯步骤着手 (5)如用动物组织作原料,应在此动物宰杀后立即取材
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1、 酶的概念、分类,酶促反应特点。 2、 酶分子结构与功能,作用机制。 3、 酶促动力学。 4、 酶的分离、提纯及活性测定。 5、 重要的酶类。 6、 维生素与辅酶
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第一节酶的催化性质 一、酶是生物催化剂 二、酶的化学本质 第二节酶的命名与分类 一、分类 二、系统命名及编号 三、其它命名分类法 第三节酶的作用机制 一、活化能与酶的催化作用 二、中间产物学说 三、酶的活性中心 四、诱导契合学说 五、催化机理 六、酶原和酶原激活 第四节影响酶反应速度的因素 一、底物浓度的影响 二、酶浓度对酶反应速度的影响 三、温度对酶促反应速度的影响 四、pH对酶促反应速度影响 五、抑制剂与激活剂 第五节酶的分离提纯及活力测定 一、酶的分离提纯 二、活力测定 第六节多酶体系与调节酶 一、多酶体系及其自我调节 二、调节酶
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第一章 蛋白质(酶)、核酸的分离纯化 第一节 引言 一、分离纯化的意义 二、分离纯化的要求 三、分离纯化的一般程序 第二节 蛋白质(酶)、核酸分离纯化的前处理 一、材料的选择与预处理 二、细胞的破碎 三、细胞器的分离 四、提取 第三节 分离纯化 一、 粗提纯 二、 精提纯 三、 纯度鉴定 第四节 生物大分子的浓缩、干燥及保存 第二章 离心技术 ▪ 离心技术概论 ▪ 一般制备离心 ▪ 超离心技术 第三章 层析技术 引言 层析法的基本原理 层析法的分类 第一节 吸附层析技术 第二节 分配层析技术 第三节 凝胶过滤层析技术 第四节 离子交换层析法 第五节 亲和层析法 第六节 高压液相层析(HPLC) 第四章 电泳技术 引言 第一节 电泳的基本原理 第二节 聚丙烯酰胺凝胶电泳 第三节 琼脂糖凝胶电泳 第四节 免疫电泳 一、概述 二、聚丙烯酰胺凝胶的制备 三、凝胶浓度和交联度与孔径大小的关系 四、不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳
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生物体内不断进行着各种化学变化。绿色植物和某些细菌能以十分简单的物质(如 水、CO2和无机盐)为原料合成各种复杂物质,并把太阳能转化为化学能贮存于有机物质 中;而其他生物又能分解这些复杂物质,从中获取能量。例如,动物以植物体中的淀粉等 复杂物质为食物,将淀粉降解成单糖,并在细胞内进一步分解为CO2和水,同时释放能 量供动物生长、发育、运动等各种生命活动需要。 第一节 酶的命名与分类 第二节 酶的催化性质 第三节 影响酶促反应速度的因素 第四节 酶的作用机制 第五节 别构酶、同工酶、诱导酶、抗体酶 第六节 酶的分离提纯与活力测定 第七节 维生素与辅酶
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实验室一些常用知识介绍 3 实验一:离子交换法分离氨基酸 7 实验二:垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质 9 实验三:马铃薯多酚氧化酶制备及性质实验13 实验四:碱性蛋白酶活力的测定 16 实验五: 植物组织中 DNA 和 RNA 的提取和鉴定 19 实验六:糖酵解中间产物的鉴定22 实验七:综合设计实验—蛋白质的制备及其含量测定24 实验八:还原糖和总糖的测定(3,5-二硝基水杨酸法) 35 实验九:发酵过程中无机磷的利用37 实验十:氨基酸的分离鉴定—纸层析法39 实验十一:细菌血栓溶解酶活性测定41 实验十二:可溶性糖的硅胶 G 薄层层析43 实验十三:植物材料中总黄酮的提纯与鉴定44 实验十四 : IEF/SDS-PAGE双向电泳分离鉴定蛋白质
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