第一节 PCR工作原理和方式 第二节 PCR产物的克隆方法 第三节 扩增未知DNA的PCR 第四节 与反转录相关的PCR 第五节 PCR产生DNA指纹 第六节 实时定量PCR

第一节、实验室规则及安全防护 一、实验室规则 二、实验室安全防护 第二节、分子生物学常用研究技术 一、核酸分离纯化 二、聚合酶链反应技术 三、分子杂交技术 四、分子克隆技术 五、其它新技术 第三节、常用仪器使用 一、离心机 二、分光光度计 三、PCR 仪 第四节、如何撰写实验报告 第五节 核酸分离纯化技术 实验一、基因组 DNA 的提取制备与检测 实验二、总 RNA 的提取制备与检测 实验三、质粒 DNA 的提取制备与检测 第六节 PCR 技术 实验四、常规 PCR 技术 实验五、定量 PCR 技术 第七节 分子克隆技术 实验六、DNA 的限制性酶切与电泳 实验七、凝胶中 DNA 片断的纯化回收 实验八、DNA 连接实验 实验九、感受态细胞的制备 实验十、重组 DNA 转化与篮白斑筛选 第八节 分子杂交技术 实验十一、Southern 印迹杂交 实验十二、Northern 印迹杂交 实验十三、Western 印迹 实验十四、核酸原位杂交 第九节 综合性实验 实验十五、蛋白质双向电泳 实验十六、酵母双杂交实验 实验十七、RNA 干扰实验

1 Real Time PCR基础知识 2 Real Time PCR实验方法 3 Real Time PCR解析方法 2.3.1 FISH的发展历程和反应原理 2.3.3 FISH在环境微生物中的应用 2.3.2 FISH的基本步骤及注意事项 2.3.4 FISH常见技术问题与解决措施 2.3.5 FISH技术新进展

(1)PCR扩增目的基因红细胞生成因子nap基因部分片段； (2)掌握PCR扩增原理； (3)学习并熟悉PCR操作

实时荧光定量PCR的基本原理（掌握） 实时荧光定量PCR引物和探针的设计（熟悉） 实时荧光定量PCR反应体系和条件的优化（熟悉） 实时荧光定量PCR测定的数据分析（掌握） 临床基因扩增实验室的设置与人员资质要求（了解）

实验一 人类体细胞染色体标本制备与核型分析 Metaphase Chromosome Preparation and Analysis of Karyotype 实验二 X和Y染色质标本的制作与观察 X and Y Chromatin Preparation and Observation 实验三 姊妹染色单体交换实验 Sister Chromosome Exchange （SCE） 实验四 银染核仁形成区与近端着丝粒染色体随体联合 AgNO3 Staining NOR and Satellite Association of Acrocentric Chromosome 实验五 核酸提取 The Extraction of Nucleic Acid 实验六 DNA重组技术 Recombinant DNA 实验七 PCR－RFLP分析技术 Polymerase Chain Reaction –Restriction Fragment Length Polymorphism 实验八 PCR-SSCP Polymerase Chain Reaction-Single Strand Conformation Polymorphism 实验九 PCR-DGGE Polymerase Chain Reaction-Denaturing Gradient Gel Electrophoresis 实验十 PCR-DHPLC Polymerase Chain Reaction-Denatured High Performance Liquid Chromatography

掌握PCR反应的基本原理 掌握性别决定的分子机制 掌握用PCR扩增检测性别的方法 掌握用PCR扩增检测性别方法的应用

一、PCR的基本原理 PCR的基本原理 变性、复性、半保留复制 PCR三步曲

The principle of the polymerase chain reaction (PCR) was first reported in 1971 (Kleppe et al., 1971), but it was only after the dis￾covery of the thermostable Taq DNA polymerase (Saiki et al., 1988; Lawyer et al., 1989) that this technology became easy to use

复旦大学：《生物化学》课程教学资源（实验讲稿）综合实验二 人乙醛脱氢酶2（ALDH2）多态性分析——PCR-APLP以及PCR产物电泳鉴定及结果分析