实验八微生物的生理 生化反应 何伟2006一04
实验八 微生物的生理 生化反应 何伟 2006－04
一、实验目的 微生物代谢与其他生物代谢有着许多相似之处， 也有不同之处。微生物代谢重要持征之一，就是 代谢类型的多样性。即使同属化能异养菌中的不 同微生物，它们分解生物大分子的能力，分解利 用含碳化合物、含氮化合物的途径和产生代谢产 物也各不相同等等。 由于微生物代谢类型多样性，使得微生物在自然 界的物质循环中起着重要作用，同时也为人类开 发利用微生物资源提供更多的机会与途径。 此外，微生物代谢类型多样性具体表现在生化反 应的多样性，因此人们在微生物的分类鉴定工作 中，常利用其生化反应作为重要依据
一、实验目的 微生物代谢与其他生物代谢有着许多相似之处， 也有不同之处。微生物代谢重要持征之一，就是 代谢类型的多样性。即使同属化能异养菌中的不 同微生物，它们分解生物大分子的能力，分解利 用含碳化合物、含氮化合物的途径和产生代谢产 物也各不相同等等。 由于微生物代谢类型多样性，使得微生物在自然 界的物质循环中起着重要作用，同时也为人类开 发利用微生物资源提供更多的机会与途径。 此外，微生物代谢类型多样性具体表现在生化反 应的多样性，因此人们在微生物的分类鉴定工作 中，常利用其生化反应作为重要依据
二、 实验器材 ·培养基：油脂培养基、淀粉培养基、明 胶培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳 糖)、 ◆ 菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯 草杆菌、普通变形杆菌、绿脓杆菌、产 气肠杆菌
二、实验器材 培养基：油脂培养基、淀粉培养基、明 胶培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳 糖）、 菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯 草杆菌、普通变形杆菌、绿脓杆菌、产 气肠杆菌
三、实验原理和步骤 ·大分子水解实验 不同微生物分解利用生物大分子能力各有不 同。只有那些能够产生并分泌跑外酶的微生 物才能利用大分子有机物。 油脂水解、淀粉水解、 明胶液化 脂肪酶、 淀粉酶、蛋白酶
三、实验原理和步骤 大分子水解实验 不同微生物分解利用生物大分子能力各有不 同。只有那些能够产生并分泌跑外酶的微生 物才能利用大分子有机物。 油脂水解、淀粉水解、明胶液化 脂肪酶、 淀粉酶、 蛋白酶
SNNNTT 图71-1淀粉水解试验接种示意图 图7-1-2油脂水解试验接种示意图 1.枯草芽孢杆菌；2.试验菌 1.金黄色物萄球茵：2.试验茵 明胶穿刺接种液化后的 各种形状
·糖发酵实验 细菌在分解糖或醇（如葡萄糖、乳糖、蔗 糖、甘露醇、甘油)的能力有很大的差异 有些细菌发醇某种糖后产生各种有机酸 (如乳酸、醋酸、甲酸、琥珀酸)及各种 气体（如氢、甲烷、二氧化碳）。有的细 菌只产酸不产气。酸的产生可利用指示 剂来指示。在配制培养基时可预先加入 溴甲酚紫【pH5(黄)-pH7(紫)】。当细 菌发酵糖产酸时，可使培养基由紫色变 为黄色。气体的产生可由糖发酵管中倒 置的杜氏小管中有元气泡来证明
糖发酵实验 细菌在分解糖或醇(如葡萄糖、乳糖、蔗 糖、甘露醇、甘油)的能力有很大的差异。 有些细菌发醇某种糖后产生各种有机酸 (如乳酸、醋酸、甲酸、琥珀酸)及各种 气体(如氢、甲烷、二氧化碳)。有的细 菌只产酸不产气。酸的产生可利用指示 剂来指示。在配制培养基时可预先加入 溴甲酚紫【pH 5(黄)－pH7(紫)】。当细 菌发酵糖产酸时，可使培养基由紫色变 为黄色。气体的产生可由糖发酵管中倒 置的杜氏小管中有元气泡来证明
图7-2-1糖醇类发醇实验 1.培养前的情况 2.培养后小营中出现气体
◆IMViC反应： ·吲哚实验 ·甲基红实验 ·VP.实验 ·柠檬酸盐实验 ◆HS实验
IMViC反应： 吲哚实验 甲基红实验 V.P.实验 柠檬酸盐实验 H2S实验
实验名称 培养基 菌种 接种 现象 方式 油脂水解 油脂培养基 黄葡、枯 平板 水解出现红色斑点 大分 草 子水 淀粉水解 淀粉培养基 枯草、大肠 平板 加入碘液后出现透明水 解圈 验 明胶液化 明胶培养基 大肠、 枯草、 穿刺 沿穿刺接种的痕迹进行 绿脓 明胶的液化水解 糖发 葡萄糖发 葡萄糖发酵培养 大肠、变形 试管 颜色变化、有气泡积聚 酵实 酵 基 验 乳糖发酵 乳糖发酵培养基 大肠、变形 试管 同上 吲哚实验 蛋白胨水培养基 大肠、产气 试管 产生红色玫瑰吲哚 甲基红实 葡萄糖蛋白胨水 大肠、产气 试管 丙酮酸分解为小分子酸： IMV 验 培养基 使得培养基颜色变红 iC反 VP实验 葡萄糖蛋白胨水 大肠、产气 试管 丙酮酸不分解，氧化后 应 培养基 与-萘酚形成红色 柠檬酸盐 柠檬酸盐培养基 大肠、产气 斜面 可以利用柠檬酸盐， 实验 pH升高，颜色变蓝 H2S实验 H,S培养基 大肠、产气 穿刺 产生PS黑色沉淀
实验名称 培养基 菌种 接种 方式 现象 大分 子水 解实 验 油脂水解 油脂培养基 金黄葡、枯 草 平板 水解出现红色斑点 淀粉水解 淀粉培养基 枯草、大肠 平板 加入碘液后出现透明水 解圈 明胶液化 明胶培养基 大肠、枯草、 绿脓 穿刺 沿穿刺接种的痕迹进行 明胶的液化水解 糖发 酵实 验 葡萄糖发 酵 葡萄糖发酵培养 基 大肠、变形 试管 颜色变化、有气泡积聚 乳糖发酵 乳糖发酵培养基 大肠、变形 试管 同上 IMV iC反 应 吲哚实验 蛋白胨水培养基 大肠、产气 试管 产生红色玫瑰吲哚 甲基红实 验 葡萄糖蛋白胨水 培养基 大肠、产气 试管 丙酮酸分解为小分子酸， 使得培养基颜色变红 V.P实验 葡萄糖蛋白胨水 培养基 大肠、产气 试管 丙酮酸不分解，氧化后 与α-萘酚形成红色 柠檬酸盐 实验 柠檬酸盐培养基 大肠、产气 斜面 可以利用柠檬酸盐， pH升高，颜色变蓝 H2S实验 H2S培养基 大肠、产气 穿刺 产生PbS黑色沉淀