第一节基因诊断 基因诊断概念 利用现代分子生物学和分子遗传学 的技术方法,直接检测基因结构及其表 达水平是否异常,从而对疾病作出诊断 的方法
3 一. 基因诊断概念 : 利用现代分子生物学和分子遗传学 的技术方法,直接检测基因结构及其表 达水平是否异常,从而对疾病作出诊断 的方法。 第一节 基 因 诊 断
(一)核酸分子杂交技术 核酸分子杂交 是指单链核酸分子(DNA或RNA): 在特定条件下, 与另一条互补的特异核酸链形成稳定双链的过程。 主要依据: 碱基互补、变性和复性 碱基互补 DNA与DNA杂交:A=T、 G=C DNA与RNA杂交:A=U、 G=C; 变性: 在一定温度下,使核酸双链解开为两条单链; 复性: 随温度逐渐恢复,变性的两条单链重新形成互补双链
6 (一)核酸分子杂交技术 核酸分子杂交 是指单链核酸分子(DNA或RNA)在特定条件下, 与另一条互补的特异核酸链形成稳定双链的过程。 主要依据: 碱基互补、变性和复性 DNA与DNA杂交: A=T、 G≡C ; DNA与RNA杂交: A=U、 G≡C ; 变性: 在一定温度下,使核酸双链解开为两条单链; 复性: 随温度逐渐恢复,变性的两条单链重新形成互补双链 碱基互补
hybridization DNA:DNA SATGCCGAT 3TACGGC DNA:RNA 5ATGCGTA 杂 3UACGCAU RNA:RNA 5AUGCUACG 3UACGAUGC*
7 hybridization • DNA:DNA 5’ A T G C C G A T 3’ T A C G G C DNA:RNA 5’ A T G C G T A 3’ U A C G C A U RNA:RNA 5’ A U G C U A C G 3’ U A C G A U G C
利用核酸双链的碱基互补、变性和复性的原理 可以用已知碱基序列的单链核酸片段作为探针,与待 测样本中的单链核酸互补配对,以判断有无互补的同 源核酸序列的存在。 核酸探针 是指带有标记的某一特定DNA或RNA片断,能与 待测样本中单链核酸分子互补配对结合,进而检测同 源序列。 探针标记物 有放射性核素或非放射性核素(生物素、地高辛、 荧光素等)两大类
8 利用核酸双链的碱基互补、变性和复性的原理, 可以用已知碱基序列的单链核酸片段作为探针,与待 测样本中的单链核酸互补配对,以判断有无互补的同 源核酸序列的存在。 核酸探针 是指带有标记的某一特定DNA或RNA片断,能与 待测样本中单链核酸分子互补配对结合,进而检测同 源序列。 探针标记物 有放射性核素或非放射性核素(生物素、地高辛、 荧光素等)两大类