由于微生物细胞极其微小,研究其个体生长存在 着技术上的困难。 •同步生长的概念:一个细胞群体中各个细胞都在同 一时间进行分裂的状态,称为同步生长 (synchronous growth) ,进行同步分裂的细胞称为 同步细胞。 •同步细胞群体在任何一时刻都处在细胞周期的同一 相,彼此间形态、生化特征都很一致,因而是细胞学、 生理学和生物化学等研究的良好材料。 第二节 微生物的生长规律 一、微生物的个体生长和同步生长
由于微生物细胞极其微小,研究其个体生长存在 着技术上的困难。 •同步生长的概念:一个细胞群体中各个细胞都在同 一时间进行分裂的状态,称为同步生长 (synchronous growth) ,进行同步分裂的细胞称为 同步细胞。 •同步细胞群体在任何一时刻都处在细胞周期的同一 相,彼此间形态、生化特征都很一致,因而是细胞学、 生理学和生物化学等研究的良好材料。 第二节 微生物的生长规律 一、微生物的个体生长和同步生长
获得同步生 长的方法: 化学诱导 物理诱导 诱导法 过滤法 区带密度梯度离心法 膜洗脱法 筛选法 同步培养法 获得同步生长的方法主要有两类: 环境条件诱导法:变换温度、光线、培养基等。造成与正 常细胞周期不同的周期变化。 选择法:选择性过滤、梯度离心。物理方法,随机选择, 不影响细胞代谢
获得同步生 长的方法: 化学诱导 物理诱导 诱导法 过滤法 区带密度梯度离心法 膜洗脱法 筛选法 同步培养法 获得同步生长的方法主要有两类: 环境条件诱导法:变换温度、光线、培养基等。造成与正 常细胞周期不同的周期变化。 选择法:选择性过滤、梯度离心。物理方法,随机选择, 不影响细胞代谢
Helmstetter-Cummings (硝酸纤维素薄膜) 法 步骤:将非同步的细菌液体培养物通过微 孔滤膜,让细胞吸附于其上;然后将滤膜 反置,再以新鲜培养液滤过。这时,一些 未粘牢的细胞先被冲洗掉,接着脱落到培 养液中的都是那些新分裂形成的细胞,于 是就获得了同步生长
Helmstetter-Cummings (硝酸纤维素薄膜) 法 步骤:将非同步的细菌液体培养物通过微 孔滤膜,让细胞吸附于其上;然后将滤膜 反置,再以新鲜培养液滤过。这时,一些 未粘牢的细胞先被冲洗掉,接着脱落到培 养液中的都是那些新分裂形成的细胞,于 是就获得了同步生长
二、微生物的群体生长 1.无分支单细胞微生物的群体生长特征 ☆无分支单细胞微生物主要包括细菌和酵母菌, 其群体生长是以群体中细胞数量的增加来表示的, ☆ 由一个细胞分裂成为两个细胞的时间间隔称为世代,一 个世代所需的时间就是代时(Generation time, G ), 代时也就是群体细胞数目扩大一倍所需 时间,有时也 称为倍增时间。 ☆右图表示的是一个细胞经过若干代分裂 后的情况。右图可见,每经过一个代时, 细胞数目就增加一倍,呈指数增加,因而 被称为指数生长,这就是单细胞群体生长 的特征
二、微生物的群体生长 1.无分支单细胞微生物的群体生长特征 ☆无分支单细胞微生物主要包括细菌和酵母菌, 其群体生长是以群体中细胞数量的增加来表示的, ☆ 由一个细胞分裂成为两个细胞的时间间隔称为世代,一 个世代所需的时间就是代时(Generation time, G ), 代时也就是群体细胞数目扩大一倍所需 时间,有时也 称为倍增时间。 ☆右图表示的是一个细胞经过若干代分裂 后的情况。右图可见,每经过一个代时, 细胞数目就增加一倍,呈指数增加,因而 被称为指数生长,这就是单细胞群体生长 的特征
2.无分支单细胞微生物的群体生 长曲线 ☆以细菌为例介绍无分支单细胞微生物群体生长规 律,其结论也基本适用于酵母菌。 ☆生长曲线代表了细菌在新的环境中从开始生长、 分裂直至死亡的整个动态变化过程。 ☆每种细菌都有各自的典型生长曲线,但它们的生 长过程却有着共同的规律性。一般可以将生长曲 线划分为四个时期
2.无分支单细胞微生物的群体生 长曲线 ☆以细菌为例介绍无分支单细胞微生物群体生长规 律,其结论也基本适用于酵母菌。 ☆生长曲线代表了细菌在新的环境中从开始生长、 分裂直至死亡的整个动态变化过程。 ☆每种细菌都有各自的典型生长曲线,但它们的生 长过程却有着共同的规律性。一般可以将生长曲 线划分为四个时期
生长曲线的制作: 接种 适温培养 定时取样测 定生长量 将少量单细胞的纯培养,接种到一恒定容积的新鲜液 体培养基中,在适宜条件下培养,每隔一定时间取样, 测菌细胞数目。以培养时间为横坐标,以细菌增长数 目的对数为纵坐标,绘制所得的曲线。 生长曲线的制作
生长曲线的制作: 接种 适温培养 定时取样测 定生长量 将少量单细胞的纯培养,接种到一恒定容积的新鲜液 体培养基中,在适宜条件下培养,每隔一定时间取样, 测菌细胞数目。以培养时间为横坐标,以细菌增长数 目的对数为纵坐标,绘制所得的曲线。 生长曲线的制作
典型的生长曲线 (Growth curve ) 延滞期 对数期 稳定期 衰亡期
典型的生长曲线 (Growth curve ) 延滞期 对数期 稳定期 衰亡期
①延滞期(lag phase) 其它名称:停滞期、调整期、适应期 1.现象:活菌数没增加,曲线平行于横轴。 2.特点: ➢生长速率常数= 0 ➢细胞形态变大或增长 ➢细胞内RNA特别是rRNA含量增高,原生质嗜碱性增强 ➢合成代谢活跃(核糖体、酶类、ATP合成加快),易产生诱 导酶 ➢对外界不良条件敏感,(如氯化钠浓度、温度、抗生素等化 学药物) 3.原因:适应新的环境条件,合成新的酶,积累必要的中间产物
①延滞期(lag phase) 其它名称:停滞期、调整期、适应期 1.现象:活菌数没增加,曲线平行于横轴。 2.特点: ➢生长速率常数= 0 ➢细胞形态变大或增长 ➢细胞内RNA特别是rRNA含量增高,原生质嗜碱性增强 ➢合成代谢活跃(核糖体、酶类、ATP合成加快),易产生诱 导酶 ➢对外界不良条件敏感,(如氯化钠浓度、温度、抗生素等化 学药物) 3.原因:适应新的环境条件,合成新的酶,积累必要的中间产物
认识延迟期的特点及形成原因对实 践的 ◆在发酵工业上需设法尽量缩短延迟期; 指导意义: ◆在食品工业上,尽量在此期进行消毒或灭菌 ◆菌种:繁殖速度较快的菌种的延迟期一般较短; ◆接种物菌龄:用对数生长期的菌种延迟期较短; ◆接种量:一般来说,接种量增大可缩短甚至消除延 迟期(发酵工业上一般采用1/10的接种量); ◆培养基成分:◇在营养成分丰富的天然培养基上生 长的延滞期比在合成培养基上生长时短;◇接种后培 养基成分有较大变化时,会使延滞期加长,所以发 酵工业上尽量使发酵培养基的成分与种子培养基接 近。 ★影响延迟期长短的因素:
认识延迟期的特点及形成原因对实 践的 ◆在发酵工业上需设法尽量缩短延迟期; 指导意义: ◆在食品工业上,尽量在此期进行消毒或灭菌 ◆菌种:繁殖速度较快的菌种的延迟期一般较短; ◆接种物菌龄:用对数生长期的菌种延迟期较短; ◆接种量:一般来说,接种量增大可缩短甚至消除延 迟期(发酵工业上一般采用1/10的接种量); ◆培养基成分:◇在营养成分丰富的天然培养基上生 长的延滞期比在合成培养基上生长时短;◇接种后培 养基成分有较大变化时,会使延滞期加长,所以发 酵工业上尽量使发酵培养基的成分与种子培养基接 近。 ★影响延迟期长短的因素:
②对数期(logarithmic phase) 其他名称:指数期 现象:细胞数目以几何级数增加,其对数与时间呈直线关系。 特点: 生长速率常数最大,即代时最短 细胞进行平衡生长,菌体大小、形态、生理特征等比较一 致代谢最旺盛 细胞对理化因素较敏感
②对数期(logarithmic phase) 其他名称:指数期 现象:细胞数目以几何级数增加,其对数与时间呈直线关系。 特点: 生长速率常数最大,即代时最短 细胞进行平衡生长,菌体大小、形态、生理特征等比较一 致代谢最旺盛 细胞对理化因素较敏感