第一节一般同源重组 同源DNA序列之间的重组称为 般重组。重组的过程要经历 DNA断裂和重接的过程。 、重组的 Holliday模型
第一节 一般同源重组 同源DNA序列之间的重组称为 一般重组。重组的过程要经历 一个DNA断裂和重接的过程。 一、重组的Holliday模型
11-18 Recombinant 5 Endonuclease nicking Ligation b Strand displacement nick ↓ Ligation nick Heteroduplex DNA molecules Branch migration (e) Endonuclease nicking b Duplex separation (f)A 18o° rotation b Holliday structure(chi form)
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二、重组过程中的酶 般性重组中涉及到三个重组基因的作用 recA,recB,recC。另外还要单链结合蛋白SSB 的作用。 由recB,C基因编码的蛋白质复合体使 DNA双链的一条链打开缺口,并使螺旋部分松 开。SSB结合到单链区使之稳定,recA的蛋白也 能结合到单链上,引导双链形成,使原双链中 相应的单链被置换。交叉的移动由ATP水解来推 动。切口由连接酶封口
二、重组过程中的酶 一般性重组中涉及到三个重组基因的作用: recA,recB,recC。另外还要单链结合蛋白SSB 的作用。 由recB,C基因编码的蛋白质复合体使 DNA双链的一条链打开缺口,并使螺旋部分松 开。SSB结合到单链区使之稳定,recA的蛋白也 能结合到单链上,引导双链形成,使原双链中 相应的单链被置换。交叉的移动由ATP水解来推 动。切口由连接酶封口
Homologous DNA Cross strand exchange Ligate structure Strand nicked nicking on strand exchange a (b) 重组过程的步骤和酶:a)一对同源双链;(b)由recB,C 核酸酶在第一对DNA双链的一条链打开缺口,并使螺旋部 分松开。SSB结合到单链区使之稳定,recA的蛋白也能结合 到单链上,引导双链形成,使原双链中相应的单链被置换; (c)另一对DNA双链的一条链打开缺口并与第一对DNA双链 的一条链配对;(d)切口由连接酶封口;(e)开始180°旋转的 结构
Homologous DNA Strand nicking exchange Ligate nicked strands go on Cross strand exchange structure 重组过程的步骤和酶:(a) 一对同源双链;(b)由recB,C 核酸酶在第一对DNA双链的一条链打开缺口,并使螺旋部 分松开。SSB结合到单链区使之稳定,recA的蛋白也能结合 到单链上,引导双链形成,使原双链中相应的单链被置换; (c)另一对DNA双链的一条链打开缺口并与第一对DNA双链 的一条链配对;(d) 切口由连接酶封口;(e) 开始180o旋转的 结构 (a) (b) (c) (d) (e)
噬菌体的整合作用 λ噬菌体的整合和切割酶能专一性地识别 λDNA和Ecoi染色体上的特定位点,使λ与宿主 染色体之间发生重组 λ整合切割酶特异切割POP和BOB后,能 在O区产生一个粘性末端,在λ整合酶的作用和 宿主整合因子的参与下,DNA整合进EcO的 染色体中,为专一性重组
一、噬菌体的整合作用 λ噬菌体的整合和切割酶能专一性地识别 λDNA和E.coli染色体上的特定位点,使λ与宿主 染色体之间发生重组 λ整合切割酶特异切割POP’和BOB’后,能 在O区产生一个粘性末端,在λ整合酶的作用和 宿主整合因子的参与下,λDNA整合进E.coli的 染色体中, 为专一性重组
8al BOP 入 POB λ整合酶,宿主整合因子 整合和切割酶 …,8a1 b attB …E. coli dna BOB 入整合和切割酶 E.col重组位点 POP attP 入重组位点 入DNA lectin P packaging 入噬菌体 POP 的整合作用
BOP , POB , gal λ整合酶,宿主整合因子 整合和切割酶 λ BOB , gal bio POP , POP , λ Injection Packaging attB E.coli DNA attP E.coli 重组位点 λ重组位点 λDNA λ整合和切割酶 λ噬菌体 的整合作用