普通植物病理学实验指导 (植保专业用) 李国英 石河子农学院值病教研室 一九九四年三月 说 明 出于有利同学当前和今后学习的目的,有意多编了一些实验,但限于当前材料较少, 条件,时间不足等方面的原因,实验不可能全做,其顺序也可能有所调整,请予以注意 为了增加感性认识和有利掌握一般植病研究方法,实验分课堂实验和教学实习二部 分,已分别编出了“普病实验指导”和“植物病害的调查,诊断及标本的采集与制作”。 此二部分互相补充,各有侧重。 实验课应注意事项 实验室的操作是进行植物病理学工作基本训练的重要环节,能所有操作需按指定程序 进行,努力学习正确方法,并养成实事求是、认真细致的科学态度。 1、操作时必须遵守实验规则,服从指导教师的指导: 2、注意保持实验室之整洁,实验室必须保持肃静: 3、实验前必须先阅读实验指导,初步了解这次实验的内容与方法以保证实验的顺利 进行: 4、实验时需按指定方法观察和操作,绘图并写出实验报告: 5、所有绘图及报告应于指定日期交指导教师评阅,不许拖延,绘图要力求正确,不 允许草率从事: 6、实验材料必须爱护,不得浪费,剩余材料应交还原指定地点,离开实验室前,将 自己用的东西和实验台整理好,并把实验室打扫干净: 7、使用仪器须加以爱护,并按指定方法使用,遇有故障必须及时报告指导教师,损 坏物品,必须如实登记,按学校规定处理: 8、注意安全,凡易燃之物,使用时必须当心,如禁止用酒精灯相互接火等: 9、实验课应备物品: (1)2H或3H铅笔一支及铅笔刀(或沙纸一块,供磨笔用): (2)软橡皮一块: (3)尺一支: (4)报告纸
普通植物病理学实验指导 (植保专业用) 李国英 石河子农学院值病教研室 一九九四年三月 说 明 出于有利同学当前和今后学习的目的,有意多编了一些实验,但限于当前材料较少, 条件,时间不足等方面的原因,实验不可能全做,其顺序也可能有所调整,请予以注意。 为了增加感性认识和有利掌握一般植病研究方法,实验分课堂实验和教学实习二部 分,已分别编出了“普病实验指导”和“植物病害的调查,诊断及标本的采集与制作”。 此二部分互相补充,各有侧重。 实验课应注意事项 实验室的操作是进行植物病理学工作基本训练的重要环节,能所有操作需按指定程序 进行,努力学习正确方法,并养成实事求是、认真细致的科学态度。 1、操作时必须遵守实验规则,服从指导教师的指导; 2、注意保持实验室之整洁,实验室必须保持肃静; 3、实验前必须先阅读实验指导,初步了解这次实验的内容与方法以保证实验的顺利 进行; 4、实验时需按指定方法观察和操作,绘图并写出实验报告; 5、所有绘图及报告应于指定日期交指导教师评阅,不许拖延,绘图要力求正确,不 允许草率从事; 6、实验材料必须爱护,不得浪费,剩余材料应交还原指定地点,离开实验室前,将 自己用的东西和实验台整理好,并把实验室打扫干净; 7、使用仪器须加以爱护,并按指定方法使用,遇有故障必须及时报告指导教师,损 坏物品,必须如实登记,按学校规定处理; 8、注意安全,凡易燃之物,使用时必须当心,如禁止用酒精灯相互接火等; 9、实验课应备物品: (1)2H 或 3 H 铅笔一支及铅笔刀(或沙纸一块,供磨笔用); (2)软橡皮一块; (3)尺一支; (4)报告纸
目录 实验一 植病害的症状观察 实验 显微镜的构造,使用及临时玻片制作法 实验三 真菌的一般形态及子实体类型的观察 实验四、五 鞭毛菌亚门及接合菌亚门真菌的形态及其致病特点的观察 实验六、七 子囊菌亚门真菌及其致病特点观察 实验八、九 担子菌亚门真菌及其致病特点观察 实验十、十 半知菌亚门真菊及其致病特点观察 实验十二 植物菌病害的病状、诊断及接种方法实验 实验十三 植物病原细菌的格兰氏染色和鞭毛染色 实验十四 植物病毒的传播 实验十五 植物病毒内含体的观察 实验十六 植物病毒的生物测定 实验十七 植物病毒抗血清效价的测定 实验十八 植物寄生线虫及其所致病害症状的观察 实验十九寄生性种子植物及其所致病害的特点 实验二十 半永久性玻片的制作方法 实验二十一 培养基的制备及灭菌 实验二十二 植物病原物的显微测量和描绘 实验二十三 真菌孢子萌发试验 实验二十四病原体初侵染米源的检验(重点种子带菌检验)
目 录 实验一 植病害的症状观察 实验二 显微镜的构造,使用及临时玻片制作法 实验三 真菌的一般形态及子实体类型的观察 实验四、五 鞭毛菌亚门及接合菌亚门真菌的形态及其致病特点的观察 实验六、七 子囊菌亚门真菌及其致病特点观察 实验八、九 担子菌亚门真菌及其致病特点观察 实验十、十一 半知菌亚门真菌及其致病特点观察 实验十二 植物菌病害的病状、诊断及接种方法实验 实验十三 植物病原细菌的格兰氏染色和鞭毛染色 实验十四 植物病毒的传播 实验十五 植物病毒内含体的观察 实验十六 植物病毒的生物测定 实验十七 植物病毒抗血清效价的测定 实验十八 植物寄生线虫及其所致病害症状的观察 实验十九 寄生性种子植物及其所致病害的特点 实验二十 半永久性玻片的制作方法 实验二十一 培养基的制备及灭菌 实验二十二 植物病原物的显微测量和描绘 实验二十三 真菌孢子萌发试验 实验二十四 病原体初侵染来源的检验(重点种子带菌检验)
实验一植病害的症状观察 目的:初步了解病害的多种性及危害性,并认识各种不病害的症状类型, 以建立植物病害的概念,为植物病害的诊断打下基础。 材料:小麦杆黑粉病、小麦散黑粉病、小麦腥黑穗病、小麦白粉病、麦类 条纹花叶病、小麦线虫病、水稻干尖线虫病、棉花角斑病、苹果树腐烂病、桃 树穿孔病、小麦丛矮病、苹果缺铁病、白菜软腐病、瓜叶枯病、甜菜褐斑病、 向日葵霜霉病、油菜霜霉病、油菜白锈病、玉米矮花叶病。 植物病害的症状观察分析 病名 受害部位 症状类型简述病原物特征(病征) 作业:将观察的标本按要求填入上表
实验一 植病害的症状观察 目的:初步了解病害的多种性及危害性,并认识各种不病害的症状类型, 以建立植物病害的概念,为植物病害的诊断打下基础。 材料:小麦杆黑粉病、小麦散黑粉病、小麦腥黑穗病、小麦白粉病、麦类 条纹花叶病、小麦线虫病、水稻干尖线虫病、棉花角斑病、苹果树腐烂病、桃 树穿孔病、小麦丛矮病、苹果缺铁病、白菜软腐病、瓜叶枯病、甜菜褐斑病、 向日葵霜霉病、油菜霜霉病、油菜白锈病、玉米矮花叶病。 植物病害的症状观察分析 病名 受害部位 症状类型简述 病原物特征(病征) 作业:将观察的标本按要求填入上表
实验二显微镜的构造,使用及临时玻片制作法 显微镜是植病工作者常用工具之一,必须熟练掌握,临时玻片制作法是植 病工作者检查病原常用的方法。 目的,进一步熟悉和掌握显微镜各部分的构造和使用,并学会临时玻片制 作法的操作过程。 用具和材料,显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、挑针、纱布、蒸馏 水、甜菜白粉病菌闭囊壳及杨树腐烂病标本。 步骤和方法: 一、熟悉显微镜各部分的构造(参照图) 1、镜座:马蹄形之移座,以支持镜之全部。 2、镜柱:为镜座直立短柱,上支镜臂及载物台。 3、倾斜关节:为镜柱与镜臂连接关节,可倾斜锐臂于90度范围内,以便 检视。 4、镜臂:为取镜时手握之处,弯曲如臂。 5、载物台:或称镜台,为放载玻片平台,台中有一孔道,借以透光,台之 后沿常用二压夹,用以固定玻片。 6、集光器:附于载物台之下,集合由反光镜所来之光线射入镜筒,集光器 可上、下移动,以求适宜强度之光线。 7、彩虹光圈:装于集光器下,用以调节光之强弱 8、反光镜:在集光器下,镜有两面、一为平面镜,一为凹镜,可以上下翻 换,平面镜反射光线较散,反以光线进入少,凹面镜反射光线集中,进入光线 较多,宜在光线较弱时使用。 9、镜筒:为中空之长筒,位于旋转器的上方,连接于镜臂下端。 10、接物镜转换器:连接于镜筒下端,可以旋转,下装接物镜。 11、12、13、接物镜:为转换器上之镜头,一为低倍、一为高倍、一为油 镜,用时对准筒下方,此镜为重要部分,注意镜头决不可接触玻片。 14、接目镜:插入镜上端,其作用使接物镜放大之象再放大入目,接目镜 测微尺即置于其中
实验二 显微镜的构造,使用及临时玻片制作法 显微镜是植病工作者常用工具之一,必须熟练掌握,临时玻片制作法是植 病工作者检查病原常用的方法。 目的,进一步熟悉和掌握显微镜各部分的构造和使用,并学会临时玻片制 作法的操作过程。 用具和材料,显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、挑针、纱布、蒸馏 水、甜菜白粉病菌闭囊壳及杨树腐烂病标本。 步骤和方法: 一、熟悉显微镜各部分的构造(参照图) 1、镜座:马蹄形之移座,以支持镜之全部。 2、镜柱:为镜座直立短柱,上支镜臂及载物台。 3、倾斜关节:为镜柱与镜臂连接关节,可倾斜锐臂于 90 度范围内,以便 检视。 4、镜臂:为取镜时手握之处,弯曲如臂。 5、载物台:或称镜台,为放载玻片平台,台中有一孔道,借以透光,台之 后沿常用二压夹,用以固定玻片。 6、集光器:附于载物台之下,集合由反光镜所来之光线射入镜筒,集光器 可上、下移动,以求适宜强度之光线。 7、彩虹光圈:装于集光器下,用以调节光之强弱 8、反光镜:在集光器下,镜有两面、一为平面镜,一为凹镜,可以上下翻 换,平面镜反射光线较散,反以光线进入少,凹面镜反射光线集中,进入光线 较多,宜在光线较弱时使用。 9、镜筒:为中空之长筒,位于旋转器的上方,连接于镜臂下端。 10、接物镜转换器:连接于镜筒下端,可以旋转,下装接物镜。 11、12、13、接物镜:为转换器上之镜头,一为低倍、一为高倍、一为油 镜,用时对准筒下方,此镜为重要部分,注意镜头决不可接触玻片。 14、接目镜:插入镜上端,其作用使接物镜放大之象再放大入目,接目镜 测微尺即置于其中
15、粗动螺旋:装于镜臂二侧,状如轮盘,中有一轴,前后转动,镜臂则 上下移动。 16、微动螺旋:在粗动螺旋的下方或外侧,每转一圈,镜筒便移动0.1mm 顺时针方向旋转,镜筒下降,逆时针方向旋转,镜筒上升。 二、显微镜之使用 1、低倍接物镜检查法 (1)转动旋转器,使低倍镜位于中央 (2)转动反光镜,使视野明亮(镜中光线呈乳白色为止) (3)将检查之玻片置于接物台中央,转动粗螺旋到玻片上病原放大,物象 较清楚为止,注意镜头决不能与玻片接触 (4)稍转微动螺旋,使物象更清楚、明晰 (5)视野中光线过强或不足时,可上下调节集光器,放入或缩小集光器下 之彩虹光圈,以调节之。 2、高倍镜的检查法 在低倍镜检查的基础上,如需要详细观察局部特征时,可用高倍镜视之。 (1)将人低倍镜下欲进一步要看的部分,移动玻片或载物台,使之位于视 野中央 (2)转动旋转器,置高倍镜于中央 (3)眼看着转动螺旋,将接近玻片标本为止,检查视野,再向上旋转粗动 螺旋,使得物象清晰为准。 (4)若光线不足时,可调节集光器或略开大彩虹圈调节之,但有的显 微镜,只要将低倍转到高倍镜就可看到物象我们即这种方法一般需在证明 方可直接采用,不能 冒然行事,以防损坏镜头。 3、油镜检查法 为检查微小物体及细微结构之用 (1)先用低倍镜找到目的物,并移到正中,然后用高倍镜检查,使仍保持 在中央部位。 (2)升起镜筒,在玻片或盖片上下滴香柏油(柏木油)或马腊油一滴。 (3)将油镜转到观察部位,用粗调使物镜前端与油滴接触,至接近玻片标 本为止
15、粗动螺旋:装于镜臂二侧,状如轮盘,中有一轴,前后转动,镜臂则 上下移动。 16、微动螺旋:在粗动螺旋的下方或外侧,每转一圈,镜筒便移动 0.1mm, 顺时针方向旋转,镜筒下降,逆时针方向旋转,镜筒上升。 二、显微镜之使用 1、低倍接物镜检查法 (1)转动旋转器,使低倍镜位于中央 (2)转动反光镜,使视野明亮(镜中光线呈乳白色为止) (3)将检查之玻片置于接物台中央,转动粗螺旋到玻片上病原放大,物象 较清楚为止,注意镜头决不能与玻片接触 (4)稍转微动螺旋,使物象更清楚、明晰 (5)视野中光线过强或不足时,可上下调节集光器,放入或缩小集光器下 之彩虹光圈,以调节之。 2、高倍镜的检查法 在低倍镜检查的基础上,如需要详细观察局部特征时,可用高倍镜视之。 (1)将人低倍镜下欲进一步要看的部分,移动玻片或载物台,使之位于视 野中央 (2)转动旋转器,置高倍镜于中央 (3)眼看着转动螺旋,将接近玻片标本为止,检查视野,再向上旋转粗动 螺旋,使得物象清晰为准。 (4)若光线不足时,可调节集光器或略开大彩虹圈调节之,但有的显 微镜,只要将低倍转到高倍镜就可看到物象我们即这种方法一般需在证明 方可直接采用,不能 冒然行事,以防损坏镜头。 3、油镜检查法 为检查微小物体及细微结构之用 (1)先用低倍镜找到目的物,并移到正中,然后用高倍镜检查,使仍保持 在中央部位。 (2)升起镜筒,在玻片或盖片上下滴香柏油(柏木油)或马腊油一滴。 (3)将油镜转到观察部位,用粗调使物镜前端与油滴接触,至接近玻片标 本为止
(4)再用微动螺旋调节,使物名胜清晰为止。 (5)使用完毕后,将油镜转开,用擦镜纸沾二甲苯,拭去油迹,再用干擦 镜纸轻拭。 一般显微镜头至玻片距离(a)如下: 10×左右物镜的a=5.0-7.5毫米 40×左右镜的a=0.5毫米左右 100×物镜a=0.1毫米左右 三、显微镜的保护 1、取镜时,一手握镜臂,一手托镜座,轻轻放置,勿使受强力振动。 2、每次镜检之前都应将各部透镜,反光镜及铁部分等处尘土用毛笑、绒布 轻轻擦净,如有擦不去的污点,可用擦镜纸沾二甲苯拭擦。再用软绸或纱擦净 切勿用酒精、乙醚等擦,以防将表皮漆溶去,造成损伤。 3、接目镜,接物镜等处如单用擦镜纸擦不净时,可用擦镜纸沾二甲苯清洁 之,切不可用普通纸或其它物擦拭。 4、用微动螺旋调节时,不要常向一方转动,以免过度而损坏。 5、不常使用的镜子,可涂少量镜表油或亚麻子油,使用完毕后放入镜箱, 或加防尘罩于低温干燥的室内保存。 四、临时玻片制作法 植物病原的检查,是病工作者的经常工作,其尤以临时玻片法最常用,必 须反复练习,以期熟练。 1、材料的选取:根据材料的特点和观察目的不同,而采用不同的方法,常 用的方法可概括为挑、刮、拨、切、撕。 (1)挑:对于在基物表面生长茂密的霉状病原体如霜霉菌,白粉菌、锈病 和黑粉菌 的冬孢子,个体明显的分生孢子器等,可用尖细的拨针,挑取少许制片,在保 证材料典型的情况下,所取材料不要过多,以免重叠,影响观察。 (2)刮:对于病原体稀少,或者放大镜也不能清楚看出霉层存在的病害标 本,可采用三角拨针(或刀片)沾蒸馏水少许,刮取病原制片,即在病部顺同 一方向刮取2一3次,将刮得的物沾在载玻片上的浮载剂中,载玻片应擦得很法 净,浮载剂应尽可能的少,否则少量的病原体在大滴的浮载剂中极易分散漂流, 在显微镜下难以寻找
(4)再用微动螺旋调节,使物名胜清晰为止。 (5)使用完毕后,将油镜转开,用擦镜纸沾二甲苯,拭去油迹,再用干擦 镜纸轻拭。 一般显微镜头至玻片距离(a)如下: 10×左右物镜的 a=5.0—7.5 毫米 40×左右镜的 a=0.5 毫米左右 100×物镜 a=0.1 毫米左右 三、显微镜的保护 1、取镜时,一手握镜臂,一手托镜座,轻轻放置,勿使受强力振动。 2、每次镜检之前都应将各部透镜,反光镜及铁部分等处尘土用毛笑、绒布 轻轻擦净,如有擦不去的污点,可用擦镜纸沾二甲苯拭擦。再用软绸或纱擦净, 切勿用酒精、乙醚等擦,以防将表皮漆溶去,造成损伤。 3、接目镜,接物镜等处如单用擦镜纸擦不净时,可用擦镜纸沾二甲苯清洁 之,切不可用普通纸或其它物擦拭。 4、用微动螺旋调节时,不要常向一方转动,以免过度而损坏。 5、不常使用的镜子,可涂少量镜表油或亚麻子油,使用完毕后放入镜箱, 或加防尘罩于低温干燥的室内保存。 四、临时玻片制作法 植物病原的检查,是病工作者的经常工作,其尤以临时玻片法最常用,必 须反复练习,以期熟练。 1、材料的选取:根据材料的特点和观察目的不同,而采用不同的方法,常 用的方法可概括为挑、刮、拨、切、撕。 (1)挑:对于在基物表面生长茂密的霉状病原体如霜霉菌,白粉菌、锈病 和黑粉菌 的冬孢子,个体明显的分生孢子器等,可用尖细的拨针,挑取少许制片,在保 证材料典型的情况下,所取材料不要过多,以免重叠,影响观察。 (2)刮:对于病原体稀少,或者放大镜也不能清楚看出霉层存在的病害标 本,可采用三角拨针(或刀片)沾蒸馏水少许,刮取病原制片,即在病部顺同 一方向刮取 2—3 次,将刮得的物沾在载玻片上的浮载剂中,载玻片应擦得很法 净,浮载剂应尽可能的少,否则少量的病原体在大滴的浮载剂中极易分散漂流, 在显微镜下难以寻找
(3)拨:对于产生在植物皮层下或半埋于基物内的分生孢子器,分生孢子 盘、子囊壳等。可把病原体连同寄生组织一同拨下,放在载玻片上的浮载剂中, 用两只解剖针,一支稳定材料,另一支小心拨去不含病原体的植物组织,使现 原体外露,在显微镜下观察。 (4)切:许多病原体,为了详细观察它的外部和内部的细微构造,侵染过 程等,必须制成很薄的切片进行观察,常用徒手切片法,具体方法是:选适当 材料,夹在通草、胡萝卜、马铃薯块中,左手持应切之物,右手持徒手切片或 一般刀片,从左至右将植物体切成薄片,切下的材料,最好随即放入盛有清水 的培养皿中,然后用移植饵或挑针在扩大镜下挑选其可用者,用显微镜观察。 (5)撕:有些病原体如白粉病菌和霜霉菌的无性世代及比核菌的菌丝等(在 乳酚油中透明后看得更清楚),常用撕取病部表皮的方法,观察的更为清楚。 2、常用的浮载剂 多用蒸馏水,有时也用乳酚油等。 五、本次实验具体做法一一挑取甜菜白粉病菌闭囊壳制片,具体做法如下: 1、将盖玻片和载玻片擦净,并在载玻片上滴一滴蒸馏水。 2、用挑针取甜叶上的小黑点(白粉菌闭囊壳)几粒,放入载玻片上的水滴 上,随即盖上盖玻片,在低倍镜下检查其形态。 3、外形看完后,用挑针在盖玻片上轻压小黑点处,使闭囊壳破裂,观察内 部的子囊,并绘制甜白粉菌形态图。 六、绘图要求 将显微镜下抟年垤的实物标本较准确的表达出来,常常是通过绘图来完成 的,在实验室内绘制生物标本和一般画和漫画有很大不同,以清楚和准确为准, 为此要求达到以下几点: 1、一切特征均用线务和点表示。禁止涂阴影。 2、恰当掌握各部分比例,不要过大或过小,造成比例失调,失去原物形态。 3、图上各部分名称标字,一律用平行虚一,注在右方,标本名称注在图的 正下方。 4、所有绘图,注字一律用铅笔。 作业: 1、绘制甜菜白粉病菌囊壳形态图,并注明各部分的名称。 2、在显微镜检查中,简述通过那几部分来调节光线的强弱
(3)拨:对于产生在植物皮层下或半埋于基物内的分生孢子器,分生孢子 盘、子囊壳等。可把病原体连同寄生组织一同拨下,放在载玻片上的浮载剂中, 用两只解剖针,一支稳定材料,另一支小心拨去不含病原体的植物组织,使现 原体外露,在显微镜下观察。 (4)切:许多病原体,为了详细观察它的外部和内部的细微构造,侵染过 程等,必须制成很薄的切片进行观察,常用徒手切片法,具体方法是:选适当 材料,夹在通草、胡萝卜、马铃薯块中,左手持应切之物,右手持徒手切片或 一般刀片,从左至右将植物体切成薄片,切下的材料,最好随即放入盛有清水 的培养皿中,然后用移植饵或挑针在扩大镜下挑选其可用者,用显微镜观察。 (5)撕:有些病原体如白粉病菌和霜霉菌的无性世代及比核菌的菌丝等(在 乳酚油中透明后看得更清楚),常用撕取病部表皮的方法,观察的更为清楚。 2、常用的浮载剂 多用蒸馏水,有时也用乳酚油等。 五、本次实验具体做法——挑取甜菜白粉病菌闭囊壳制片,具体做法如下: 1、将盖玻片和载玻片擦净,并在载玻片上滴一滴蒸馏水。 2、用挑针取甜叶上的小黑点(白粉菌闭囊壳)几粒,放入载玻片上的水滴 上,随即盖上盖玻片,在低倍镜下检查其形态。 3、外形看完后,用挑针在盖玻片上轻压小黑点处,使闭囊壳破裂,观察内 部的子囊,并绘制甜白粉菌形态图。 六、绘图要求 将显微镜下抟年垤的实物标本较准确的表达出来,常常是通过绘图来完成 的,在实验室内绘制生物标本和一般画和漫画有很大不同,以清楚和准确为准, 为此要求达到以下几点: 1、一切特征均用线务和点表示。禁止涂阴影。 2、恰当掌握各部分比例,不要过大或过小,造成比例失调,失去原物形态。 3、图上各部分名称标字,一律用平行虚一,注在右方,标本名称注在图的 正下方。 4、所有绘图,注字一律用铅笔。 作业: 1、绘制甜菜白粉病菌囊壳形态图,并注明各部分的名称。 2、在显微镜检查中,简述通过那几部分来调节光线的强弱
实验三真菌的一般形态及子实体类型的观察 目的:真菌的种类繁多,形态复杂,而真菌的分类又以形态为基础。通过 这次实验对真菌的各种重要的基本构造(营养体和繁殖体)进行观察,使之真 菌有个初步概念。 材料:无隔菌丝、有隔菌丝、磨菇、小麦雪腐病菌菌核标本。根状菌索、 子座(麦角菌)、黑根霉,小麦白粉病菌的分生孢子标本或玻片,菠菜霜霉菌的 卵孢子、小麦白粉病菌的叶片、桃白粉病菌的有性世代玻片、小麦腥黑穗病菌 的担子和担子孢子等。 纱布、盖玻片、载玻片、显微镜、擦镜纸、蒸馏水、挑针等。 方法与步骤: 一、真菌营养体的观察 1、无隔菌丝的观察:挑取培养皿内的无隔菌丝少许,(疫霉菌或腐霉菌), 放在载玻片上的蒸馏水水滴中,盖上盖破片,观察菌丝有无分隔及其颜色,形 状等,绘图。 2、有隔菌丝的观察:照“1”法挑取有隔菌丝少许(交链孢霉或镰孢霉菌) 制片观察有无分隔及其颜色,形状等。绘图。 二、真菌营养体的组织体形态的观察 1、小麦雪腐病菌(或油菜菌核病菌)菌核的观察,观察菌核的形状、大小 及菌核的切片,注意切片表层细胞和内层细胞的颜色、形状组织紧密程度,细 胞壁的厚度等方面的区别。 2、小麦麦角病菌子座切片的观察 3、木材腐烂病菌根状菌索的观察 三、真菌的无性孢子及有性孢子的类型及形态观察 (一)无性孢子观察 1、黑根霉菌的孢囊孢子的观察,结合无隔菌丝的观察进行,自制玻片,注 意其孢子及孢囊孢子的形状?绘图。 2、小麦白粉病菌分生孢子观察:挑取褐色霉层,自制玻片观察。 (二)有性孢子的观察 1、观察辣椒疫霉菌的卵孢子或油菜白锈病菌的卵孢子(玻片标本)。并绘 图
实验三 真菌的一般形态及子实体类型的观察 目的:真菌的种类繁多,形态复杂,而真菌的分类又以形态为基础。通过 这次实验对真菌的各种重要的基本构造(营养体和繁殖体)进行观察,使之真 菌有个初步概念。 材料:无隔菌丝、有隔菌丝、磨菇、小麦雪腐病菌菌核标本。根状菌索、 子座(麦角菌)、黑根霉,小麦白粉病菌的分生孢子标本或玻片,菠菜霜霉菌的 卵孢子、小麦白粉病菌的叶片、桃白粉病菌的有性世代玻片、小麦腥黑穗病菌 的担子和担子孢子等。 纱布、盖玻片、载玻片、显微镜、擦镜纸、蒸馏水、挑针等。 方法与步骤: 一、真菌营养体的观察 1、无隔菌丝的观察:挑取培养皿内的无隔菌丝少许,(疫霉菌或腐霉菌), 放在载玻片上的蒸馏水水滴中,盖上盖破片,观察菌丝有无分隔及其颜色,形 状等,绘图。 2、有隔菌丝的观察:照“1”法挑取有隔菌丝少许(交链孢霉或镰孢霉菌) 制片观察有无分隔及其颜色,形状等。绘图。 二、真菌营养体的组织体形态的观察 1、小麦雪腐病菌(或油菜菌核病菌)菌核的观察,观察菌核的形状、大小 及菌核的切片,注意切片表层细胞和内层细胞的颜色、形状组织紧密程度,细 胞壁的厚度等方面的区别。 2、小麦麦角病菌子座切片的观察 3、木材腐烂病菌根状菌索的观察 三、真菌的无性孢子及有性孢子的类型及形态观察 (一)无性孢子观察 1、黑根霉菌的孢囊孢子的观察,结合无隔菌丝的观察进行,自制玻片,注 意其孢子及孢囊孢子的形状?绘图。 2、小麦白粉病菌分生孢子观察:挑取褐色霉层,自制玻片观察。 (二)有性孢子的观察 1、观察辣椒疫霉菌的卵孢子或油菜白锈病菌的卵孢子(玻片标本)。并绘 图
2、观察接合孢子(玻片标本),注意其颜色和形状。 43、观察桃白粉病菌闭囊壳子囊及子囊孢子。 4、观察小麦腥黑穗病菌的担子及担子孢子(或其它担子菌的切片)。 作业: 1、绘制有隔菌丝和无隔菌丝形态图。 2、绘制辣椒疫霉病菌卵孢子,接合菌的接合孢子及桃白粉病菌闭囊壳。 3、绘制黑根霉的孢子囊及孢囊孢子、小麦白粉病菌的分生孢子图,两者有 何区别
2、观察接合孢子(玻片标本),注意其颜色和形状。 43、观察桃白粉病菌闭囊壳子囊及子囊孢子。 4、观察小麦腥黑穗病菌的担子及担子孢子(或其它担子菌的切片)。 作业: 1、绘制有隔菌丝和无隔菌丝形态图。 2、绘制辣椒疫霉病菌卵孢子,接合菌的接合孢子及桃白粉病菌闭囊壳。 3、绘制黑根霉的孢子囊及孢囊孢子、小麦白粉病菌的分生孢子图,两者有 何区别
实验四、五鞭毛菌亚门及接合菌亚门 真菌的形态及其致病特点的观察 鞭毛菌亚门真菌,形态差别很大,营养体从比较原始的原质团到很发达的 无隔菌丝体,它们共同的特征是无性繁殖产生游动孢子,根据流动孢子鞭毛的 特征,鞭毛菌亚门分为四纲:根肿菌纲、壶菌纲、丝壶菌钢和卵菌纲。 一、根肿菌纲和壶菌纲 目的:通过十字花科根种病菌和玉米褐斑病菌的形态及其所致病害特点的 观察,了解这些最低级而原始种类的真菌的形态及其所致病害的特点。 材料及用具:1、十字花科蔬菜根肿病菌切片及标本:2、甜菜多粘菌切片 标本:3玉米褐斑病菌切片及标本;4、显微镜:5、盖玻片和载玻片:6、解剖 针和刀片:7、纱布:8、浮载剂(乳酚油、乳酚油棉兰、蒸馏水)。 内容及方法: (一)十字花科蔬菜根肿病菌(Piasmodiophora brassicae)。 (1)观察受害植物根部有什么显著变化?表现什么症状? (2)在膨大的病根细胞中,有颜色较深,呈颗粒状的原生质关物此即病菌 的菌体,它们有无一定形状? (3)在某些比正常细胞大数掊的受病细胞中,其内有为数众多的鱼卵状物, 较上述菌体透明,即休眠孢子。 (二)甜菜多粘菌(PoLymxa bedae):观察甜多沾菌的切片标本,注意 其休眠孢子囊的形状和排列。 (三)玉米褐斑病菌(Physoderma maydis)。 (1)观察受病的玉米叶片,叶鞘等标本,受病组织上有无紫褐色的隆起病 斑?它们是否较多地发生在叶鞘、叶基、主脉附近等易于存水的部位?这与病 菌的生活习性有何相关? (2)观察玉米褐斑病菌的组织切片,或自制徒手切片,在显微镜下检查。 在病组织细胞内有无扁球形,金黄色至黄褐色的休眠孢子囊?即用挑针挑破病 部,在表皮下有大量褐色粉末,即为病菌的休眠孢子囊,在显微镜下观察休眠 孢子囊的形态和特征。 作业:绘制十字花科蔬菜根肿病和玉米褐斑病菌形态特征图
实验四、五 鞭毛菌亚门及接合菌亚门 真菌的形态及其致病特点的观察 鞭毛菌亚门真菌,形态差别很大,营养体从比较原始的原质团到很发达的 无隔菌丝体,它们共同的特征是无性繁殖产生游动孢子,根据流动孢子鞭毛的 特征,鞭毛菌亚门分为四纲:根肿菌纲、壶菌纲、丝壶菌钢和卵菌纲。 一、根肿菌纲和壶菌纲 目的:通过十字花科根种病菌和玉米褐斑病菌的形态及其所致病害特点的 观察,了解这些最低级而原始种类的真菌的形态及其所致病害的特点。 材料及用具:1、十字花科蔬菜根肿病菌切片及标本;2、甜菜多粘菌切片 标本;3 玉米褐斑病菌切片及标本;4、显微镜;5、盖玻片和载玻片;6、解剖 针和刀片;7、纱布;8、浮载剂(乳酚油、乳酚油棉兰、蒸馏水)。 内容及方法: (一)十字花科蔬菜根肿病菌(Piasmodiophora brassicae)。 (1)观察受害植物根部有什么显著变化?表现什么症状? (2)在膨大的病根细胞中,有颜色较深,呈颗粒状的原生质关物此即病菌 的菌体,它们有无一定形状? (3)在某些比正常细胞大数掊的受病细胞中,其内有为数众多的鱼卵状物, 较上述菌体透明,即休眠孢子。 (二)甜菜多粘菌(PoLymxa bedae):观察甜多沾菌的切片标本,注意 其休眠孢子囊的形状和排列。 (三)玉米褐斑病菌(Physoderma maydis)。 (1)观察受病的玉米叶片,叶鞘等标本,受病组织上有无紫褐色的隆起病 斑?它们是否较多地发生在叶鞘、叶基、主脉附近等易于存水的部位?这与病 菌的生活习性有何相关? (2)观察玉米褐斑病菌的组织切片,或自制徒手切片,在显微镜下检查。 在病组织细胞内有无扁球形,金黄色至黄褐色的休眠孢子囊?即用挑针挑破病 部,在表皮下有大量褐色粉末,即为病菌的休眠孢子囊,在显微镜下观察休眠 孢子囊的形态和特征。 作业:绘制十字花科蔬菜根肿病和玉米褐斑病菌形态特征图