实验九、综合实验水质的微生物检测华南乡范大学生命科学学院实验九水质的微生物检测（综合实验）实验目的心了解水质微生物检验的原理&学习测定水中大肠菌群数量的多管发酵法
实验九 水质的微生物检测（综合实验） 实验目的 ❖了解水质微生物检验的原理 ❖学习测定水中大肠菌群数量的多管 发酵法
实验九、综合实验水质的微生物检测华南乡范大学生命科学学院心水中细菌总数的测定平板菌落计数法*水中大肠菌群数量的测定
❖水中细菌总数的测定——平板菌落计数 法 ❖水中大肠菌群数量的测定
实验九、综合实验水质的微生物检测华南范大学水中大肠菌群数量的测定生命科学学院*大肠菌群一一能在37℃24-48h内发酵乳糖产酸与产气、需氧或兼性厌氧的革兰氏阴性无芽孢杆菌。主要包括埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、肠杆菌属、克雷伯氏菌属的细菌。粪便中存在大量的大肠菌群细菌，在水体中存活的时间和对氯的抵抗力与肠道致病菌，如沙门氏菌、志贺氏菌相似。易于培养和观察
水中大肠菌群数量的测定 ❖大肠菌群——能在37 ℃24-48h内发酵乳糖产 酸与产气、需氧或兼性厌氧的革兰氏阴性无芽 孢杆菌。 ❖主要包括埃希氏菌属、柠檬酸杆菌属、肠杆菌 属、克雷伯氏菌属的细菌。 ❖粪便中存在大量的大肠菌群细菌，在水体中存 活的时间和对氯的抵抗力与肠道致病菌，如沙 门氏菌、志贺氏菌相似。易于培养和观察
实验九、综合实验水质的微生物检测乳糖蛋白陈培养基华南范大学乳糖蛋白陈培养基100ml100ml水样10ml10ml10mS初发酵C培37试验24h肉48h内48h内a不产气阳生可阴性伊红美盟典型菌落平板上划线长心和金同光泽的深37C培养色游O平板分高O24h阳生阴性涂片苹兰氏染色乳糖蛋白陈发酵管复发酵证37C培养24h武验产气不产气报告为大肠菌群阳性报告为大肠菌群阴性
典型菌落 产气 报告为大肠菌群阳性 不产气 报告为大肠菌群阴性 乳糖蛋白胨培养基 乳糖蛋白胨培养基
实验九、水质的微生物检测综合实验华南虾范大学生命科学学院好国基味安国生干由店新更童的新视健自表4-10EMB培养基的成分伊红Y美蓝蒸馏水最终pH成分蛋白陈乳糖燕糖K,HPO4551027.21000含量（g）0.40.065赋老G+菌：受抑制产酸力强，菌落在透射光下呈紫色，反射光下呈绿色金属闪光：E.coli（大肠杆菌）试样能发酵乳糖，产酸Enterobacter（肠杆菌属）洋恭Sarratia（沙雷氏菌属）产酸力弱，菌落棕色鲜宾商其园Klebsiella（克雷伯氏菌属）G-菌然霸舒业塑类养营创生养依式Hafnia（哈夫尼菌属）乳糖起选择作用：漠甲酚紫起产酸指示，还有抑制其他细菌作用
乳糖起选择作用；溴甲酚紫起产酸指示，还有抑制其他细菌作用
实验九、（综合实验水质的微生物检测华南乡范大学实验方法和步骤生命科学学院1.水样的采取K心自来水：先将自来水龙头用火焰烧灼3min灭菌，再开放水龙头使水流5min后，以灭菌三角烧瓶接取水样以待分析。池水、河水或湖水：应取距水面10-15cm的深层水样先将灭菌的带塞玻璃瓶，瓶口向下浸人水中，然后翻转过来，除去玻璃塞，水即流人瓶中，盛满后，将瓶塞盖好，再从水中取出，最好立即检查，否则需放人冰箱中保存
实验方法和步骤 ❖ 1．水样的采取 ❖自来水：先将自来水龙头用火焰烧灼3min灭菌，再开 放水龙头使水流5 min后，以灭菌三角烧瓶接取水样， 以待分析。 ❖池水、河水或湖水：应取距水面10- 15 cm的深层水样， 先将灭菌的带塞玻璃瓶，瓶口向下浸人水中，然后翻 转过来，除去玻璃塞，水即流人瓶中，盛满后，将瓶 塞盖好，再从水中取出，最好立即检查，否则需放人 冰箱中保存
实验九、水质的微生物检测（综合实验华南乡范大学多管发酵法检测水样中大肠菌群生命科学学院自来水检查X*初发酵试验接种水样总量为300ml：在2个含有50ml三倍浓缩的乳糖蛋白脉发酵烧瓶中，各加入100ml水样。在10支含有5ml三倍浓缩乳糖蛋白陈发酵管中，各加入10ml水样。混匀后，37℃培养24h，24h未产气的继续培养至48h。通过平板分离、涂片、染色、镜检和复发酵试验检查各发酵管（瓶）中是否有大肠菌群存在。证实有大肠菌群存在后，再根据初发酵试验的阳性管（瓶）数查阅接种水样总量为300ml检数表，即得大肠菌群数。MPN法（MostProbableNumber）最大可能敷法
多管发酵法检测水样中大肠菌群 ❖ 自来水检查 ❖ 初发酵试验接种水样总量为300ml：在2个含有50 ml三倍 浓缩的乳糖蛋白脉发酵烧瓶中，各加入100 ml水样。在 10支含有5 ml三倍浓缩乳糖蛋白陈发酵管中，各加入10 ml水样。混匀后，37℃培养24h，24 h未产气的继续培养 至48 h。通过平板分离、涂片、染色、镜检和复发酵试 验检查各发酵管（瓶）中是否有大肠菌群存在。 ❖ 证实有大肠菌群存在后，再根据初发酵试验的阳性管 （瓶）数查阅接种水样总量为300ml检数表，即得大肠菌 群数。MPN 法（Most Probable Number）最大可能數法
实验九、水质的微生物检测综合实验华南虾范大学生命科学学院表9-10大肠菌群检数表接种水样总量300m1（100ml2份，10ml10份）100ml水量的阳性瓶数2010ml水最的阳性管数1L水样中大肠菌群数1L水样中大肠菌群数1L水样中大肠菌群数0411230
实验九、（综合实验水质的微生物检测华南乡范大学池水、河水或湖水等的检查生命科学学院*（1）将水样稀释成10-1与10-2(2)分别吸取lml10-1与10-2的稀释水样和lml原水样，各注入装有10ml普通浓度乳糖蛋白陈发酵管中。另取10ml和100ml原水样，分别注人装有5ml和50ml三倍浓缩乳糖蛋白陈发酵液的试管（瓶）中。（3）初发酵实验、平板分离和复发酵实验（4）发酵结果查阅接种水样总量为111.11ml检索表
池水、河水或湖水等的检查 ❖ (1）将水样稀释成10-1与10-2． ❖ (2)分别吸取lml 10-1与10-2的稀释水样和l ml原 水样，各注入装有10 ml普通浓度乳糖蛋白胨 发酵管中。另取10 ml和100 ml原水样，分别注 人装有5 ml和50 ml三倍浓缩乳糖蛋白胨发酵液 的试管（瓶）中。 ❖（3）初发酵实验、平板分离和复发酵实验 ❖（4）发酵结果查阅接种水样总量为111.11ml检 索表
实验九、水质的微生物检测综合实验华南師范大学生命科学学院表XV-3大肠菌群检数表接种水样总量111.1ml（100ml、10ml.1ml、0.1ml各1份）接种水样量/ml每升水样中100100.1大肠菌群数23808“+大肠菌群发醛阳性，二大肠菌群发酵阴性