实验六、细菌的生理生化实验华南乡范大学生命科学学院实验六细菌的生理生化实验心实验目的*巩固微生物无菌接种技术：心了解细菌鉴定中常用的生理生化实验的原理和方法
实验六 细菌的生理生化实验 ❖实验目的 ❖巩固微生物无菌接种技术； ❖了解细菌鉴定中常用的生理生化实验 的原理和方法
实验六、细菌的生理生化实验华南乡范大学微生物的生理生化反应生命科学学院微生物细胞在酶的催化下进行各种各样的生理生X化反应*把微生物细胞在一定的条件下培养，通过观察生理现象和检查代谢产物，可以了解微生物的代谢过程和代谢的特点?由于不同的微生物可能具有不同的酶，代谢途径和代谢产物可能也有不同，生理生化反应是微生物分类鉴定的重要指标之一
微生物的生理生化反应 ❖微生物细胞在酶的催化下进行各种各样的生理生 化反应 ❖把微生物细胞在一定的条件下培养，通过观察生 理现象和检查代谢产物，可以了解微生物的代谢 过程和代谢的特点 ❖由于不同的微生物可能具有不同的酶，代谢途径 和代谢产物可能也有不同，生理生化反应是微生 物分类鉴定的重要指标之一
实验六、细菌的生理生化实验华南乡范大学淀粉水解实验生命科学学院淀粉培养基淀粉培养基接种+培养24h变色圈，水解圈加卢哥氏碘液I-KI
淀粉水解实验 淀粉培养基 + 淀粉培养基 + 接种 + 变色圈，水解圈 培养24h 加卢哥氏碘液 I-KI
实验六、细菌的生理生化实验华南乡范大学生命科学学院*结果：用 + 表示;X有水解圈一淀粉水解实验阳性，用 －表示;无水解圈一淀粉水解实验阴性，X
❖结果： ❖ 有水解圈—淀粉水解实验阳性，用 + 表示； ❖ 无水解圈—淀粉水解实验阴性，用 - 表示；
实验六、细菌的生理生化实验华南乡范大学糖发酵实验生命科学学院原理：X丙酮酸裂解生成乙酰CoA与甲酸，甲酸在酸性条件下在甲酸氢解酶作用下可进一步裂解生成H,和CO2——产酸产气*缺少甲酸氢解酶—一产酸不产气步骤：配制糖发酵培养基—接种一培养（约X24h)—观察结果*结果：*紫色无气泡，既不产酸也不产气用-表示：*黄色无气泡，产酸不产气，用+表示；黄色且有气泡，产酸产气，用0表示
糖发酵实验 ❖ 原理： ❖丙酮酸裂解生成乙酰CoA与甲酸，甲酸在酸性条件 下在甲酸氢解酶作用下可进一步裂解生成H2和 CO2——产酸产气 ❖缺少甲酸氢解酶——产酸不产气 ❖ 步骤：配制糖发酵培养基——接种——培养（约 24h)——观察结果 ❖ 结果： ❖ 紫色无气泡，既不产酸也不产气用- 表示； ❖ 黄色无气泡，产酸不产气，用+ 表示； ❖ 黄色且有气泡，产酸产气，用0 表示
实验六、细菌的生理生化实验华南乡范大学（M.R实验）甲基红实验生命科学学院原理&微生物进行混合酸发酵，产生各种有机酸-pH下降+红色加入指示剂甲基红接种培养（约24h)步骤：配制蛋白陈水培养基加入指示剂甲基红1~2滴观察结果结果：X红色一一M.R实验阳性，用+表示;不变色M.R实验阴性，，用-表示；
甲基红实验（M.R实验） ❖原理 ❖微生物进行混合酸发酵，产生各种有机酸——pH下降—— 加入指示剂甲基红——红色 ❖ 步骤：配制蛋白胨水培养基——接种——培养（约24h) —— 加入指示剂甲基红1~2滴——观察结果 ❖ 结果： ❖ 红色——M.R实验阳性，用+ 表示； ❖ 不变色——M.R实验阴性，用- 表示；
实验六、细菌的生理生化实验华南師范大学V.P实验生命科学学院CHCH,CH,CH,CoCoCOCHOHCO2H饰糖一+2C0COHCOOHCHOHCHOHCOOHCH,CHCH,丙酮酸乙能乳酸能甲基甲醇2.3-丁二降+OH2HCH,COCOCH,二乙酰CHON-C-CHNH+HN=7HN:+2H,ONHN=C-CHCH,二乙酰胍基红色化合物
V.P实验
实验六、细菌的生理生化实验华南范大学V.P实验生命科学学院接种一培养（约步骤：配制蛋白陈水培养基24h)——5~10d 40%K0H,5~10d 5%a-奈酚和少量肌醇，取出塞子，用力震荡，保温（37度15~30min）观察结果结果：X红色一一V.P实验阳性，用 + 表示：+不变色一一V.P实验阴性，用 － 表示
V.P实验 ❖ 步骤：配制蛋白胨水培养基——接种——培养（约 24h) ——5~10d 40%KOH, 5~10d 5%a-奈酚和 少量肌 醇 ，取出塞子，用力震荡，保温（37 度15~30min）——观察结果 ❖ 结果： ❖ 红色——V.P实验阳性，用 + 表示； ❖ 不变色——V.P实验阴性，用 - 表示
实验六、细菌的生理生化实验华南乡范大学实验内容生命科学学院以组为单位进行淀粉水解实验、糖发酵实验、V.P实验和XM.R实验。实验菌种：XX淀粉水解实验、糖发酵实验：大肠杆菌、苏云金芽孢杆菌*V.P实验和M.R实验：大肠杆菌、产气杆菌注意事项：X实验报告：X?1、列表记录实验结果*2、思考题：第4小题
实验内容 ❖ 以组为单位进行淀粉水解实验、糖发酵实验、 V.P实验和 M.R实验。 ❖ 实验菌种： ❖淀粉水解实验、糖发酵实验：大肠杆菌、苏云金芽孢杆菌 ❖V.P实验和M.R实验：大肠杆菌、产气杆菌 ❖ 注意事项： ❖ 实验报告： ❖ 1、列表记录实验结果 ❖ 2、思考题：第4小题
实验六、细菌的生理生化实验华南乡范大学四大类细胞型微生物菌落的鉴定生命科学学院*初步鉴定【小而扁平湿润：正反面颜色一致小而隆起细菌「大而扁平大大而隆起·酵母菌菌落小而致密··放线菌小干燥，正反面，中央与边缘颜色不一致大而致密霉菌大大而疏松.心确证：显微镜观察
四大类细胞型微生物菌落的鉴定 ❖初步鉴定 ❖确证：显微镜观察