实验七、理化因素对微生物生长的影响华南乡范大学生命科学学院实验七、王理化因素对微生物生长的影响实验目的1、学习和掌握研究理化因素对微生物生长的影响2、学习和掌握利用浊度法测量微生物生长的方法;3、了解不同pH对大肠杆菌生长的影响
实验七、理化因素对微生物生长的影响 实验目的 1、学习和掌握研究理化因素对微生物生长的影 响 2、学习和掌握利用浊度法测量微生物生长的方 法； 3、了解不同pH对大肠杆菌生长的影响
实验七、理化因素对微生物生长的影响华南乡范大学生命科学学院研究方法：利用液体培养定量测定生长量X定量测定微生物生长量的常用方法X>浊度法>重量法>显微镜直接计数法√菌落计数法
❖ 研究方法：利用液体培养——定量测定生长量 ❖ 定量测定微生物生长量的常用方法 ➢浊度法 ➢重量法 ➢显微镜直接计数法 ➢菌落计数法
实验七、理化因素对微生物生长的影响华南乡范大学浊度法生命科学学院1.00.9原理：在一定范围内，菌悬液X理论值OD0.8中的细胞浓度与混浊度成正比，实际值0.7即与光吸收值（OD)成正比，菌数越多，OD越大。因此，借0.6助于分光光度计，在一定波长0.5下测定菌悬液的OD，就可反0.4应出菌液的浓度。0.30.2测定方法：测定细胞培养物在X600nm光吸收0.1优缺点细胞数目或干重适应范围：单细胞无分支的微特点：生物生长的测定注意事项：?快速、简便；但易受干扰
浊度法 ❖ 原理：在一定范围内，菌悬液 中的细胞浓度与混浊度成正比， 即与光吸收值(OD)成正比，菌 数越多， OD越大。因此，借 助于分光光度计，在一定波长 下测定菌悬液的OD ，就可反 应出菌液的浓度。 ❖ 测定方法：测定细胞培养物在 600nm光吸收 ❖ 优缺点 ❖ 适应范围：单细胞无分支的微 生物生长的测定 ❖ 注意事项： 特点： 快速、简便；但易受干扰
实验七、理化因素对微生物生长的影响华南乡范大学重量法生命科学学院原理：将一定量的菌液中的菌体通过离心或过X滤分离出来，然后烘干至恒重（干燥温度可采用105℃、100℃或80℃、称重。优缺点：快速、简便；但易受干扰。X适应范围：丝状微生物生长的测定X测定方法X>干重法>湿重法注意事项
重量法 ❖原理：将一定量的菌液中的菌体通过离心或过 滤分离出来,然后烘干至恒重(干燥温度可采用 105℃、100℃或80℃)、称重。 ❖优缺点：快速、简便；但易受干扰。 ❖适应范围：丝状微生物生长的测定 ❖测定方法 ➢干重法 ➢湿重法 ❖注意事项
实验七、理化因素对微生物生长的影响华南乡范大学显微镜直接计数法生命科学学院*优点：#>简单、快速；重复性高#盖玻片计数室不足：不能区分死细胞和活细胞，应用范围较窄?>一些小的细胞在显微镜下很难看到：样品中菌液浓度不能低于106个/mL不能用于菌丝体或呈链状而不分散的微生物测定
显微镜直接计数法 ❖ 不足： ➢ 不能区分死细胞和活细胞，应用范围较窄 ➢ 一些小的细胞在显微镜下很难看到； ➢ 样品中菌液浓度不能低于106个/mL ➢ 不能用于菌丝体或呈链状而不分散的微生物 测定。 ❖优点： ➢简单、快速；重复性高
实验七、理化因素对微生物生长的影响*优点华南乡范大学平板菌落计数法生命科学学院√灵敏度高V可以区分死活细胞1ml1ml1ml1ml1ml1ml√应用广MMY√食品、饮料等微生物检查√消毒灭菌效果9-ml broth检查1/1031/1061/1041/1051/101/100Sampleto不足1/102be countedPlate1-ml√测定的结果误差也samples较大。√操作也比较烦琐1720159√需要的时间较长Too many to count159x1031.59x105-PlateDilutionOrganismspermlfactorcountoforiginalsample
平板菌落计数法 ❖优点 ✓灵敏度高 ✓可以区分死活细胞 ✓应用广 ✓食品、饮料等 微生物检查 ✓消毒灭菌效果 检查 ۞不足 ✓测定的结果误差也 较大。 ✓操作也比较烦琐 ✓需要的时间较长
实验七、理化因素对微生物生长的影响华南乡范大学实验操作步骤生命科学学院配制牛肉膏蛋白陈液体培养基（每组500mL）X*分装于6个三角瓶中（50mL/瓶）×将上述培养基中pH分别调到3、5、7、9、11、13（每种样品留出10ml以作空白）*包扎*121度灭菌20分钟，冷却接种（0.5ml/瓶大肠杆菌过夜培养物）X(OD600)*37度恒温震荡培养24小时，测定光吸收值
实验操作步骤 ❖配制牛肉膏蛋白胨液体培养基（每组500mL） ❖分装于6个三角瓶中（50mL/瓶） ❖将上述培养基中pH分别调到3、5、7、9、11、13 （每种样品留出10ml以作空白） ❖包扎 ❖121度灭菌20分钟，冷却 ❖接种（0.5ml/瓶大肠杆菌过夜培养物） ❖37度恒温震荡培养24小时，测定光吸收值（OD600)
实验七、理化因素对微生物生长的影响华南师范大学实验报告要求生命科学学院格式：X按照正式发表论文格式题目：环境中四大类细胞型微生物的分离和生物学性质研究作者，学号摘要：主要方法和和主要结果前言（为什么要进行该实验，要达到什么目的等）实验方法（培养基配制、采样、分离、纯化、性质研究（菌株形态结构观察、大小测定、生理生化实验、环境因素影响等）实验结果：分离实验结果、形态结构和培养特征观察结果初步鉴定结果、革兰氏染色结果，大小测定结果和其他性质研究结果等。分析与讨论参考文献要求文字简练X
实验报告要求 ❖ 格式：按照正式发表论文格式 ➢ 题目：环境中四大类细胞型微生物的分离和生物学性质研究 ➢ 作者，学号 ➢ 摘要：主要方法和和主要结果 ➢ 前言（为什么要进行该实验，要达到什么目的等） ➢ 实验方法（培养基配制、采样、分离、纯化、性质研究（菌 株形态结构观察、大小测定、生理生化实验、环境因素影响 等） ➢ 实验结果：分离实验结果、形态结构和培养特征观察结果、 初步鉴定结果、革兰氏染色结果，大小测定结果和其他性质 研究结果等。 ➢ 分析与讨论 ➢ 参考文献 ❖要求文字简练
实验七、理化因素对微生物生长的影响茅南乡范大学生命科学学院谢谢！