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四川大学华西医院:《临床免疫学与检验技术》课程教学资源(PPT课件讲稿)第四章 单克隆抗体与基因工程抗体的制备

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第一节 杂交瘤技术的基本原理 第二节 单克隆抗体制备 第三节 基因工程抗体 第四节 单克隆抗体应用
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第四章 单克隆抗体与基因工程抗体的制备

第四章 单克隆抗体与基因工程抗体的制备

第一节杂交瘤技术的基本原理

第一节 杂交瘤技术的基本原理

抗体种类 第一代抗体多克隆抗体( polyclonal antibody) 第二代抗体单克隆抗体( monoclonal antibody) 第三代抗体基因工程抗体( genetic engineering antibody)

第一代抗体 多克隆抗体(polyclonal antibody) 第二代抗体 单克隆抗体(monoclonal antibody) 第三代抗体 基因工程抗体(genetic engineering antibody) 抗体种类

淋巴细胞 B lympho

。 淋巴细胞

淋巴细胞发育 B-cell differentiation: class diversity immature B cell nature Bcell plasma cell class SIT n b class switch antigen antigen inde pendent dependent

。 淋巴细胞发育

浆细胞

。 浆细胞

抗原接种 Primary response Secondary respons Antibody ug mr-1 serum) phase 10 10t 102 10 antigen A

。 抗原接种

动物 BALB/c小鼠 7~12周龄 20~25g体重

BALB/c小鼠 7~12周龄 20~25g体重 动 物

单克隆抗体 B淋巴细胞:寿命短分泌特异系性抗体 骨髓瘤细胞:寿命长 杂交瘤细胞:寿命长,单克隆抗体

B淋巴细胞:寿命短,分泌特异系性抗体 骨髓瘤细胞:寿命长 杂交瘤细胞:寿命长,单克隆抗体 单克隆抗体

杂交瘤技术原理 >聚乙二醇(PEG):细胞融合剂,使免疫的小鼠脾细胞 与小鼠骨髓瘤细胞融合 HAT培养基的选择培养:反复的免疫学检测筛选克隆化増 殖的杂交瘤细胞系 >单克隆抗体生成:接种杂交瘤细胞于小鼠腹腔,腹水中 即可得到高效价的单克隆抗体

➢ 聚乙二醇(PEG):细胞融合剂,使免疫的小鼠脾细 胞 与小鼠骨髓瘤细胞融合 ➢ HAT培养基的选择培养:反复的免疫学检测筛选克隆化增 殖的杂交瘤 细胞系 ➢ 单克隆抗体生成:接种杂交瘤 细胞于小鼠腹腔,腹水中 即可得到高效价的单克隆抗体 杂交瘤技术原理

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