第四章 单克隆抗体与基因工程抗体的制备
第四章 单克隆抗体与基因工程抗体的制备
第一节杂交瘤技术的基本原理
第一节 杂交瘤技术的基本原理
抗体种类 第一代抗体多克隆抗体( polyclonal antibody) 第二代抗体单克隆抗体( monoclonal antibody) 第三代抗体基因工程抗体( genetic engineering antibody)
第一代抗体 多克隆抗体（polyclonal antibody) 第二代抗体 单克隆抗体（monoclonal antibody) 第三代抗体 基因工程抗体（genetic engineering antibody) 抗体种类
淋巴细胞 B lympho
。 淋巴细胞
淋巴细胞发育 B-cell differentiation: class diversity immature B cell nature Bcell plasma cell class SIT n b class switch antigen antigen inde pendent dependent
。 淋巴细胞发育
浆细胞
。 浆细胞
抗原接种 Primary response Secondary respons Antibody ug mr-1 serum) phase 10 10t 102 10 antigen A
。 抗原接种
动物 BALB/c小鼠 7~12周龄 20~25g体重
BALB/c小鼠 7~12周龄 20~25g体重 动 物
单克隆抗体 B淋巴细胞:寿命短分泌特异系性抗体 骨髓瘤细胞:寿命长 杂交瘤细胞:寿命长,单克隆抗体
B淋巴细胞:寿命短,分泌特异系性抗体 骨髓瘤细胞：寿命长 杂交瘤细胞：寿命长，单克隆抗体 单克隆抗体
杂交瘤技术原理 >聚乙二醇(PEG):细胞融合剂,使免疫的小鼠脾细胞 与小鼠骨髓瘤细胞融合 HAT培养基的选择培养:反复的免疫学检测筛选克隆化増 殖的杂交瘤细胞系 >单克隆抗体生成:接种杂交瘤细胞于小鼠腹腔,腹水中 即可得到高效价的单克隆抗体
➢ 聚乙二醇（PEG）：细胞融合剂，使免疫的小鼠脾细 胞 与小鼠骨髓瘤细胞融合 ➢ HAT培养基的选择培养：反复的免疫学检测筛选克隆化增 殖的杂交瘤 细胞系 ➢ 单克隆抗体生成：接种杂交瘤 细胞于小鼠腹腔，腹水中 即可得到高效价的单克隆抗体 杂交瘤技术原理