器官知組织
第五章 器官和组织培养
器官培养( Organ culture) 植物某一器官的全部或部分或器官原基的离体 培养,包括根、茎、叶、花、果实、种子等。 特点:能保持器官所具有的特征性结构。 组织培养( Tissue culture) 指形成层组织、分生组织、表皮组织、薄壁组 织和各种器官组织以及愈伤组织的培养
植物某一器官的全部或部分或器官原基的离体 培养，包括根、茎、叶、花、果实、种子等。 特点：能保持器官所具有的特征性结构。 指形成层组织、分生组织、表皮组织、薄壁组 织和各种器官组织以及愈伤组织的培养。 器官培养（Organ culture ） 组织培养（Tissue culture）
茎的培养 1、类型 茎尖培养:10-100mn茎尖分生组织(脱毒) 茎段培养:带有腋(侧)芽或叶柄、长几厘米的 茎节段进行离体培养(快繁) 嫩茎段常作为快速繁殖的外植体:即当年萌发 或新抽出的尚未完全木质化的核条,其细胞的 可塑性大,容易离体培养
一、茎的培养 1、类型 茎尖培养： 茎段培养： 嫩茎段常作为快速繁殖的外植体：即当年萌发 或新抽出的尚未完全木质化的枝条，其细胞的 可塑性大，容易离体培养。 10-100m的茎尖分生组织（脱毒） 带有腋(侧)芽或叶柄、长几厘米的 茎节段进行离体培养（快繁）
2、作用 无性系快速繁殖; 培养无病毒苗,品种改良; 理论基础研究。 3、建立无菌材料(茎段)及培养 将经过表面消毒的茎段在无菌条件下,切成几 厘米长带节的节段,接种在固体培养基上。经 过培养后,在茎段可直接发生不定芽,或先诱 导形成愈伤组织,再脱分化形成再生苗。把再 生苗进行切割,转接到生根培养基上培养,便 可得到完整的小植株
将经过表面消毒的茎段在无菌条件下，切成几 厘米长带节的节段，接种在固体培养基上。经 过培养后，在茎段可直接发生不定芽，或先诱 导形成愈伤组织，再脱分化形成再生苗。把再 生苗进行切割，转接到生根培养基上培养，便 可得到完整的小植株。 2、作用 ✓无性系快速繁殖； ✓培养无病毒苗，品种改良； ✓理论基础研究。 3、建立无菌材料（茎段）及培养
图示茎段培养过程 一/∥ 去叶片用自来水冲洗 健康植株上选健壮的枝梢 0.1%升汞 Ms洛养基 75%酒精1分钟 再生 培养1%次氯酸钠
图示茎段培养过程 健康植株上选健壮的枝梢 去叶片用自来水冲洗 再生 培养 MS培养基 75%酒精1分钟 1%次氯酸钠 0.1%升汞
4、茎的培养发育方向 腋芽萌发 脱分化后产生胚状体(原球茎离体繁殖 脱分化后直接产生不定器官 脱分化后形成愈伤组织口建立悬浮系或 分化胚状体及 不定芽
4、茎的培养发育方向 ❖腋芽萌发 ❖脱分化后产生胚状体（原球茎） ❖脱分化后直接产生不定器官 离体繁殖 建立悬浮系或 分化胚状体及 不定芽 •脱分化后形成愈伤组织
蝴蝶兰腋芽萌发
蝴蝶兰腋芽萌发
5、影响发育方向的因素 口外植体大小 微形外植体或分生组织易产生愈伤组织 口培养条件 21-25°C,12小时光照/天 口培养基生长调节剂种类和浓度 细胞分裂素和生长素的配比是关键
5、影响发育方向的因素 ❑外植体大小 ❑培养条件 ❑培养基生长调节剂种类和浓度 微形外植体或分生组织易产生愈伤组织 细胞分裂素和生长素的配比是关键。 21-25℃，12小时光照/天
举例:影响月季茎段增殖培养的因素 1.腋芽在茎段上的位置。每段的一个腋芽培养 在无激素的基本培养基上,23天后,接近枝条 最顶端的和紧挨着枝条基部的芽发育最慢,而 枝条中部的芽发育最快。 2.去茎顶端的作用。继代培养接种时切去嫩茎 的顶芽后,再转接于新鲜培养基上培养,促进 嫩茎的增殖。 3.嫩茎长度对形成多芽苗的影响。茎段为1-10 mm长短时,对形成多芽苗最有效,而且每个茎 段的侧枝数也较多,若切割过短(小于1mm或过 长(115mm)都对茎的增殖不利
举例：影响月季茎段增殖培养的因素 1．腋芽在茎段上的位置。每段的一个腋芽培养 在无激素的基本培养基上，23天后，接近枝条 最顶端的和紧挨着枝条基部的芽发育最慢，而 枝条中部的芽发育最快。 2．去茎顶端的作用。继代培养接种时切去嫩茎 的顶芽后，再转接于新鲜培养基上培养，促进 嫩茎的增殖。 3．嫩茎长度对形成多芽苗的影响。茎段为1-10 mm长短时，对形成多芽苗最有效，而且每个茎 段的侧枝数也较多，若切割过短(小于1mm)或过 长(11-15mm)都对茎的增殖不利
植物生长调节剂的影响。 采用适当浓度的植物生长抑制剂三碘苯甲酸可 以促进嫩茎增殖。 6-BA是促进茎增殖最有效的细胞分裂素,浓度 在1-3mg,浓度高会减少茎的伸长,也对下 步生根起抑制作用。 用1mgL6-BA配合1 mg/LNAA,虽然使茎的增 殖略有降低,但可使茎得到伸长。赤霉素抑制 月季茎的增殖
4．植物生长调节剂的影响。 采用适当浓度的植物生长抑制剂三碘苯甲酸可 以促进嫩茎增殖。 6-BA是促进茎增殖最有效的细胞分裂素，浓度 在1-3mg/L，浓度高会减少茎的伸长，也对下一 步生根起抑制作用。 用1 mg/L 6-BA配合1mg/L NAA，虽然使茎的增 殖略有降低，但可使茎得到伸长。赤霉素抑制 月季茎的增殖