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2 第7章 细胞培养
细胞培养内容包括两方面 悬浮培养促进细胞生长和生物合成 单细胞培养促进细胞生长和形成完整植株 口获得单细胞的方法 口悬浮培养 口单细胞培养
3 ❑获得单细胞的方法 ❑悬浮培养 ❑单细胞培养 细胞培养内容包括两方面 悬浮培养 单细胞培养 促进细胞生长和生物合成 促进细胞生长和形成完整植株
植物组织培养探索阶段(1902-1929年) Haberlandt 观点:高等植物的组织 首次进行离体细 小野芝麻和凤眼兰的栅栏 表
4 植物组织培养探索阶段（1902-1929年） Haberlandt： 观点： 首次进行离体细胞培养 高等植物的组织和器官可以分割成单个细胞 小野芝麻和凤眼兰的栅栏细胞和虎眼万年青属表皮细胞
《关于单离植物细胞培养实验》 >我愿意指出:在我的培养实验中,虽然经常 观察到细胞的明显生长,但从未观察到细胞分 裂。发现单细胞培养的条件,将是未来培养试 验的难题。 1.取材问题一高度分化的细胞 2.培养基问题一过于简单,没有诱导成熟细胞 分裂所必须的生长激素
5 《关于单离植物细胞培养实验》 ➢我愿意指出：在我的培养实验中，虽然经常 观察到细胞的明显生长，但从未观察到细胞分 裂。发现单细胞培养的条件，将是未来培养试 验的难题。 1. 取材问题－高度分化的细胞。 2. 培养基问题－过于简单，没有诱导成熟细胞 分裂所必须的生长激素
。单细胞的分离 口由完整的植物器官分离单细胞 口由培养组织中分离单细胞
6 一、单细胞的分离 ❑由完整的植物器官分离单细胞 ❑由培养组织中分离单细胞
1、由完整的植物器官分离单细胞 叶片是分离单细胞的最好材料 机械法 酶解法
7 1、由完整的植物器官分离单细胞 机械法 酶解法 叶片是分离单细胞的最好材料
1-1、机械法 第一种方法:用刀片刮叶片 研究者和时间:Bal& Joshi(1965) Noggle(1967)、 Joshi &Bal(1968) 研究材料:花生成熟叶片
8 1-1、 机械法 Ball&Joshi (1965)、 Noggle (1967)、Joshi &Ball (1968) 研究者和时间： 研究材料： 花生成熟叶片 第一种方法：用刀片刮叶片
撕去下表皮 露日叶肉细胞 细胞
9 具体方法 撕去下表皮 露出叶肉细胞 用解剖刀刮下细胞
第二种方法:叶片研碎、离心 ② 加研磨介质 研碎成粉 过滤、离心
10 第二种方法：叶片研碎、离心 研碎成粉 加研磨介质 过滤、离心