载体必备条件: 1.是一个复制子; 2.载体在受体细胞中能大量繁殖,其携带的外源基因才能在受体细胞中得到大量扩增; 3.有1到几个限制内切酶的单一识别与切割位点,便于外源基因的插入; 4.具有选择性的遗传标记(如抗生素抗性标记等)以此知道它是否已进入受体细胞,并据此标记将受体细胞从其他细胞中分离出来

把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫 载体(Vector).细菌质粒是重组DNA技术中常用的载体。 质粒(Plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子,大小从1-200kb不等,为双链、闭环的DNA分子, 并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中,它具有自主复制 和转录能力能在子代细胞中保持恒定的拷贝数并表达所携带的遗传信息

第一部分 礼记·大学 之概述 第二部分 经典片段 之欣赏 第三部分 立足当下 之反思 第四部分 瞻仰伟人之事迹 第五部分 传统礼仪之风采

实验一 质粒的制备 实验二 DNA的琼脂糖凝胶电泳 实验三 外源DNA片段在质粒载体中的克隆 实验四 感受态细胞的制备 实验五 质粒的转化及转化子的鉴定 实验六 PCR技术

实验一 利用 TSL 从全血中直接制备人类染色体 DNA 实验二 外周血基因组 DNA 的提取 实验三 基因突变分析(PCR-SSCP) 实验四 质粒 DNA 的提取 实验五 DNA 的限制性酶切和琼脂糖凝胶电泳 实验六 DNA 片段的回收与纯化 实验七 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化

实验一质粒的制备 实验二DNA的琼脂糖凝胶电泳 实验三外源DNA片段在质粒载体中的克隆 实验四感受态细胞的制备 实验五质粒的转化及转化子的鉴定 实验六PCR技术

实验一：移液器使用. 4 实验二：质粒DNA的限制性内切酶消化.9 实验三：琼脂糖凝胶电泳检测DNA.11 实验四、五：目的片段的切胶回收与 DNA 重组.14 实验六、七：大肠杆菌感受态细胞的制备及转化.17 实验八：（重组）质粒 DNA 的提取.21 实验九：PCR 基因扩增技术筛选重组子.24 实验十：外源基因在大肠杆菌中的诱导表达和检测.26

实验一 质粒的制备 实验二 DNA 的琼脂糖凝胶电泳 实验三 外源 DNA 片段在质粒载体中的克隆 实验四 感受态细胞的制备 实验五 质粒的转化及转化子的鉴定 实验六 PCR 技术 实验七 植物总 DNA 的快速少量抽提（ CTAB 法） 实验八 总 DNA 质量检测及酶切 实验九 电泳、转膜 实验十 RNA Extraction (mini prep) 实验十一 RT-PCR 实验 附录 试剂配方 一 细菌培养试剂 二 质粒抽提试剂 三 DNA 操作试剂 四 RNA 操作试剂

(1)PCR扩增目的基因红细胞生成因子nap基因部分片段； (2)掌握PCR扩增原理； (3)学习并熟悉PCR操作

第一节：基因组序列的重复及点阵分析 第二节：基因序列的周期性与傅里叶变换 第三节：基因组片段中的保守信号及log图与权重矩阵