第一节 基因组DNA片断化 第二节 化学合成目的基因 第三节 目的基因的保存与文库构建 第四节 目的基因的分离和扩增 第五节 DNA片段的体外连接 第六节 重组体导入细菌细胞 第七节 外源基因导入真核细胞 第一节 载体表型选择法 第二节 根据插入基因的表型选择 第三节 DNA电泳检测法 第四节 核酸杂交检测法 第五节 免疫化学检测法 第六节 转译筛选法 第七节 几种常用的真核生物重组基因选择方法

第十二章基因工程下册P580 12-1基因工程 是对携带遗传信息的分子进行设计和施工的分子工程,包括基因重组、克隆和 表达。核心是构建重组体DNA的技术

一、目的基因( gene of irreresi)的获取 二、目的基因与载体结合成重组DIA 三、重组DNA分子引入受体细胞并表达 四、转化体细胞的扩增、鉴定与筛选

9外源基因表达产物的分离纯化 A重组蛋白分离纯化方法选择的基本原则 B离子交换层析 C凝胶层析 D亲和层析 E膜分离 F原核生物表达的重组蛋白质量检测

第二章 孟德尔定律 第三章 遗传的染色体学说 第四章 基因的作用及其与环境的关系 第五章 性别决定与伴性遗传 第六章 染色体和连锁群 第七章 细菌和噬菌体的重组和连锁 第八章 数量性状遗传 第九章 遗传物质的改变（一）染色体畸变 第十章 遗传物质的改变（二）基因突变 第十一章 遗传的分子基础 第十二章 突变和重组机理 第十三章 细胞质和遗传 第十四章 遗传与个体发育 第十五章 遗传和进化

(一)基因工程的概念 1.遗传工程广义;细胞工程-体细胞、原生质体的培养与杂交细器---细胞核的移植:回交,克隆羊染色体----条染色体或染色体片断的切割或转移基因工程狭义:基因工程:体外不经过有性繁殖,有目的地使DNA发生重组的技术体系。故又称重组DNA技术

把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫 载体(Vector).细菌质粒是重组DNA技术中常用的载体。 质粒(Plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子,大小从1-200kb不等,为双链、闭环的DNA分子, 并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中,它具有自主复制 和转录能力能在子代细胞中保持恒定的拷贝数并表达所携带的遗传信息

实验一 质粒DNA的小量提取 实验二 质粒DNA的酶切和电泳鉴定 实验三 重组DNA分子的构建 实验四 重组子的检测及限制性酶切鉴定 实验五 大肠杆菌感受态细胞的制备 实验六 质粒DNA分子导入原核细胞 实验七 聚合酶链式反应（PCR）扩增DNA片断 实验八 植物基因组DNA的提取 实验十 植物总RNA的提取及其电泳鉴定

实验一 植物基因组DNA的提取及其定性定量分析 实验二 PCR扩增目的片段和胶回收 实验三 目的片段和载体的连接 实验四 大肠杆菌感受态细胞的制备和转化效率检测 实验五 重组质粒的转化 实验六 重组质粒DNA的提取及酶切鉴定

9.DNA包装成染色体大约压缩了7倍,请说明计算 的依据。 答:依据是:一个核小体的直经是10nm,由200个 碱基对的DNA组成,每个碱基对长度为0.34nm, 一个核小体伸展开来的长度是70nm,因此,DNA 包装成核小体,大约压缩了7倍