本课程共计32学时;共分为7章,授课时间是1-11周。讲 课內容包括:第一章绪论2学时;第二章酶的分类与命名2 学时,重点国际系统分类法;第三章酶的生产4学时重点 产酶菌的培养,酶的模拟;第四章酶的分离纯化与制备8学时 重点酶的纯化;第五章固定化酶6学时重点固定化酶的制 备;第六章酶分析6学时重点酶活力测定酶法分析;第七 章酶的生物学4学时重点酶在生物体内的功能

第一节 酶类药物的原料来源 第二节 酶类药物的提取和纯化 第三节 酶类药物

以蛋白质分离纯化为例介绍生物大分子分离纯化的一般步骤和注意事项；介绍层析技术、电泳技术、离心技术的原理及其应用；总结蛋白质、核酸、酶、氨基酸测定的主要方法

主要内容和要求:以蛋白质分离纯化为例 介绍生物大分子分离纯化的一般步骤和注意事 项;介绍层析技术、电泳技术、离心技术的原 理及其应用;总结蛋白质、核酸、酶、氨基酸 测定的主要方法

酶的概念及其化学性质 酶的作用特点 酶的组成与分类 酶的国际分类与命名 酶的作用机理 酶活力及其测定 影响酶促反应速度的因素 酶活性的调节控制与调节酶 维生素与辅酶 酶的分离纯化 酶工程简介

细胞产生的酶有二类: 1.由细胞内产生后分泌到胞外发挥作用的酶,称为细胞外 酶。这类酶大部分属于水解酶。此类酶通常含量高,容易 得到。 2.在细胞内合成后并不分泌到细胞外,而在细胞内起催化 作用,称为细胞内酶,该类酶在细胞内往往与细胞器结合, 不仅有一定的区域性,而且催化的反应具有一定顺序性

第一章 生物化学部分.1 实验一、双缩脲法测定血清蛋白质含量. 1 实验二、纸层析法观察转氨基作用. 2 实验三、血清醋酸纤维薄膜电泳. 4 实验四、血清丙氨酸氨基转移酶活性测定. 7 实验五、胰酶对蛋白质的消化和影响酶作用的因素. 10 实验六、酶的竞争性抑制作用. 13 实验七、血糖浓度的测定. 16 实验八、血清γ球蛋白的分离纯化与鉴定. 18 第二章 分子生物学部分.25 实验一、质粒 DNA 的提取制备与检测. 25 实验二、PCR 技术. 28 实验三、DNA 的限制性酶切与电泳. 31 实验四、DNA 连接实验. 38 实验五、重组 DNA 转化与篮白斑筛选. 41 实验六、SDS-PAGE 测定蛋白质的相对分子量. 44

生化大实验是一门综合性的实验课程，教学的目的在于通过对生命物质的分离制备，纯化，分析等综合性实验，在已掌握的基础生物化学理论知识和生化实验常用方法的基本原理、基本操作技术（如滴定、比色、层析、电泳等）的基础上，训练学生的综合实践动手能力，掌握蛋白质、酶、核酸等重要物质的分离、纯化等的测定技术。实验一蛋白质含量的测定实验二离子交换法血清纯化IgG实验三离子交换层析法分离血清白蛋白实验四SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定分子量实验五等电聚焦法测定样品的等电点实验六质粒的分离与纯化实验七PCR扩增目的基因片段实验八酶联免疫吸附实验

Ⅰ、酶的导论 一、酶的感念 二、酶催化作用的特点 三、酶的化学本质及组成 四、酶的命名与分类 五、酶的活性中心 六、酶活性 Ⅱ 、酶促动力学 Ⅲ、酶学发展及动向 分离纯化 酶学发展方向 Ⅳ 、辅酶与水溶性维生素

第十五章酶类药物 第一节酶类药物的原料来源 一、原料选择 (1)不同酶的用料选择 乙酰化酶(鸽肝)、凝血酶(牛血)、透明质酸酶(羊睾丸) 二、溶菌酶(鸡蛋清),超氧化物歧化酶(血、肝) (2)注意不同生长发育情况及营养状况 (3)原料来源丰富 (4)从简化提纯步骤着手 (5)如用动物组织作原料,应在此动物宰杀后立即取材