复习 色谱法(Chromatography)亦称色层法、层 析法等。色谱法是分高、纯化和鉴定有机化合物的 重要方法之一。 色谱法的原理 色谱法的基本原理是利用混合物各组分在某一 物质中的吸附或溶解性能（分配）的不同，或其亲 和性的差异，使混合物的溶液流经该种物质进行反 复的吸附或分配作用，从而使各组分分离
复习 色谱法的原理
1.按固定相所处的状态分类： 薄层色谱(Thin Layer Chromatography) 柱色谱 (Column Chromatography) 纸色谱 (Paper Chromatography) 2. 按分腐机理分类： 吸附色谱(Adsorption Chromatography) 分配色谱(Partition Chromatography) 离子交换色谱(IEC) 疑胶色谱(GPC) 液相色谱 气相色谱 仪器分析实验
液相色谱 气相色谱 仪器分析实验
●定义： ●平面液相色谱法(plane chromatography)是 以液体为流动相（展开剂），在平面上进行分离 的一种色谱方法. ●分类：主要包括薄层色谱法、纸色谱法和薄 层电泳法
⚫定义： ⚫平面液相色谱法(plane chromatography)是 以液体为流动相(展开剂)，在平面上进行分离 的一种色谱方法. ⚫分类:主要包括薄层色谱法、纸色谱法和薄 层电泳法
保留参数 一一一一一一一一一。溶剂前沿 2 5 6 ●比移值R(retardation factor;Rf)是某一组分移动距离与展开剂 移动距离之比，是平面色谱的基本定性能数。 R,=原点到组分斑点质量心的距离 L 原点到溶剂前沿的距离 Lo R范围： 0<Rf<1 R=0.2~0.8(常用) R=0.30.5(最佳)
保留参数 ⚫比移值Rf (retardation factor；Rf )是某一组分移动距离与展开剂 移动距离之比，是平面色谱的基本定性能数。 L0 L R f = = 原 点 到 溶 剂 前 沿 的 距 离 原 点 到 组 分 斑 点 质 量 中心 的 距 离 Rf范围： 0< Rf <1 Rf = 0.2~0.8（常用） Rf = 0.3~0.5（最佳）
保留参数 ●相对比移值：是指被分离组分与所选参比物的比移值之比。 原点到组分斑点质量中心的距离 R、 R() R(参】 原点到参考物斑点质量中心的距离L? 讨论 ,参考物与被测组分在完全相同条件下展开。可以消除系统误差，大 大提高重现性和可靠性； ,参考物可以是后加入纯物质，也可是样品中已知组分 相对比移值R与组分、参考物性质及色谱条件有关，范围可以大于 或小于1
保留参数 ⚫相对比移值：是指被分离组分与所选参比物的比移值之比。 2 1 L L R R R f f s = = = 原点到参考物斑点质量中心的距离 原点到组分斑点质量中心的距离 （参） （组） ✓讨论 •参考物与被测组分在完全相同条件下展开。可以消除系统误差，大 大提高重现性和可靠性； •参考物可以是后加入纯物质，也可是样品中已知组分 •相对比移值Rs与组分、参考物性质及色谱条件有关，范围可以大于 或小于1
薄层色谱分离效能参数 1、理论塔板数n=16(L/W)2 ●L:原点到斑，点中心的距离；W:组分斑点的纵 向宽度 2、塔板高度H=L/n L0:原点到展开剂前沿的距离. ●n越大，H越小
薄层色谱分离效能参数 1、理论塔板数 n=16(L/W)2 ⚫L:原点到斑点中心的距离； W：组分斑点的纵 向宽度 2、塔板高度 H=L0 /n L0：原点到展开剂前沿的距离. ⚫ n越大，H越小
●容量因子为组分在固定相的保留时间与在展开剂中的保留时间之比。 容量因子与比移值的关系 Rj= 1+k (1)R与K有关，即与组分性质（溶解度）以及薄层板 和展开剂的性质有关，K↑大，R小 (2)薄层板一定，R只与组分性质有关，对于极性组分， 展开剂极性↑大，R↑大（容易洗脱） 展开剂极性小，R↓小（不容易洗脱） (3)R=1K或k=0 组分在前沿；R=0K或k=o0组分在原点
容量因子与比移值的关系 k Rf + = 1 1 ⑴ Rf与K有关，即与组分性质（溶解度）以及薄层板 和展开剂的性质有关，K↑大，Rf ↓小 ⑵薄层板一定，Rf只与组分性质有关，对于极性组分， 展开剂极性↑大，Rf ↑大（容易洗脱） 展开剂极性↓小，Rf ↓小 （不容易洗脱） ⑶Rf ＝1 K或k=0 组分在前沿； Rf ＝0 K或k=∞ 组分在原点 ⚫容量因子为组分在固定相的保留时间与在展开剂中的保留时间之比
分离评价参数 1分离度(resolution;R):两相邻斑 点中心的距离与两斑点平均宽度的 比值 Wi W> R=2(L2-L1)/W+W2) W> =2d/W1+W2) L1、L2:分别为原点至两半斑点中 图18-2平面色谱分离度示意图 心的距离，W1、W2斑点的宽度
分离评价参数 1 分离度(resolution; R)：两相邻斑 点中心的距离与两斑点平均宽度的 比值 R=2(L2 -L1 )/(W1+W2 ) =2d/(W1+W2 ) •L1 、L2 :分别为原点至两半斑点中 心的距离， W1、W2斑点的宽度
2.分离数(separation number;SN) ●定义：相邻斑，点分离度为1.177时，在R=0(原点) 到R=1(溶剂前沿)之间能容纳的色谱斑点数。 ●一般薄层板的分离数为7~10，高效薄层板可达 1020。 ●SN是衡量分离容量的重要参数
2.分离数(separation number; SN) ⚫定义：相邻斑点分离度为1.177时，在Rf=0(原点) 到Rf=1(溶剂前沿)之间能容纳的色谱斑点数。 ⚫一般薄层板的分离数为 7~10，高效薄层板可达 10~20。 ⚫SN是衡量分离容量的重要参数
薄层色谱 点 ●薄层色谱法(thin layer chromatography;TLC): 将固定相均匀涂布在表面光滑的平板上，形成薄层 而进行色谱分离和分析的方法. ●特点：分离能力强、灵敏度高、展开时间较短、显 色方便。 ●分离机理：吸附、分配、离子交换、空间排阻
⚫薄层色谱法(thin layer chromatography；TLC): 将固定相均匀涂布在表面光滑的平板上，形成薄层 而进行色谱分离和分析的方法. ⚫特点:分离能力强、灵敏度高、展开时间较短、显 色方便。 ⚫分离机理:吸附、分配、离子交换、空间排阻. 薄层色谱