山东理工大学材料科学与工程学院 平面液相色谱法 2.1概述 第二章 2.2薄层色谱 2.3其它特殊薄层色谱 薄层 色谱法 2.4纸层析分离技术
山东理工大学材料科学与工程学院 平面液相色谱法 第二章 薄层 色谱法 2.1 概述 2.2 薄层色谱 2.3 其它特殊薄层色谱 2.4 纸层析分离技术
2.1概述 ●定义：平面液相色谱法(plane chromatography)是 以液体为流动相（展开剂），在平面上进行分离的一种 色谱方法. ●分类：主要包括薄层色谱法、纸色谱法和薄层电泳 法
2.1 概述 ⚫定义：平面液相色谱法(plane chromatography)是 以液体为流动相(展开剂)，在平面上进行分离的一种 色谱方法. ⚫分类:主要包括薄层色谱法、纸色谱法和薄层电泳 法
薄层色谱 ●薄层色谱是在被洗涤干净的玻板(10×3cm左右) 上均匀的涂一层吸附剂或支持剂，待干燥、活化后 将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一 端约1cm处的起点线上，凉千或吹干后置薄层板于盛 有展开剂的展开槽内，浸入深度为0.5cm。待展开剂 前沿离顶端约1cm附近时，将色谱板取出，干燥后喷 以显色剂，或在紫外灯下显色
薄层色谱 ⚫薄层色谱是在被洗涤干净的玻板（10×3 cm左右） 上均匀的涂一层吸附剂或支持剂，待干燥、活化后 将样品溶液用管口平整的毛细管滴加于离薄层板一 端约1cm处的起点线上，凉干或吹干后置薄层板于盛 有展开剂的展开槽内，浸入深度为0.5 cm。待展开剂 前沿离顶端约1cm附近时，将色谱板取出，干燥后喷 以显色剂，或在紫外灯下显色
纸色谱 。纸色谱分离法又称纸层析法，是根据不同物质在两 相中的分配比不同而进行分离的一种微量分离方法。 •载体一层析纸（滤纸)； ·固定相—一组成滤纸的纤维素分子具有很多亲水性羟基，当 纤维素上的羟基与水结合后便形成了液液分配色谱的固定. ·流动相一有机溶剂（展开剂)
纸色谱 ⚫纸色谱分离法又称纸层析法，是根据不同物质在两 相中的分配比不同而进行分离的一种微量分离方法。 •载体——层析纸（滤纸）； •固定相——组成滤纸的纤维素分子具有很多亲水性羟基,当 纤维素上的羟基与水结合后便形成了液液分配色谱的固定. •流动相——有机溶剂（展开剂）
薄层电泳 ●薄层电泳是将点有样品的惰性支持介质置于电场中， 不同组分所带电荷和体积不同，受到的电场力和磨擦 阻力也不同，因此在相同电场强度下，不同组分的运行 状况不同，从而达到分离的目的
薄层电泳 ⚫薄层电泳是将点有样品的惰性支持介质置于电场中, 不同组分所带电荷和体积不同,受到的电场力和磨擦 阻力也不同,因此在相同电场强度下,不同组分的运行 状况不同,从而达到分离的目的
2.2薄层色谱 ●薄层色谱法(thin layer chromatography;TLC): 将固定相均匀涂布在表面光滑的平板上，形成薄层而进行 色谱分离和分析的方法 ●特点：分离能力强、灵敏度高、展开时间较短、显色方便。 ●分离机理：吸附、分配、离子交换、空间排阻
2.2 薄层色谱 ⚫薄层色谱法(thin layer chromatography；TLC): 将固定相均匀涂布在表面光滑的平板上，形成薄层而进行 色谱分离和分析的方法. ⚫特点:分离能力强、灵敏度高、展开时间较短、显色方便。 ⚫分离机理:吸附 、分配、离子交换、空间排阻
150 M 100 ●考虑一下：薄层色谱与普通液相色谱的区别？ a适道65a 生物类成升 70 40 200 07
⚫考虑一下:薄层色谱与普通液相色谱的区别?
薄层色谱与液相色谱法比较 HPLC TLC 每次只能分析一个样品 在一块板上点上多个样品同 时进行分离 对样品制备要求高，必须不 用后一次弃去，可直接用样 含可吸留在柱上的杂质，否 品的粗提物点样 则柱性能受损 可用检测器种类较少 展开后可用多种手段检测
薄层色谱与液相色谱法比较 HPLC TLC 每次只能分析一个样品 在一块板上点上多个样品同 时进行分离 对样品制备要求高，必须不 含可吸留在柱上的杂质，否 则柱性能受损 用后一次弃去，可直接用样 品的粗提物点样 可用检测器种类较少 展开后可用多种手段检测
(一)吸附薄层色谱 固定相为吸附剂的薄层色谱。利用吸附剂对不同组分的吸附能 力差鼻而实现分离经过吸附、解吸、再吸附、再解吸.最后 g人但入支亿土D估山丝h温亿山D土 丝h丛 ·正相色谱：水为固定相（硅胶载体），有机溶剂为流动相。 极性强的组分K大，R值小。 反相色谱：烷基化学键合相为固定相，水一有机溶剂为流动 相。极性强的组分K小，R值大。 固足相与流动相中的分配系效不同而被分离。吊用的是及相溥 层色谱法，固定相是烷基化学键合相，展开剂是水及与水相溶 的有机溶剂
（一）吸附薄层色谱 固定相为吸附剂的薄层色谱。利用吸附剂对不同组分的吸附能 力差异而实现分离.经过吸附、解吸、再吸附、再解吸.最后 混合物得到分离.K大，Rf值小，移动慢；K小，Rf大，移动快。 （二）分配薄层色谱 固定相为液体，吸留在载体上的薄层色谱。利用被分离组分在 固定相与流动相中的分配系数不同而被分离。常用的是反相薄 层色谱法，固定相是烷基化学键合相，展开剂是水及与水相溶 的有机溶剂。 • 正相色谱：水为固定相（硅胶载体），有机溶剂为流动相。 极性强的组分K大， Rf值小。 • 反相色谱：烷基化学键合相为固定相，水－有机溶剂为流动 相。极性强的组分K小， Rf值大
2.2.3平面液相色谱的技术参数 1.展开剂动力学参数y 在色谱过程中，展开剂前沿移动的速度是一个变数.当展开 器中吸附剂、展开剂、蒸汽相达到平衡时，展开剂前沿 在薄层上的移动速率为： v=k/2L ●k为展开剂速率常数，反映了展开剂在薄层中迁移的动力学特征。 ●L为展开剂前沿在时间内移动的距离
2.2.3 平面液相色谱的技术参数 1. 展开剂动力学参数v 在色谱过程中,展开剂前沿移动的速度是一个变数.当展开 器中吸附剂、展开剂、蒸汽相达到平衡时，展开剂前沿 在薄层上的移动速率为： v=k/2L ⚫k为展开剂速率常数，反映了展开剂在薄层中迁移的动力学特征。 ⚫L为展开剂前沿在时间t内移动的距离