微生物实验实验一显微镜的使用及微生物形态观察实验二活性污泥生物相及藻类形态观察实验三微生物的染色实验四微生物细胞数的计数实验五活性污泥不同微生物种群的分离培养与鉴别
微生物实验 ◼ 实验一 显微镜的使用及微生物形态观察 ◼ 实验二 活性污泥生物相及藻类形态观察 ◼ 实验三 微生物的染色 ◼ 实验四 微生物细胞数的计数 ◼ 实验五 活性污泥不同微生物种群的分离培 养与鉴别
实验一显微镜的使用及微生物形态观察一. 目的1．了解普通光学显微镜的构造，学习显微镜的使用方法和保养。（高、低倍镜的使用）2.观察蓝细菌、霉菌、酵母菌、放线菌的个体形态，学会生物图的绘制。二.实验器材1.光学显微镜2.示范片：颤藻、曲霉、青霉、酵母菌、放线菌。1-1
1-1 实验一 显微镜的使用及微生物形态观察 一. 目的 1. 了解普通光学显微镜的构造，学习显微 镜的使用方法和保养。（高、低倍镜的使用） 2. 观察蓝细菌、霉菌、酵母菌、放线菌的 个体形态，学会生物图的绘制。 二. 实验器材 1. 光学显微镜 2. 示范片：颤藻、曲霉、青霉、酵母菌、 放线菌
实验内容三.显微镜的构造和使用方法11. 构造机械部分：镜筒（双筒，两筒间距离可调，上装有目镜）转换器（3孔，装有物镜）载物台（中央圆孔、弹簧夹、移动器）调节器（粗调、细调）镜臂（支撑作用）镜座（上有光源，亮度可调）光学部分：目镜(10×、16×）物镜（低倍镜10×、高倍镜40×、油镜100×）聚光器（内有光圈调节）光源（光量可调）1-2
1-2 三. 实验内容 (一) 显微镜的构造和使用方法 1. 构造 机械部分: 镜筒(双筒，两筒间距离可调，上装有目镜） 转换器（3孔，装有物镜） 载物台（中央圆孔、弹簧夹、移动器） 调节器（粗调、细调） 镜臂（支撑作用） 镜座（上有光源，亮度可调） 光学部分：目镜（10×、16×） 物镜（低倍镜10×、高倍镜40×、油镜100×） 聚光器（内有光圈调节） 光源（光量可调）
显微镜放大倍数=目镜放大倍数×物镜放大倍数物镜上的标识：100(40、10)160/0.171.25 (0.65、0.25)工十数值孔径放大倍数镜筒长盖玻片厚度数值孔径：N. A. =n.sinα/2n一玻片和物镜之间的折射率α一光线最大射入角。分辨率（最大可分辨距离）一/N.A.入一波长1-3
1-3 显微镜放大倍数 = 目镜放大倍数 × 物镜放大倍数 物镜上的标识： 1 .25 (0.65、0.25) 100(40、10） 160 / 0.17 ↓ ↓ ↓ ↓ 数值孔径 放大倍数 镜筒长 盖玻片厚度 数值孔径： N.A. = n﹒s i n α/ 2 n — 玻片和物镜之间的折射率。 α— 光线最大射入角。 分辨率（最大可分辨距离）＝λ/ N.A. λ—波长
2．显微镜的使用低倍镜的使用（1）双手取出显微镜置于实验台上，接上电源，打开开关，调节合适光量。（2）转动转换器，将低倍镜移至正下方。调节两目镜镜筒间的距离。（3）将载玻片放在载物台上夹住，移动观察对象于圆孔正中。（4）侧视物镜，转动粗调将载物台上移，至载玻片距物镜头约5mm时停止。（5）双眼向自镜里观察，同时旋转粗调节器使载物台缓慢下移，若标本显出但不清晰，可用细调节器调至清晰。若粗调旋转太快，超过焦点没有看到标本，则必须重复（4）、(5)步骤。不能在眼晴观察目镜的同时旋转粗调，以防物镜与载玻片相碰撞，造成损坏。-2
1-4 2. 显微镜的使用 低倍镜的使用 （1）双手取出显微镜置于实验台上，接上电源，打开开 关，调节合适光量。 （2）转动转换器，将低倍镜移至正下方。调节两目镜镜 筒间的距离。 （3）将载玻片放在载物台上夹住，移动观察对象于圆孔 正中。 （4）侧视物镜，转动粗调将载物台上移，至载玻片距物 镜头约５ｍｍ时停止。 （5）双眼向目镜里观察，同时旋转粗调节器使载物台缓 慢下移，若标本显出但不清晰，可用细调节器调至清晰。若 粗调旋转太快，超过焦点没有看到标本，则必须重复（4）、 (5)步骤。不能在眼睛观察目镜的同时旋转粗调，以防物镜与 载玻片相碰撞，造成损坏
高倍镜的使用在用低倍镜找到观察目标后，若需要进一步放大观察将其移到视野中央。用转换器将高倍镜移到镜筒下方，将光量调大一点。若标本不清晰，用细调上下转动使之清晰。（此时不再动粗调）3．显微镜的维护（1）将载物台降至最低，取下标本片。(2）将光量调至最小，关上电源。(3））用镜头纸先擦目镜、物镜，再擦显微镜其它部分。将显微镜放入镜箱，还原。（4））1-5
1-5 高倍镜的使用 在用低倍镜找到观察目标后，若需要进一步放大观察， 将其移到视野中央。用转换器将高倍镜移到镜筒下方，将光 量调大一点。若标本不清晰，用细调上下转动使之清晰。 （此时不再动粗调） ３．显微镜的维护 （１）将载物台降至最低，取下标本片。 （２）将光量调至最小，关上电源。 （３）用镜头纸先檫目镜、物镜，再擦显微镜其它部分。 （４）将显微镜放入镜箱，还原
(二)微生物形态的观察1.用低倍镜和高倍镜观察颤藻曲霉、青霉、酵母菌、放线菌、星藻示范片。2.画出微生物形态图，并标明10 ×10显微镜的放大倍数颤藻1-6
1-6 （二）微生物形态的观察 1. 用低倍镜和高倍镜观察颤藻、 曲霉、青霉、酵母菌、放线菌、 星藻示范片。 2. 画出微生物形态图，并标明 显微镜的放大倍数。 10 ╳ 10 颤藻
实验二活性污泥生物相的观察一.目的1.学习测量微生物大小2.学习用压滴法制作标本片。3.观察几种原、后生动物，菌胶团形态二.实验器材1.活性污泥混合液。2.显微镜、载玻片、盖玻片。3.自测微尺、物测微尺2-1
2-1 实验二 活性污泥生物相的观察 一. 目的 1. 学习测量微生物大小。 2. 学习用压滴法制作标本片。 3. 观察几种原、后生动物，菌胶团形态。 二. 实验器材 1. 活性污泥混合液。 2. 显微镜、载玻片、盖玻片。 3. 目测微尺、物测微尺
三.实验内容1.微生物大小的测定标定目镜测微尺(1）本装在目镜上的目测微尺中央刻有等分为100格或更多格的标尺，使用前要用物测微尺标定。物测微尺中央刻有1mm长的标尺，等分为100格，10μm／格。将物测微尺的刻度朝上放在载物台上，用低倍镜找出物测微尺的刻度，移动物测微尺使其第一条线与目测微尺的第一条线重合，顺着刻度线找出另一条重合线。算出低倍镜下目测微尺每格的长度。换高倍镜用同样方法标定出高倍镜下目测微尺每格的长度。2-2
2-2 三. 实验内容 1. 微生物大小的测定 (1) 标定目镜测微尺 装在目镜上的目测微尺中央刻有等分为100格 或更多格的标尺，使用前要用物测微尺标定。物测 微尺中央刻有1mm长的标尺，等分为100格，10μm ／格。将物测微尺的刻度朝上放在载物台上，用低 倍镜找出物测微尺的刻度，移动物测微尺使其第一 条线与目测微尺的第一条线重合，顺着刻度线找出 另一条重合线。算出低倍镜下目测微尺每格的长度。 换高倍镜用同样方法标定出高倍镜下目测微尺每格 的长度
测微尺示意图镜台测微尺及其中央部分的放大校正目镜测微尺loeie目镜测微尺(2)微生物大小的测量将物测微尺取下，换上标本片，选择适当物镜测量微生物的长度和宽度占目测微尺的格数，再按目测微尺1小格的长度换算出微生物的长度和宽度。2-3
2-3 测 微 尺 示 意 图 (2) 微生物大小的测量 将物测微尺取下，换上标本片，选择适当物 镜测量微生物的长度和宽度占目测微尺的格数，再 按目测微尺1小格的长度换算出微生物的长度和宽 度