武汉理工大学：《水处理生物学》课程教学实验指导书（共五个实验）.doc_大学文库

实验一显微镜的使用及微生物形态的观察一、目的1.了解普通光学显微镜的构造，学习显微镜的使用方法和保养方法。2.观察蓝细菌、霉菌、酵母菌、放线菌的个体形态，学会生物图的绘制。二，实验器材1.光学显微镜2.示范片：颤藻、曲霉、青霉、酵母菌、放线菌。三，实验方法(一)显微镜的结构和各部分的作用图1是微生物实验常用的双目电光源生物显微镜，其构造分机械和光学两部分：机械部分主要包括：接目镜1.镜筒镜筒是双筒，两筒间距离可镜筒调，长度一般是160mm。它的上端装有接目镜，下端有回转板。回转板上一般装有回转板接物镜3个接物镜。戴物台2.载物台载物台是放置标本的平台，中央有一圆孔，使下面的光线可以通过。推物器调节器两旁有弹簧夹，用以固定标本或载玻片。有的载物台上装有自动推物器。O3.调节器镜臂旁有两个螺旋，大的聚光器T叫粗调节器，小的叫细调节器，用以升降光源载物台，调节接物镜与所需观察的物体之L间的距离。光量调节L开关图1 光学部分主要包括：1.接目镜一股使用的显微镜具有2~3种放大倍数的接目镜，其上常刻有“5×”、“10×”或“16×”等数字及符号。意即使用时可放大5倍、10倍或16倍。观察微生物时常用放大10倍或16倍的接目镜。2.接物镜接物镜装在回转板上．可分低倍镜、高倍镜和油镜3种，其相应的放大倍数常是10、40（45)、100。通常显微镜的放大倍数等于接物镜与接目镜放大倍数的乘积。例如：用放大40倍的接物镜（高倍镜）与放大10倍的接目镜时所得的物象的放大倍数为40×10=400。如果用放大100倍的接物镜则放大倍数为100×10一1000。接目镜装在镜筒上端，在使用过程中并不经常变动，所以通常所谓的用低倍镜、高倍镜或油镜的观察主要是指使用不同的接物镜而言的。油镜的放大倍数最大（100)。放大倍数这样大的镜头，焦距就很短.直径就很小。所以自标本玻片透过的光线，因介质密度（从玻片至空气，再进入油镜）不同、有些光线因折射或全反射，就不能进入镜头，致使射入的光线较少，物象显现不清。所1

1 实验一显微镜的使用及微生物形态的观察一、目的 1.了解普通光学显微镜的构造，学习显微镜的使用方法和保养方法。 2.观察蓝细菌、霉菌、酵母菌、放线菌的个体形态，学会生物图的绘制。二. 实验器材 1.光学显微镜 2.示范片：颤藻、曲霉、青霉、酵母菌、放线菌。三. 实验方法 (一)显微镜的结构和各部分的作用图 1 是微生物实验常用的双目电光源生物显微镜，其构造分机械和光学两部分：机械部分主要包括： 1．镜筒镜筒是双筒，两筒间距离可调，长度一般是 160mm。它的上端装有接目镜，下端有回转板。回转板上一般装有 3 个接物镜。 2．载物台载物台是放置标本的平台，中央有一圆孔，使下面的光线可以通过。两旁有弹簧夹，用以固定标本或载玻片。有的载物台上装有自动推物器。 3．调节器镜臂旁有两个螺旋，大的叫粗调节器，小的叫细调节器，用以升降载物台，调节接物镜与所需观察的物体之间的距离。光学部分主要包括： 1．接目镜一股使用的显微镜具有 2~3 种放大倍数的接目镜，其上常刻有“5×”、“10×”或“16×”等数字及符号。意即使用时可放大 5 倍、10 倍或 16 倍。观察微生物时常用放大 10 倍或 16 倍的接目镜。 2．接物镜接物镜装在回转板上．可分低倍镜、高倍镜和油镜 3 种，其相应的放大倍数常是 10、40 (45)、100。通常显微镜的放大倍数等于接物镜与接目镜放大倍数的乘积。例如：用放大 40 倍的接物镜(高倍镜)与放大 10 倍的接目镜时所得的物象的放大倍数为 40×10＝400。如果用放大 100 倍的接物镜则放大倍数为 100×10 ＝1000。接目镜装在镜筒上端，在使用过程中并不经常变动，所以通常所谓的用低倍镜、高倍镜或油镜的观察主要是指使用不同的接物镜而言的。油镜的放大倍数最大(100)。放大倍数这样大的镜头，焦距就很短．直径就很小。所以自标本玻片透过的光线，因介质密度(从玻片至空气，再进入油镜)不同、有些光线因折射或全反射，就不能进入镜头，致使射入的光线较少，物象显现不清。所镜筒回转板接物镜接目镜载物台调节器推物器图 1 聚光器光源开关光量调节

以为了不使通过的光线有所损失，须在油镜与玻片中间加入和玻璃折射率（M=1.52)相仿的镜油（香柏油M=1.515)。因为这种接物镜使用时须加镜油，所以我们称它为油镜。一般的低倍镜或高倍镜使用时不加油，所以也称之为干镜。3.聚光器聚光器在载物台的下面，用来集合由光源过来的光线。聚光器可以上下调整，中央装有光圈。用以调节光线的强弱。当光线过强时：应图2油镜加镜油的原理缩小光圈或把聚光器向下移动。1--空气：2玻片，3一油镜透镜4.光源光源装在显微镜的最下方，带有开1一镜油关，其光亮也可调节。(二）显微镜使用和保护的方法1．低倍镜的使用法(1)置显微镜于固定的桌几上，接上电源，打开开关，调节合适光量。(2)拨动回转板，把低倍镜移到镜筒正下方，和镜筒连接而对直。（3）两眼向接目镜里观察，同时调节两目镜镜筒间的距离，使两接目镜中的视野重合。（4)把载玻片放到载物台上，要观察的标本放到园孔的正中央。(5)将粗调节器向上旋转，同时眼睛注视接物镜，以防接物镜和载玻片相碰。镜头的尖端距载玻片约5mm时即停止旋转。（6）两眼向接目镜里观察，同时把粗调节器向下缓慢旋转。如标本显出，但不十分清楚，可用细调节器调节，至标本完全清晰为止。（7)假如因旋转粗调节器太快，致使超过焦点，标本不能出现时，不应在眼睛注视接目镜的同时向上旋转粗调节器，必须从第（5)步作起，以防因没有把握的旋转，使接物镜与载玻片碰触，造成损坏。(8)在观察时，两眼都要同时静开。2.高倍镜的使用法（1)使用高倍镜以前，先用低倍镜检查，在用低倍镜找到观察目标后，若需要进一步放大观察，将目标移到视野中央。(2)拨动回转板使高倍和低倍两镜头互相对换。当高倍镜移动到载玻片上方时，往往镜头十分靠近载玻片。这时必须注意是否因高倍镜靠近的缘故而使载破片也随着移动。如果载玻片有移动的现象，则应立刻停止推动回转板。把高倍镜退回原处再按照使用低倍镜的方法，重新校正标本的位置。用转换器将高倍镜移到镜筒下方将光量调大一点。（3)当高倍镜已被推到镜筒下面时，向镜内观察所显现的标本，往往不很清楚，这时可旋转细调节器使之清晰，上下移动，但不要过分移动。（此时不再动粗调）3.油镜的使用法(此节在实验三中学习)（1）如用高倍镜放大，倍数还不够大则须采用油镜。用油镜以前，先用低、高倍2

2 以为了不使通过的光线有所损失，须在油镜与玻片中间加入和玻璃折射率(M＝1.52)相仿的镜油(香柏油 M＝1.5l5)。因为这种接物镜使用时须加镜油，所以我们称它为油镜。一般的低倍镜或高倍镜使用时不加油，所以也称之为干镜。 3．聚光器聚光器在载物台的下面，用来集合由光源过来的光线。聚光器可以上下调整，中央装有光圈。用以调节光线的强弱。当光线过强时．应缩小光圈或把聚光器向下移动。 4．光源光源装在显微镜的最下方，带有开关，其光亮也可调节。 (二)显微镜使用和保护的方法 1．低倍镜的使用法 (1)置显微镜于固定的桌几上，接上电源，打开开关，调节合适光量。 (2)拨动回转板，把低倍镜移到镜筒正下方，和镜筒连接而对直。 (3) 两眼向接目镜里观察，同时调节两目镜镜筒间的距离，使两接目镜中的视野重合。 (4)把载玻片放到载物台上，要观察的标本放到园孔的正中央。 (5)将粗调节器向上旋转，同时眼睛注视接物镜，以防接物镜和载玻片相碰。镜头的尖端距载玻片约 5mm 时即停止旋转。 (6) 两眼向接目镜里观察，同时把粗调节器向下缓慢旋转。如标本显出，但不十分清楚，可用细调节器调节，至标本完全清晰为止。 (7)假如因旋转粗调节器太快，致使超过焦点，标本不能出现时，不应在眼睛注视接目镜的同时向上旋转粗调节器，必须从第(5)步作起，以防因没有把握的旋转，使接物镜与载玻片碰触，造成损坏。 (8)在观察时，两眼都要同时睁开。 2．高倍镜的使用法 (1)使用高倍镜以前，先用低倍镜检查，在用低倍镜找到观察目标后，若需要进一步放大观察，将目标移到视野中央。 (2)拨动回转板使高倍和低倍两镜头互相对换。当高倍镜移动到载玻片上方时，往往镜头十分靠近载玻片。这时必须注意是否因高倍镜靠近的缘故而使载破片也随着移动。如果载玻片有移动的现象，则应立刻停止推动回转板。把高倍镜退回原处，再按照使用低倍镜的方法，重新校正标本的位置。用转换器将高倍镜移到镜筒下方，将光量调大一点。 (3)当高倍镜已被推到镜筒下面时，向镜内观察所显现的标本，往往不很清楚，这时可旋转细调节器使之清晰，上下移动，但不要过分移动。（此时不再动粗调） 3．油镜的使用法(此节在实验三中学习) (1)如用高倍镜放大，倍数还不够大则须采用油镜。用油镜以前，先用低、高倍图 2

实验二活性污泥生物相的观察一。目的1.学习测量微生物大小。2.学习用压滴法制作标本片。3.观察几种原、后生动物，菌胶团及藻类个体形态二，实验器材1.活性污泥混合液。2.单胞藻、新月藻、星藻、草履虫等示范片。3.显微镜、载玻片、盖玻片。4.目测微尺、物测微尺。m三.实验方法及内容1.目测微尺和物测微尺及其使用的方法目测微尺目测微尺是一圆形玻片，其中央刻有精确的刻目镜测微尺度（图3），等分为100格或更多格。标尺刻度的大小，随使用的图3接目镜和接物镜放大倍数以及镜筒的长度而改变。使用前，应先利用物测微尺进行标定。物测微尺物测微尺是一厚玻片，中央有一微小圆圈，圆圈里有100等分刻度标尺，每等分的长度为1/100mm，即10μm/格。使用时，先将目测微尺装入接目镜的隔板上，物测微尺使刻度朝下：把物测微尺放在载物台上，使刻度朝上，用平常观察标本的方法，先用低倍镜找到物测微尺的刻度，再移动物测微尺与目测微尺使两者的第一线相合，然后计算物测微尺的每一小格内有目测微尺的小格若干个，换算成后者刻度所表示的长度。如：物测微尺的一小格相当于5个目测微尺的小格，则目测微尺在此种条件下，其每格的长度即等于2μm。如在同样条件下测量物体，而物体之长度为目测微尺的两小格，宽为半小格，则可知此物体的大小为1μm×4μm。换成高倍镜，用同样方法标定出高倍镜下目测微尺每格的长度。2.活性污泥标本的制备1)取活性污泥法曝气池混合液一小滴，放在洁净的载玻片的中央如混合液中污泥较少，可待其沉淀后，取沉淀污泥一小滴于载破片上：如混合液中污泥较多，则应稀释后进行观察)。2)小心地用洗净的盖玻片覆盖。这样，就制成了活性污泥的标本。加盖玻片时应使其中央已接触到水滴后才放下，否则会在片内形成气泡而影响观察。3.显微镜观察活性污泥标本(1)低倍镜观察1)在选定的接目镜下，利用低倍镜，确定目测微尺一格的长度（单位以um计)。2)观察所制备的微生物标本玻片，画出所见原生动物、菌胶团等微生物的形态4

4 实验二活性污泥生物相的观察一. 目的 1.学习测量微生物大小。 2.学习用压滴法制作标本片。 3.观察几种原、后生动物，菌胶团及藻类个体形态二. 实验器材 1. 活性污泥混合液。 2. 单胞藻、新月藻、星藻、草履虫等示范片。 3. 显微镜、载玻片、盖玻片。 4. 目测微尺、物测微尺。三. 实验方法及内容 1.目测微尺和物测微尺及其使用的方法目测微尺目测微尺是一圆形玻片，其中央刻有精确的刻度(图 3)，等分为 100 格或更多格。标尺刻度的大小，随使用的接目镜和接物镜放大倍数以及镜筒的长度而改变。使用前，应先利用物测微尺进行标定。物测微尺物测微尺是一厚玻片，中央有一微小圆圈，圆圈里有 100 等分刻度标尺，每等分的长度为 1／100mm，即 10μm／格。使用时，先将目测微尺装入接目镜的隔板上，使刻度朝下；把物测微尺放在载物台上，使刻度朝上，用平常观察标本的方法，先用低倍镜找到物测微尺的刻度，再移动物测微尺与目测微尺使两者的第一线相合，然后计算物测微尺的每一小格内有目测微尺的小格若干个，换算成后者刻度所表示的长度。如：物测微尺的一小格相当于 5 个目测微尺的小格，则目测微尺在此种条件下，其每格的长度即等于 2μm。如在同样条件下测量物体，而物体之长度为目测微尺的两小格，宽为半小格，则可知此物体的大小为 1μm×4μm。换成高倍镜，用同样方法标定出高倍镜下目测微尺每格的长度。 2．活性污泥标本的制备 1)取活性污泥法曝气池混合液一小滴，放在洁净的载玻片的中央(如混合液中污泥较少，可待其沉淀后，取沉淀污泥一小滴于载破片上；如混合液中污泥较多．则应稀释后进行观察)。 2)小心地用洗净的盖玻片覆盖。这样，就制成了活性污泥的标本。加盖玻片时应使其中央已接触到水滴后才放下，否则会在片内形成气泡而影响观察。 3．显微镜观察活性污泥标本 (1)低倍镜观察 1)在选定的接目镜下，利用低倍镜，确定目测微尺一格的长度(单位以μm 计)。 2)观察所制备的微生物标本玻片，画出所见原生动物、菌胶团等微生物的形态物测微尺目镜测微尺图 3

实验三.微生物的染色一.目的1.学习微生物的染色技术，掌握微生物的单染色法和革兰氏染色法。2.学习油镜的操作二.实验器材1.显微镜、香柏油、接种环、酒精灯等。2.结晶紫染液、碘液、95%乙醇、沙黄染液。3.菌种：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌。三。实验原理1.单染色法：微生物不但个体微小，且无色半透明。要在显微镜下观察清楚必须染上颜色。微生物细胞中含有大量的蛋白质等一类两性电解质：在酸性溶液中结合质子带正电：在碱性溶液中给出质子而带负电。等电点一般在pH=2~5。所以，在中性、碱性或弱酸性溶液中，微生物细胞通常带负电荷。碱性染料在电离时，染色部分是带正电荷的，容易与带负电荷的菌体结合使之着色。经染色后的菌体细胞与背景形成鲜明的对比，在显微镜下很容易观察。2.革兰氏染色法：革兰氏染色法将细菌分为G十和G-，这由两类细菌细胞壁的结构和组成的不同而决定。用结晶紫初染后，所有的细菌都染上蓝紫色。碘作为媒染剂能与结晶紫结合形成结晶紫-碘的复合物，增强了染料与菌体的结合力。用乙醇脱色处理时，两类细菌的脱色效果是不同的。G十细菌的细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构组成，且壁厚、类脂含量低，用乙醇脱色时使细胞壁脱水、网状结构孔径缩小，通透性降低，使得结晶紫一碘的复合物不易被洗脱而保留在细胞内。虽经洗脱和复染仍然保持初染剂的蓝紫色。C-细菌则不同，由于其细胞壁肽聚糖层软薄，类脂含量高，所以在脱色处理时，类脂被乙醇溶解，细胞壁的通透性增大，使结晶紫一碘的复合物比较容易被洗脱出来，用复染剂复染后，细胞被染上复染剂的颜色。四.实验方法及步骤(一)单染色1.涂片在洁净的载玻片上先作上记号，以免弄错正反面。然后在其中央滴上一滴无菌水或生理盐水(0.85%NaCI)。用烧灼冷却过的接种环取少量菌体至玻片的水滴中和匀后涂成均匀薄片。途片面积不宜过大。下图说明从试管中采取菌体制备涂片的无菌操作过程。接种环用后必须再度烧灼灭菌。2.干燥在空气中自然干燥，使菌体的位置不再移动。3.固定涂片于酒精灯火馅中通过3~4次（以玻片与手接触面感到稍微烫手为度）、使菌体固定于玻片上而不易脱落：固定也可使标本容易着色。4.染色放标本于水平位置，在上面滴加结晶紫染色液。染色时间约1~2min。5.水洗染色达到需要的时间后，倾去染色液，并以水冲洗，至冲下的水无色时为止。注意使水柱由玻片上端流下，避免直接冲在途片处。6

6 实验三.微生物的染色一.目的 1.学习微生物的染色技术，掌握微生物的单染色法和革兰氏染色法。 2.学习油镜的操作二.实验器材 1.显微镜、香柏油、接种环、酒精灯等。 2.结晶紫染液、碘液、95%乙醇、沙黄染液。 3.菌种：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌。三．实验原理 1.单染色法：微生物不但个体微小，且无色半透明。要在显微镜下观察清楚，必须染上颜色。微生物细胞中含有大量的蛋白质等一类两性电解质：在酸性溶液中结合质子带正电；在碱性溶液中给出质子而带负电。等电点一般在 pH=2~5。所以，在中性、碱性或弱酸性溶液中，微生物细胞通常带负电荷。碱性染料在电离时，染色部分是带正电荷的，容易与带负电荷的菌体结合使之着色。经染色后的菌体细胞与背景形成鲜明的对比，在显微镜下很容易观察。 2.革兰氏染色法：革兰氏染色法将细菌分为 G＋和 G- ，这由两类细菌细胞壁的结构和组成的不同而决定。用结晶紫初染后，所有的细菌都染上蓝紫色。碘作为媒染剂能与结晶紫结合形成结晶紫-碘的复合物，增强了染料与菌体的结合力。用乙醇脱色处理时，两类细菌的脱色效果是不同的。G＋细菌的细胞壁主要由肽聚糖形成的网状结构组成，且壁厚、类脂含量低，用乙醇脱色时使细胞壁脱水、网状结构孔径缩小，通透性降低，使得结晶紫—碘的复合物不易被洗脱而保留在细胞内。虽经洗脱和复染仍然保持初染剂的蓝紫色。G-细菌则不同，由于其细胞壁肽聚糖层较薄，类脂含量高，所以在脱色处理时，类脂被乙醇溶解，细胞壁的通透性增大，使结晶紫—碘的复合物比较容易被洗脱出来，用复染剂复染后，细胞被染上复染剂的颜色。四.实验方法及步骤 (一)单染色 1．涂片在洁净的载玻片上先作上记号，以免弄错正反面。然后在其中央滴上一滴无菌水或生理盐水(0.85％NaCl)。用烧灼冷却过的接种环取少量菌体至玻片的水滴中,和匀后涂成均匀薄片。涂片面积不宜过大。下图说明从试管中采取菌体制备涂片的无菌操作过程。接种环用后必须再度烧灼灭菌。 2.干燥在空气中自然干燥，使菌体的位置不再移动。 3．固定涂片于酒精灯火馅中通过 3~4 次(以玻片与手接触面感到稍微烫手为度)、使菌体固定于玻片上而不易脱落；固定也可使标本容易着色。 4．染色放标本于水平位置，在上面滴加结晶紫染色液。染色时间约 1~2min。 5. 水洗染色达到需要的时间后，倾去染色液，并以水冲洗，至冲下的水无色时为止。注意使水柱由玻片上端流下，避免直接冲在涂片处

实验四微生物的计数一。目的1.了解血球计数板的计数原理，掌握血球计数板的计数方法。2.观察酵母菌的形态，学习区分酵母菌死活细胞的方法。二，实验器材显微镜、血球计数板、酵母菌液、美蓝染液、盖玻片。三.实验内容H1.血球计数板及其使用方法#血球计数板是一块特制的载玻片，有四条竖槽和一条横槽。横槽两边的平台上各有一个血球计数板正面结构有九个大方格的方格网，中间大方格为计数室：边长为1mm，深为0.1mm，容积为0.1mm3（10*ml）)。计数室有两种规格：一是分为16个中方格，每中方格中有25个小方格：另一种是分为25个中方格，每中方格有16个小方格。两种都共有400个小方格。计数方法，以25×16规格为例：数出四个角（左上、右上、左下、右下）和正中的共5个中方格中的总菌数A，总菌数（个ml)=α×25×10*×B=5000A.B5计数室放大图10×10若菌液的稀释倍数为B，则计算公式如下：2.酵母菌液的计数(1)稀释样品：为了便于计数，将样品以适当比例稀释。(2)镜检计数室对计数板进行镜检。若有污物，则用自来水冲洗，用电吹风冷风吹于后才能进行计数。(3)加样品在血球计数板上盖上盖玻片，用滴管将摇匀的酵母菌液由盖玻片边的小槽处滴一小滴，菌液会自动进入计数室，静置5分钟。(4)计数将血球计数板置于载物台上，先用低倍镜找到计数室的位置，再换高倍镜计数。每个计数室计5个中格（四角和中间）。计数原则：计上不计下，计左不计右：芽体占母细胞一半时算一个。上下两个计数室分别计数后取平均值，再按公式计算每毫升菌液中所含的酵母菌数。计数后将血球计数板用自来水冲洗干净，勿用硬物刷，吹干后镜检。若不干净，则必须重复洗涤干净为止。3.酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型是无色。用美蓝对酵母菌的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变成无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞是8

8 实验四微生物的计数一．目的 1.了解血球计数板的计数原理，掌握血球计数板的计数方法。 2.观察酵母菌的形态，学习区分酵母菌死活细胞的方法。二. 实验器材显微镜、血球计数板、酵母菌液、美蓝染液、盖玻片。三. 实验内容 1.血球计数板及其使用方法血球计数板是一块特制的载玻片，有四条竖槽和一条横槽。横槽两边的平台上各有一个有九个大方格的方格网，中间大方格为计数室：边长为１ｍｍ，深为 0.1mm，容积为 0.1mm3 (10-4ml)。计数室有两种规格：一是分为 16 个中方格，每中方格中有 25 个小方格；另一种是分为 25 个中方格，每中方格有 16 个小方格。两种都共有 400 个小方格。计数方法，以 25×16 规格为例：数出四个角（左上、右上、左下、右下）和正中的共 5 个中方格中的总菌数 A，若菌液的稀释倍数为 B，则计算公式如下： 2. 酵母菌液的计数 (1)稀释样品为了便于计数，将样品以适当比例稀释。 (2)镜检计数室对计数板进行镜检。若有污物，则用自来水冲洗，用电吹风冷风吹干后才能进行计数。 (3)加样品在血球计数板上盖上盖玻片, 用滴管将摇匀的酵母菌液由盖玻片边的小槽处滴一小滴,菌液会自动进入计数室，静置 5 分钟。 (4)计数将血球计数板置于载物台上，先用低倍镜找到计数室的位置，再换高倍镜计数。每个计数室计 5 个中格（四角和中间）。计数原则：计上不计下，计左不计右；芽体占母细胞一半时算一个。上下两个计数室分别计数后取平均值，再按公式计算每毫升菌液中所含的酵母菌数。计数后将血球计数板用自来水冲洗干净，勿用硬物刷，吹干后镜检。若不干净，则必须重复洗涤干净为止。 3. 酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴别美蓝是一种无毒性的染料，它的氧化型呈蓝色，还原型是无色。用美蓝对酵母菌的活细胞进行染色时，由于细胞的新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变成无色的还原型。因此，具有还原能力的酵母活细胞是血球计数板正面结构图计数室放大图10×10 25 10 B 50000A B 5 A /ml 4 总菌数（个）=    = 