湖南中医药大学研究生选修课 Principles of Genetic Engineering 基因工程原理 湖南中医药大学鲁耀邦
湖南中医药大学研究生选修课 Principles of Genetic Engineering 基 因 工 程 原 理 湖南中医药大学 鲁耀邦
基因工程原理纲要 基因工程概论 基因工程的主要技术 基因工程的酶学基础 日基因克隆的载体与受体 目的基因的克隆与分离 克隆基因的检测与功能鉴定
基因工程原理纲要 基因工程概论 基因工程的主要技术 基因工程的酶学基础 基因克隆的载体与受体 目的基因的克隆与分离 克隆基因的检测与功能鉴定
第四讲基因克隆的载体与受体 vectors
第四讲 基因克隆的载体与受体 vectors
1.载体( Vectors) 在基因工程操作中,把能携带外源DNA进入受体 细胞的DNA分子叫载体
在基因工程操作中，把能携带外源DNA进入受体 细胞的DNA分子叫载体。 1. 载体 (Vectors)
2.基因工程对载体的要求 (1)在宿主细胞内能独立复制。 (2)有选择性标记。 (3)有一段多克隆位点。 外源DNA插入其中不影响载体的复制。 (4)分子量小,拷贝数多。 (5)容易从宿主细胞中分离纯化
（1）在宿主细胞内能独立复制。 （2）有选择性标记。 （3）有一段多克隆位点。 2. 基因工程对载体的要求 外源DNA插入其中不影响载体的复制。 （4）分子量小，拷贝数多。 （5）容易从宿主细胞中分离纯化
3.载体的种类 基因工程中常用的载体有5类: 质粒( plasmid) 单链DNA噬菌体M13 λ噬菌体的衍生物 柯斯质粒( cosmid) 动物病毒(vus)
基因工程中常用的载体有5类： 3. 载体的种类 质粒（plasmid） 单链DNA噬菌体M13 噬菌体的衍生物 柯斯质粒（cosmid） 动物病毒（virus）
第一节质粒载体 质粒( plasmid) 是独立于染色体以外的能自主复制的双链 闭合环状DNA分子。 存在于细菌、霉菌、蓝藻、酵母等细胞中
第一节 质粒载体 一、质粒（plasmid） 是独立于染色体以外的能自主复制的双链 闭合环状DNA分子。 存在于细菌、霉菌、蓝藻、酵母等细胞中
大肠杆菌的质粒
大肠杆菌的质粒
1.质粒的一般生物学特性 (1)分子小: 1-200kb (2)编码基因少 2-3个中等大小的蛋白质。 如抗菌素抗性、代谢特征等,赋予细菌一些 额外的特性(非必须)。 (3)环形状: 双链环状DNA。 (酵母的“杀伤质粒”是RNA)
（1）分子小： 1. 质粒的一般生物学特性 1—200 kb （2）编码基因少： 2—3个中等大小的蛋白质。 （3）环形状： 双链环状DNA。 （酵母的“杀伤质粒”是RNA）。 如抗菌素抗性、代谢特征等，赋予细菌一些 额外的特性（非必须）
(4)质粒的空间构型: ①共价闭合环状DNA( CCCDNA) Covalent close circular DNA 呈超螺旋(SC)( super coil) Right-handed spiral Left-handed superhelix
（4）质粒的空间构型： ① 共价闭合环状DNA（cccDNA) 呈超螺旋（SC）（super coil） Covalent close circular DNA