第七章花药与花粉培养 甘肃农业大学农学院果树科学系 2012年3月1日
主要内容 花药和花粉的培养的概念 花药和花粉的培养的意义 花药培养 花粉培养 雄核发育 其它产生单倍体的方法
《 第、章花菊与花将培养 一、花药和花粉培养的概念 ▣花药培养(anther culture):是 花粉母细胞 指将花粉发育到一定阶段的完 整花药接种到培养基上,诱导 形成单倍体再生植株的技术。 绒毡层 口花粉培养(pollen culture):是 药隔维管束 表皮 指将离体的花粉粒接种到培养 基上,诱导形成单倍体再生植 花粉囊 花粉粒 株的技术
第、章花菊与花将培养 二、花药和花粉培养的意义 ▣研究体细胞遗传和突变育种的原始材料。 口研究细胞减数分裂,花粉生理、生化代谢和遗传基本理 论的好方法; 口有利于尽早淘汰隐性的有害个体,筛选出具有优良性状 的个体: ▣获得纯合二倍体植株,缩短育种年限,提高育种效率
《 第、章花菊与花将培养 母本×父本 F 减数分裂 自花传粉植物常规育种与单倍体育种程序的比较 不同类型的卵细胞 不同类型的花粉 →花药培养 自交 F2 各种类型的单倍体植株 自交 染色体加倍 F3 纯合的二倍体植株(纯系) 自交 淘汰 选择 株行鉴定 杂合Fn 纯系 鉴定或品比 常规杂交育种法 单倍体育种法
第、章花药与花粉培养 三、花药培养 ▣ 花药材料的选择 ▣ 花药培养的一般程序 ▣ 培养基的选择 花药培养中花粉的发育机制 孢原细胞表皮 初生周缘细胞 造孢细胞 造孢细胞药隔维管束 造孢细胞
第、章花菊与花将培养 (一)花药材料的选择: 根据花粉粒的发育时期选择合适的花药,具体依据: 口生理状态:大多数植物最适宜的花粉粒发育时期一单核 期,尤其是单核中、晚期。 口外观状态:花蕾未开放,达到一定长度。 (按照花蕾长度大小与花粉发育年龄的相关性)】 ▣其次应注意花药材料的基因型、生理状况。(即植物 种类、品种、母株年龄、营养状况)
第、章花弱写花粉培养 (二)培养基的选择: 口基本培养基:MS、N6、B5等 口愈伤组织诱导:基本培养基+2,4-D0.5~2mg/L+6-BA0.2~2.0mgL 口分化培养基:基本培养基+6-BA2~3mgL+HAA0.2~0.5mg/L 口生根培养基:IAA0.0~1mg/L 口其他成分: ◆蔗糖多数为2~4%。高浓废利于愈伤组织诱导,低浓废利于愈 伤组织分化成苗。 ◆活性炭促进胚状体发育,提高花粉质量; ◆添加有机物效果较好
第、章花药与花粉培养 (三)花药培养的程序 ▣取材:单核后期花药对培养反应较好。确定花粉发 育时期与花蕾大小的关系。 口预处理:提高花药的愈伤组织诱导率; 低温冷藏、钴60照射、乙烯利喷母株 口消毒:花蕾 口接种:密度效应;不携带花丝;花药无损
第、章花药与花粉培养 ▣ 花药培养的一般程序 花 取 药 材 预 毒 接种再生 染色体加 处 植株移栽 健壮无 理 花蕾 倍 病植株 中采集 70%酒精中浸数秒 每瓶 秋水 花蕾 低温(4 20-30 5℃)预处 仙素 理3~7天 个花药 诱导 0.1%升汞浸3~5分钟 剖开花蕾,取出花药