第三章培养基 Microfo 甘肃农业大学农学院果树科学系 2012年3月1日
主要内容 培养基的概念 培养基的成分 培养基的种类 培养基的配制 培养基的选择
第三章培养基 一、培养基的概念 培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的 人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐以及维 生素和水等。有的培养基还含有抗生素和色素
第三章培养基 口培养基的作用 1.植物组织培养的成功与否，一方面取决于培养材料本身的性质，另 一方面取决于培养基的种类和成分。 2.在植物组培中，培养基不仅肩负有土壤的功能，提供植物组织生长 所需的各类营养物质，而且含有一些外源激素，以调节细胞的分化 和生长。 3.培养基的种类、成分直接影响到培养材料的生长，故应根据培养植 物的种类、部位和培养目的，选择适宜的培养基
第三章培养基 二、培养基的成分 ◆ 水 无机营养成分 ◆有机营养成分 ◆ 碳源与能源 ◆植物生长调节物质 ◆琼脂 活性炭 10e
第三章培养基 1.水 一般用蒸馏水、去离子水、超纯水。 ●蒸馏水：含盐量一般在1~5mg/L左右，电阻率在0.1M2cm (欧厘米)左右(25℃时)。 ●去离子水电阻率达10~18.2M2cm。不能除去水中溶解的 有机物、微生物。 ●超纯水用电阻率表示，一般将>2M2cm的水称之为超纯 水，理论上超纯水电阻率是18.25M2cm
第三章悟养基 2.无机营养成分 ■培养14天的鲜重 培养14天的干重 1.1大量元素(>0.5mmol/L) 20 1.0 碳(C、氢、氧(O)、氨)、磷(P)鲜0 0.8 重 钾(K、钙(Ca)、镁(Mg)、和硫(S)等9 重 1 种元素。 克 古 氮：常用的是硝态氨（如硝酸钾等）和 铵态氮（如硫酸铵等），但大多数培养基 以硝态氮为主，MS培养基和B,培养基 1.3 02×10-32x10-10.751.02.0 谷酰胺 2x1040.50 则既含硝态氮，又含铵态氮。 图3-1硝态氮和铵态氨对蔷薇 细胞培养生长的影响
第三章培养基 ◆磷：参与植物生命过程中的核酸合成、蛋白质合成、光合作 用、呼吸作用以及能量的储存、转化与释放等重要生理生化 过程，常用KH,PO4来提供。 ◆钾：影响着植物组织培养中酶的活性和方向，决定着新陈代 谢的过程。钾对分化也有一定的促进作用。KH,PO4、K,SO4 ◆镁：叶绿素的组成成分，又是激酶的活剂；S是含S蛋白质的 组成成分。它们常以MgS047H,O提供。用量为1~3mg/L。 ◆钙：构成细胞壁的一种成分，对细胞分裂、保护质膜不受破 坏有显著作用，常以CaCl,2H,O提供
第三章培养基 6 3.3 NPS 1:1:8 NPS 1:3:6 NP 5.6 NPS NPS 6:1:3 3 5:3 6.0 NPS NPS NPS NPS 6:3:1 3:6: 18:1 N、P、S的配比
第三章培养基 1.2 2微量元素(<0.5 mmol/L) 包括铁(Fe)、铜(Cu)、钼Mo)、锌(Zn)、钠Na)、锰 Mn)、钴(Co)、硼B)等8种元素。 微量元素在生命活动过程中对酶系的活性起着重要的调 节作用。培养基中一般添加105~10-7mol/L即可。 铁，用量较多的一种微量元素，对植物组织叶绿素的合 成和延长生长起重要作用。常用FS047H,0与Na2 EDTA结合成螯合铁