第七章微生物的研究方法实验基本方法
第七章 微生物的研究方法 ——实验基本方法
微生物观察分纯方法保藏方法灭菌、消毒
◼ 微生物观察 ◼ 分纯方法 ◼ 保藏方法 ◼ 灭菌、消毒
目镜X4、10、16放大倍数=物镜X10、40、100（油镜）物镜×目镜载物台调焦旋钮光源（粗调微调）
一、微生物的观察 目镜 ×4、10、16 载物台 调焦旋钮 （粗调微调） 光源 物镜 ×10、40、100（油镜） 放大倍数＝ 物镜×目镜
常用显微镜比较类别普通显微镜电子显微镜明视野暗视野型相差型项目型最大放大1，600倍2，000，000倍倍数光源可见光电子束透镜成像透镜成像透镜成与光反射成像原理与光衍射电子透镜成像原理像原理原理是否否染色否可以活体观察有困难
类别 普通显微镜 项目 明视野 型 暗视野型 相差型 电子显微镜 最大放大 倍数 1，600 倍 2，000，000 倍 光源 可见光 电子束 成像原理 透镜成 像 透镜成像 与光反射 原理 透镜成像 与光衍射 原理 电子透镜成像原理 染色 是 否 否 活体观察 有困难 可以 否 ◼常用显微镜比较
微生物的分离和保?分离一得到纯菌落提问：如何进行？选择性培养基筛分一接种针划线分离纯细菌划线分离方法实验课介绍
◼ 分离—得到纯菌落 二、微生物的分离和保藏 ❖提问：如何进行？ ❖选择性培养基筛分→接种针划线分离纯细菌 划线分离方法实验课介绍
如何进行微生物试验无菌操作？用品全部灭菌；在酒精灯火焰保护下进行操作；操作间的紫外杀菌；手臂的消毒等：无菌操作台操作
如何进行微生物试验无菌操作 ？ ◼ 用品全部灭菌；在酒精灯火焰保护下进行操作； ◼ 操作间的紫外杀菌；手臂的消毒等； 无菌操作台操作
保藏挑单菌落划斜面试管固体斜面培养基
试管 固体 斜面 培养基 保藏 挑单菌落 划斜面
除保藏外分纯后的细菌还可用于驯化或基因改良，培育高效菌。提问：培养出的高效菌投加到实际处理系统中后常常效果比试验中的差，原因何在？水质波动过大：生物之间竞争和拮抗关系等等提问：如何解决？直接研究混合菌处理（包括活性污泥）技术
◼ 除保藏外分纯后的细菌还可用于驯化或基因改 良，培育高效菌。 ◼ 提问：培养出的高效菌投加到实际处理系统中 后常常效果比试验中的差，原因何在？ ◼ 水质波动过大；生物之间竞争和拮抗关系等等 ◼ 提问：如何解决？ ◼ 直接研究混合菌处理（包括活性污泥）技术
微生物的保藏三.1保藏目的一留“种子”但保藏中存在一个菌种退化的退化一群体细菌一些重要特性逐提问：退化原因？有害突变、染菌、病毒侵蚀、培养基环境改变诱导
三．微生物的保藏 ◼ 但保藏中存在一个菌种退化的问题 ◼ 退化——群体细菌一些重要特性逐渐变差 ◼提问：退化原因？ ◼ 有害突变、染菌、病毒侵蚀、培养基环境 改变诱导 ❖ 保藏目的—留“种子
有害突变、染菌、病毒侵蚀、培养基环境改变诱导如何克服这一问题？A出现衰退之前分离保藏没有发生衰退的细菌B.杜绝培养基变化及染菌等的发生；C.复壮（对变异衰退细菌恢复强壮再保藏）复壮方法：用高剂量的紫外辐射和低剂量的诱变剂联合处理对于衰退严重的菌株可以起到满意的复壮目的
◼ 如何克服这一问题？ ◼ A.出现衰退之前分离保藏没有发生衰退的细菌 ◼ B.杜绝培养基变化及染菌等的发生； ◼ C.复壮（对变异衰退细菌恢复强壮再保藏） ◼复壮方法： ◼ 用高剂量的紫外辐射和低剂量的诱变剂联合处理对于 衰退严重的菌株可以起到满意的复壮目的。 有害突变、染菌、病毒侵蚀、培养基环境改变诱导