浙江大学ZheJiang Univerelty柱色谱联北力1937
柱色谱
浙江大学ZheJiang Univerelty一、实验目的:1.了解柱色谱分离混合物的原理及其用途2.掌握柱色谱的实验操作技术新北力1937
一、实验目的： 1.了解柱色谱分离混合物的原理及其用途 2.掌握柱色谱的实验操作技术
浙江大学ZheJiang University二、 基本原理色谱法分离有机化合物是利用混合物各组分在某一物质中的吸附或溶解性能（分配）的不同，或亲和性能的差异，使混合物的各组分随着流动的液体或气体（称流动相），通过另一种固定不动的固体或液体（称固定相），进行反复的吸附或分配作用，从而使各组分分离。根据操作条件不同，可以分为柱色谱、薄层色谱纸色谱等。建力1937
色谱法分离有机化合物是利用混合物 各组分在某一物质中的吸附或溶解性能 （分配）的不同，或亲和性能的差异，使 混合物的各组分随着流动的液体或气体 （称流动相），通过另一种固定不动的固 体或液体（称固定相），进行反复的吸附 或分配作用，从而使各组分分离。根据操 作条件不同，可以分为柱色谱、薄层色谱、 纸色谱等。 二、基本原理
浙江大学ZheJiangUniverelty如将硅胶或A1,0,等吸附剂（固定相）装入玻璃管中（如图1），从柱顶加入样品（A，B），再从柱顶加入淋洗剂（流动相）（图2）石英砂样品吸附剂A、B两组分随流动相的流动而物质A向下移动。A、B在两相不断进行着的溶解、吸附、再溶解、物质B再吸附过程中，由于吸附能力的差异，不同组份随流动相移动的速度不同，从而达到分离(1)(2)(3)（图3）。新北力1957
如将硅胶或Al 2 O 3等吸附剂（ 固 定 相）装入玻璃管中（如图 相）装入玻璃管中（如图1)，从 柱顶加入样品(A, B)，再从柱顶 加入淋洗 剂（流动相）（图 剂（流动相）（图 2）。 A 、 B两组分随流动相的流动而 两组分随流动相的流动而 向下移动。 A 、 B在两相不断进 行着的溶解、吸附、再溶解、 行着的溶解、吸附、再溶解、 再吸附过程中， 再吸附过程中，由于吸附能力 的差异，不同组份随流动相移 ，不同组份随流动相移 动的速度不同，从而达到分离 动的速度不同，从而达到分离 （ 图 3）。 物质 A （ 1 ） 吸附剂 石英砂 样品 （ 2 ） （ 3 ） 物质 B
浙江大学ZheJiangUniverelty吸附剂吸附有机化合物的能力与化合物的结构有关，分子的极性越小，吸附能力越弱。分子的极性越大，吸附能力越强。吸附能力最弱的组分最先随淋洗剂流出，分别收集各组分。若待纯化物质是有色物质，则在柱上可以直接看到色带，若是无色物质用薄层色谱鉴定。彩东1517
吸附剂吸附有机化合物的能力与化合物 的结构有关，分子的极性越小，吸附能力越 弱。分子的极性越大，吸附能力越强。吸附 能力最弱的组分最先随淋洗剂流出，分别收 集各组分。若待纯化物质是有色物质，则在 柱上可以直接看到色带，若是无色物质，可 用薄层色谱鉴定
浙江大学ZheJiang Univereity分离效果主要处决于化合物的结构，吸附剂的性质及淋洗剂的极性。1.吸附剂选择的吸附剂绝不能与待分离的物质及淋洗剂发生化学反应。常用的吸附剂有硅胶、氧化铝、氧化镁、碳酸钙和活性炭等。有机实验室用的最多的为硅胶吸附能力与吸附剂的颗粒大小有关。颗粒越小，表面积越大，吸附能力越高，分离效果好，但淋洗剂的流速太慢。反之则反。用于柱色谱的硅胶一般为100-200目，200-300目，300-400目及400目以上。玩迎力1557
分离效果主要处决于化合物的结构，吸附 剂的性质及淋洗剂的极性。 1.吸附剂 选择的吸附剂绝不能与待分离的物质及淋洗剂发 生化学反应。常用的吸附剂有硅胶、氧化铝、氧化镁、 碳酸钙和活性炭等。有机实验室用的最多的为硅胶。 吸附能力与吸附剂的颗粒大小有关。颗粒越小， 表面积越大，吸附能力越高，分离效果好，但淋洗剂 的流速太慢。反之则反。 用于柱色谱的硅胶一般为100-200目，200-300 目，300-400目及400目以上
浙江大学ZheJiang Universlty2.溶质的结构和吸附能力化合物的吸附性和它们的极性成正比，化合物分子中含有极性较大的基团其吸附性较强。氧化铝对各种化合物的吸附性按下列顺序递减。酸、碱>醇、胺、硫醇〉酯、醛、酮〉芳香族化合物〉卤代物、醚烯》饱和烃。新虹市1937
2.溶质的结构和吸附能力 化合物的吸附性和它们的极性成正 比，化合物分子中含有极性较大的基团 其吸附性较强。氧化铝对各种化合物的 吸附性按下列顺序递减。 酸、碱 > 醇、胺、硫醇 > 酯、醛、酮 > 芳香族化合物 > 卤代物、醚 > 烯 > 饱和烃
浙江大学ZheJiang University3.淋洗剂试样吸附在氧化铝柱上后，用合适的溶剂进行洗脱，这种溶剂称为淋洗剂。洗脱剂的极性不能过大（将被分离物全部洗脱，起不到分离效果）或过小（各组分仍被吸附留在固定相），常用洗脱溶剂的极性按以下次序递增：己烷、石油醚<环已烷<四氯化碳<三氯乙烯<二硫化碳<甲苯<苯<二氯甲烷<三氯甲烷<乙醚<乙酸乙酯<丙酮<丙醇<乙醇甲醇<水<吡啶<乙酸北力
3.淋洗剂 试样吸附在氧化铝柱上后，用合适的溶剂 进行洗脱，这种溶剂称为淋洗剂。洗脱剂的极 性不能过大（将被分离物全部洗脱，起不到分 离效果）或过小（各组分仍被吸附留在固定 相），常用洗脱溶剂的极性按以下次序递增: 己烷、石油醚＜环已烷＜四氯化碳＜三氯 乙烯＜二硫化碳＜甲苯＜苯＜二氯甲烷＜三氯 甲烷＜乙醚＜乙酸乙酯＜丙酮＜丙醇＜乙醇＜ 甲醇＜水＜吡啶＜乙酸
浙江大学ZheJiangUniverelty能否完全分离每一个组份最关键的是选择合适的淋洗剂，可以运用薄层色谱来选择淋洗剂，R,太大或太小都不好，一般以R,=0.3为好。淋洗剂可以是单一溶剂，也可以是混合溶剂，最常用的是石油醚/乙酸乙酯，改变不同的比例，一般都能得到满意的分离效果。必要时，还可以进行梯度淋洗在保证好的分离效果的同时可以加快速度玩纯水
能否完全分离每一个组份最关键的是选 择合适的淋洗剂，可以运用薄层色谱来选择 淋洗剂， R f太大或太小都不好，一般以 R f = 0.3为好。淋洗剂可以是单一溶剂，也可以 是混合溶剂，最常用的是石油醚/乙酸乙 酯，改变不同的比例，一般都能得到满意的 分离效果。必要时，还可以进行梯度淋洗， 在保证好的分离效果的同时可以加快速度
浙江大学ZheJiang Univerelty洗脱剂的选择还要考虑以下方面1.对试样的溶解度不能过大（洗脱过快过多）或过小（谱带分散，甚至不易完全分开）。2.在常温至沸点的温度范围内可与被分离物长期共存无反应，也不被吸附剂或被分离物催化发生自身反应。3．沸点较低，利于回收。4．毒性小，较安全。5．价格便宜，来源方便。红1937
洗脱剂的选择还要考虑以下方面： 1. 对试样的溶解度不能过大（洗脱过快 过多）或过小（谱带分散，甚至不易完 全分开）。 2. 在常温至沸点的温度范围内可与被分 离物长期共存无反应，也不被吸附剂或 被分离物催化发生自身反应。 3. 沸点较低，利于回收。 4. 毒性小，较安全。 5. 价格便宜，来源方便