《环境生态工程实验》实验指导书适用专业：环境生态工程安徽建筑大学环境与能源工程学院2017年1
1 《环境生态工程实验》 实 验 指 导 书 适用专业：环境生态工程 安 徽 建 筑大学环境与能源工程学院 2017 年
前言随着全球自然生态资源的日益枯竭和人类生存环境的不断恶化，能源和环境问题已成为人们关注的热点。环境生态工程作为一门研究生物与环境间互相关系及其作用机理的学科，它的发展受到世人的高度重视。环境生态实验是继学生学习生态学和环境学相关的基础理论后的实践课程，它对巩固学生的环境学、生态学及生态工学学基本知识、培养学生的实验操作能力起着至关重要的作用，整个教学过程不可或缺。《环境生态工程》是针对生态破坏和环境污染使生态系统结构和功能失调，利用生态学原理，设计和建造自然和人类协调，能控制环境污染和生态退化的工程技术科学。由于全球变化的加剧，人类面临着前所未有的环境挑战，人们在解决各种环境污染和生态破坏问题时，最先利用土木工程、环境工程方法去解决结果是投入高，产出低，工程系统运行可持续性差。利用生态系统原理建立的具有“近自然”特性的工程系统能显著弥补这一不足，提高系统运行效率。该实验指导书针对环境生态工程专业设置的教学目标、教学内容设置了10个实验项目。通过这10个实验项目的教学过程，使学生加深知识的掌握，深化环境生态工程建造的生态学基本原理的认识，完成生态学本科专业教学计划规定的内容。2
2 前 言 随着全球自然生态资源的日益枯竭和人类生存环境的不断恶化，能源和环 境问题已成为人们关注的热点。环境生态工程作为一门研究生物与环境间互相关 系及其作用机理的学科，它的发展受到世人的高度重视。环境生态实验是继学生 学习生态学和环境学相关的基础理论后的实践课程，它对巩固学生的环境学、生 态学及生态工学学基本知识、培养学生的实验操作能力起着至关重要的作用，整 个教学过程不可或缺。 《环境生态工程》是针对生态破坏和环境污染使生态系统结构和功能失调， 利用生态学原理，设计和建造自然和人类协调，能控制环境污染和生态退化的工 程技术科学。由于全球变化的加剧，人类面临着前所未有的环境挑战，人们在解 决各种环境污染和生态破坏问题时，最先利用土木工程、环境工程方法去解决， 结果是投入高，产出低，工程系统运行可持续性差。利用生态系统原理建立的具 有“近自然”特性的工程系统能显著弥补这一不足，提高系统运行效率。 该实验指导书针对环境生态工程专业设置的教学目标、教学内容设置了 10 个实验项目。通过这 10 个实验项目的教学过程，使学生加深知识的掌握，深化 环境生态工程建造的生态学基本原理的认识，完成生态学本科专业教学计划规定 的内容
实验一生态环境中生态因子的观测与测定实验学时：3实验类型：验证性实验实验要求：必修一、实验目的通过本实验使学生了解和掌握生态环境中主要生态因子的观测和测定方法及一些常见的测定仪器的使用方法，并比较不同生态环境中主要生态因子的变化规律。二、实验原理不同的生境与生态因子是不可分的。任何一个植物群落在形成的过程中，植物不仅对环境具有适应能力，而且对环境也有巨大的改造作用。随着植物群落发育到成熟阶段，群落的内部环境也发育成熟。植物群落内的环境因子如温度、湿度、光照强度等都不同于群落外部。植物群落内的各生物物种在它们自已创造的环境中，井然有序地生活着。不同的植物群落，其群落环境因子存在明显的差异。三、实验材料、试剂和仪器1.材料、仪器照度计、皮尺、卷尺、记录笔、记录纸、地表温度计、土壤温度计、土壤湿度计，风速测定仪、皮尺、卷尺、记录笔、记录纸等。四、操作步骤（一）光照强度的测定1.选取两种不同类型的生境。2.分别在不同类型生境，均匀选取3个测定点，用照度计测定每一点的光照强度，并记录每次测定的数值。3.选择一空旷无林地（最好地面无植被覆盖）作为对照，随机测定3个点，用照度计测定裸地的光照强度，并记录每次测定的数值。（二）不同生境温湿度的测定在上述同样的生境以及对照地中，实施下述内容的测定：1.地表温湿度的测定（1）从林缘向林地中心均匀选取3个测定点，用地表温度计与湿度计分别测定每一点的地表温湿度，并记录每次测定的数值。（2）同时在空旷无林地随机选取3个点，同样测定地表温度和湿度。3
3 实验一生态环境中生态因子的观测与测定 实验学时：3 实验类型：验证性实验 实验要求：必修 一、实验目的 通过本实验使学生了解和掌握生态环境中主要生态因子的观测和测定方法 及一些常见的测定仪器的使用方法，并比较不同生态环境中主要生态因子的变化 规律。 二、实验原理 不同的生境与生态因子是不可分的。任何一个植物群落在形成的过程中，植 物不仅对环境具有适应能力，而且对环境也有巨大的改造作用。随着植物群落发 育到成熟阶段，群落的内部环境也发育成熟。植物群落内的环境因子如温度、湿 度、光照强度等都不同于群落外部。植物群落内的各生物物种在它们自己创造的 环境中，井然有序地生活着。不同的植物群落，其群落环境因子存在明显的差异。 三、实验材料、试剂和仪器 1.材料、仪器 照度计、皮尺、卷尺、记录笔、记录纸、地表温度计、土壤温度计、土壤湿度计， 风速测定仪、皮尺、卷尺、记录笔、记录纸等。 四、操作步骤 （一）光照强度的测定 1.选取两种不同类型的生境。 2.分别在不同类型生境，均匀选取3个测定点，用照度计测定每一点的光照 强度，并记录每次测定的数值。 3.选择一空旷无林地（最好地面无植被覆盖）作为对照，随机测定3个点， 用照度计测定裸地的光照强度，并记录每次测定的数值。 （二）不同生境温湿度的测定 在上述同样的生境以及对照地中，实施下述内容的测定： 1.地表温湿度的测定 （1）从林缘向林地中心均匀选取3个测定点，用地表温度计与湿度计分别测 定每一点的地表温湿度，并记录每次测定的数值。 （2）同时在空旷无林地随机选取3个点，同样测定地表温度和湿度
2.群落内土壤不同深度温湿度的测定（1）在群落中，随机确定2个测定点，用土壤温度计与土壤湿度计分别测定地表5cm、10cm、15cm、20cm、25cm、30cm、35cm深处的土壤湿度与温度，并记录每次测定的数值。（2）在空旷无林地同样随机选取2个点，同样测定距地表5cm、10cm、15cm、20cm、25cm、30cm、35cm深处的土壤湿度与温度。（三）风速的测定1.在上述同样的群落中，从林缘向林地中心1.5m的高处，均匀选5个点。2.用风速测定仪分别测定每点的风速。3.同时在空旷无林地，随机选取5个点，测定每个点的风速。根据测定结果，列表整理得到的气象数据，并分析不同群落中和空旷无林地中的生态因子及其差异性。注意事项：不同生境及分析对照地的环境生态因子（如光照强度、空气温度和湿度、地表温度和湿度、土壤温度和湿度）测定，一定要在相同的时间进行，这样获得的数据才具有可比性。五、作业1.不同生境中，小气候环境有什么差异？试分析造成此种差异的原因。2.不同生境小气候环境与空旷无林地的小气候环境有什么差异？试分析造成此种差异的原因。3.总结各仪器的使用方法、使用注意事项、影响测定结果的因素等A
4 2.群落内土壤不同深度温湿度的测定 （1）在群落中，随机确定2个测定点，用土壤温度计与土壤湿度计分别测定 地表5cm、10cm、15cm、20cm、25cm、30cm、35cm深处的土壤湿度与温度，并 记录每次测定的数值。 （2）在空旷无林地同样随机选取2个点，同样测定距地表5cm、10cm、15cm、 20cm、25cm、30cm、35cm深处的土壤湿度与温度。 （三）风速的测定 1.在上述同样的群落中，从林缘向林地中心1.5m的高处，均匀选5个点。 2.用风速测定仪分别测定每点的风速。 3.同时在空旷无林地，随机选取5个点，测定每个点的风速。 根据测定结果，列表整理得到的气象数据，并分析不同群落中和空旷无林地 中的生态因子及其差异性。 注意事项： 不同生境及分析对照地的环境生态因子（如光照强度、空气温度和湿度、地 表温度和湿度、土壤温度和湿度）测定，一定要在相同的时间进行，这样获得的 数据才具有可比性。 五、作业 1.不同生境中，小气候环境有什么差异？试分析造成此种差异的原因。 2.不同生境小气候环境与空旷无林地的小气候环境有什么差异？试分析造 成此种差异的原因。 3．总结各仪器的使用方法、使用注意事项、影响测定结果的因素等
实验二植物希尔反应的观察实验学时：3实验类型：验证性实验要求：必修一、实验目的通过对希尔反应的示范观察，加深对这一反应性质的理解。二、实验原理希尔反应由它的发现者希尔而得名，是植物的离体叶绿体悬浮液在照光的情况下使水光解释放氧产生H+，从而还原某些特定的氧化剂的反应。希尔反应的实质是叶绿体在光反应过程中产生的不稳定还原产物还原了某些人为加入的氧化剂的结果。希尔反应氧化剂有Fe3十、二氯酚靛酚等，后者为一蓝色染料，被还原后变为无色，因此很容易用肉眼观察，也可用分光光度计对还原量进行精确测定。本实验观察植物叶绿体粗悬浮液在光下对二氯酚靛酚的还原作用。三、实验材料、试剂和仪器1.实验材料菠菜叶或其他植物叶片2.仪器研钵；试管；试管架；漏斗；纱布；小烧杯；剪刀3.试剂石英砂；0.1%二氯酚靛酚溶液四、操作步骤1.取新鲜菠菜叶片或其他绿色植物叶片（如小麦、玉米等）5g，剪碎后置研钵中加10ml蒸馏留水研磨成浆状后，再加40ml蒸馏水研磨稀释，然后通过4～6层纱布过滤到小烧杯中即为叶绿体粗悬浮液（其中含有细胞碎片及比叶绿体更小的细胞器，如线粒体等）。2.取试管2支，每管加入叶绿体悬浮液5ml，0.1%二氯酚靛酚溶液2滴，摇匀，将其中一管置于直射阳光下，另一管置于暗处，注意阳光下的试管颜色变化，5～10min后取出置于暗处试管，比较两管的颜色深浅。五、解释实验结果5
5 实验二植物希尔反应的观察 实验学时：3 实验类型：验证性 实验要求：必修 一、实验目的 通过对希尔反应的示范观察，加深对这一反应性质的理解。 二、实验原理 希尔反应由它的发现者希尔而得名，是植物的离体叶绿体悬浮液在照光的情 况下使水光解释放氧产生 H+，从而还原某些特定的氧化剂的反应。希尔反应的 实质是叶绿体在光反应过程中产生的不稳定还原产物还原了某些人为加入的氧 化剂的结果。希尔反应氧化剂有 Fe3＋、二氯酚靛酚等，后者为一蓝色染料，被 还原后变为无色，因此很容易用肉眼观察，也可用分光光度计对还原量进行精确 测定。本实验观察植物叶绿体粗悬浮液在光下对二氯酚靛酚的还原作用。 三、实验材料、试剂和仪器 1．实验材料 菠菜叶或其他植物叶片 2．仪器 研钵；试管；试管架；漏斗；纱布；小烧杯；剪刀 3．试剂 石英砂；0.1％二氯酚靛酚溶液 四、操作步骤 1. 取新鲜菠菜叶片或其他绿色植物叶片（如小麦、玉米等）5g，剪碎后置 研钵中加10ml蒸馏水研磨成浆状后，再加40ml蒸馏水研磨稀释，然后通过4～6 层纱布过滤到小烧杯中即为叶绿体粗悬浮液（其中含有细胞碎片及比叶绿体更小 的细胞器，如线粒体等）。 2. 取试管2支，每管加入叶绿体悬浮液5ml，0.1％二氯酚靛酚溶液2滴，摇匀， 将其中一 管置于直射阳光下，另一管置于暗处，注意阳光下的试管颜色变化，5～10min 后取出置于暗处试管，比较两管的颜色深浅。 五、解释实验结果
实验三逆境条件下的植物体内丙二醛含量的测定实验学时：3实验类型：综合实验要求：必修一、实验目的通过实验，掌握植物体内内二醛含量测定的原理及方法，以及对逆境的指示作用。二、实验原理内二醛（MDA）是由于植物官衰老或在逆境条件下受伤害，其组织或器官膜脂质发生过氧化反应而产生的。它的含量与植物衰老及逆境伤害有密切关系。测定植物体内丙二醛含量，通常利用硫代巴比妥酸(TBA)在酸性条件下加热与组织中的丙二醛产生显色反应，生成红棕色的三甲川（3、5、5一三甲基恶唑2、4一二酮），三甲川最大的吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与硫代巴比妥酸显色反应产物的最大吸收波长在450nm处，在532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中丙二醛与硫代巴比妥酸反应产物含量时一定要排除可溶性糖的干扰。此外在532nm波长处尚有非特异的背景吸收的影响也要加以排除。低浓度的铁离子能显著增加硫代巴比妥酸与蔗糖或丙二醛显色反应物在532、450nm处的吸光度值，所以在蔗糖、丙二醛与硫代巴比妥酸显色反应中需要有一定的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为100一300ugg一1Dw，根据植物样品量和提取液的体积，加入Fe3十的终浓度为0.5nmol·L一1。在532nm、600nm和450nm波长处测定吸光度值，即可计算出丙二醛含量。三、实验材料、试剂和仪器（1）材料、仪器植物叶片、离心机，分光光度计；电子分析天平；恒温水浴；研钵；试管；移液管（1ml、5ml）、试管架：移液管架：洗耳球：剪刀（2）试剂10%三氯乙酸；0.6%硫代巴比妥酸（TBA）溶液：石英砂四、操作步骤1.丙二醛的提取称取受干旱、高温、低温等逆境胁迫的植物叶片1g，加入少量石英砂和10%三氯乙酸2ml，研磨至匀浆，再加8ml10%三氯乙酸进一步研磨，匀浆以4000r/min离心10min，其上清液为丙二醛提取液。6
6 实验三逆境条件下的植物体内丙二醛含量的测定 实验学时：3 实验类型：综合 实验要求：必修 一、实验目的 通过实验，掌握植物体内丙二醛含量测定的原理及方法，以及对逆境的指示作用。 二、实验原理 丙二醛（MDA）是由于植物官衰老或在逆境条件下受伤害，其组织或器官 膜脂质发生过氧化反应而产生的。它的含量与植物衰老及逆境伤害有密切关系。 测定植物体内丙二醛含量，通常利用硫代巴比妥酸(TBA)在酸性条件下加热与组 织中的丙二醛产生显色反应，生成红棕色的三甲川（3、5、5－三甲基恶唑2、4 －二酮），三甲川最大的吸收波长在532nm。但是测定植物组织中MDA时受多 种物质的干扰，其中最主要的是可溶性糖，糖与硫代巴比妥酸显色反应产物的最 大吸收波长在450nm处，在532nm处也有吸收。植物遭受干旱、高温、低温等逆 境胁迫时可溶性糖增加，因此测定植物组织中丙二醛与硫代巴比妥酸反应产物含 量时一定要排除可溶性糖的干扰。此外在532nm波长处尚有非特异的背景吸收的 影响也要加以排除。低浓度的铁离子能显著增加硫代巴比妥酸与蔗糖或丙二醛显 色反应物在532、450nm处的吸光度值，所以在蔗糖、丙二醛与硫代巴比妥酸显 色反应中需要有一定的铁离子，通常植物组织中铁离子的含量为100－300μg•g －1Dw，根据植物样品量和提取液的体积，加入Fe3＋的终浓度为0.5nmol• L－1。 在532nm、600nm和450nm波长处测定吸光度值，即可计算出丙二醛含量。 三、实验材料、试剂和仪器 （1）材料、仪器 植物叶片、离心机，分光光度计；电子分析天平；恒温水浴；研钵；试管； 移液管（1ml、5ml）、试管架；移液管架；洗耳球；剪刀 （2）试剂 10％三氯乙酸；0.6％硫代巴比妥酸（TBA）溶液：石英砂 四、操作步骤 1. 丙二醛的提取 称取受干旱、高温、低温等逆境胁迫的植物叶片 1g，加入少量石英砂和 10％ 三氯乙酸 2ml，研磨至匀浆，再加 8ml10％三氯乙酸进一步研磨，匀浆以 4000r/min 离心 10min，其上清液为丙二醛提取液
2.显色反应及测定取4支干净试管，编号，3支为样品管（三个重复），各加入提取液2ml，对照管加蒸馏水2ml，然后各管再加入2ml0.6%硫代巴比妥酸溶液。摇匀，混合液在沸水浴中反应15min，迅速冷却后再离心。取上清液分别在532、600和450nm波长下测定吸光度（A）值。五、丙二醛含量计算：由于蔗糖一TBA反应产物的最大吸收波长为450nm，毫摩尔吸收系数为85.4X10-3，MDA一TBA反应产物在532nm的毫摩尔吸收系数分别是7.4X10-3和155×10~3。532nm非特异性吸光值可以600nm波长处的吸光值代表。按双组分分光光度法原理，建立方程组，解此方程组即可求出MDA及可溶性糖浓度。方程组：A450=（85.4X10-3)·C糖（A532-A600）=（155X10-3）·CMDA+（7.4X10-3）·C糖解得：A450C糖==11.71A450 (mmol·L-1)85.4X10-3CMDA=6.45（A532A600）-0.56A450（μmol·L-1)公式中：A450一在450nm波长下测得的吸光度值A532一在532nm波长下测得的吸光度值A600一在600nm波长下测得的吸光度值*—1.55×105为摩尔比吸收系数C糖、CMDA分别是反应混合液中可溶性糖、MDA的浓度。1.按下式计算提取液中MDA浓度反应液体积（ml）CMDAX-1000提取液中MDA浓度（umol·ml-I）：测定时提取液用量（ml）2.按下式计算样品中MDA含量7
7 2. 显色反应及测定 取 4 支干净试管，编号，3 支为样品管（三个重复），各加入提取液 2ml，对 照管加蒸馏水 2ml，然后各管再加入 2ml 0.6％硫代巴比妥酸溶液。摇匀，混合 液在沸水浴中反应 15min，迅速冷却后再离心。取上清液分别在 532、600 和 450nm 波长下测定吸光度（A）值。 五、丙二醛含量计算： 由于蔗糖－TBA 反应产物的最大吸收波长为 450nm，毫摩尔吸收系数为 85.4 ×10－3，MDA－TBA 反应产物在 532nm 的毫摩尔吸收系数分别是 7.4×10－3 和 155×10－3。532nm 非特异性吸光值可以 600nm 波长处的吸光值代表。 按双组分分光光度法原理，建立方程组，解此方程组即可求出 MDA 及可溶 性糖浓度。 方程组： A450=（85.4×10－3）·C 糖 （A532－A600）=（155×10－3）·CMDA+（7.4×10－3）·C 糖 解得： A450 C 糖= —————— = 11.71A450（mmol·L －1） 85.4×10－3 CMDA= 6.45（A532－A600）－0.56A450-（μmol·L －1） 公式中：A450—在 450nm 波长下测得的吸光度值 A532—在 532nm 波长下测得的吸光度值 A600—在 600nm 波长下测得的吸光度值 ﹡—1.55×105 为摩尔比吸收系数 C 糖、CMDA 分别是反应混合液中可溶性糖、MDA 的浓度。 1. 按下式计算提取液中 MDA 浓度 反应液体积（ml） CMDA×————————— 1000 提取液中 MDA 浓度（μmol·ml－1）= ——————————————— 测定时提取液用量（ml） 2. 按下式计算样品中 MDA 含量
提取液中MDA浓度（μmol·mlI）×提取液总量（ml）MDA含量（μmolgFw）=植物组织鲜重（g）8
8 提取液中 MDA 浓度（μmol·ml－1）×提取液总量（ml） MDA 含量（μmol·g －1Fw）= ——————————————————— 植物组织鲜重（g）
实验四校园内水体富营养化的状态测定-DO的测定实验学时：3实验类型：综合实验要求：必修一、实验目的1.理解碘量法测定水中溶解氧的原理2.学会溶解氧采样瓶的使用方法：3.掌握碘量法测定水中溶解氧的操作技术要点。二、实验原理溶于水中的氧称为溶解氧，当水受到还原性物质污染时，溶解氧即下降，而有藻类繁殖时，溶解氧呈过饱和，因此，水中溶解氧的变化情况在一定程度上反映了水体受污染的程度。碘量法测定溶解氧的原理：在水中加入硫酸锰及碱性碘化钾溶液，生成氢氧化锰沉淀。此时氢氧化锰性质极不稳定，迅速与水中溶解氧化合生成锰酸锰：MnSO4+2NaOH=Mn（OH）2（白色）++Na2SO42Mn（OH）2+O2=2MnO（OH）2（棕色）H2MnO3十Mn（OH）2=MnMnO3（棕色沉淀）+2H2O加入浓硫酸使棕色沉淀（MnMn02）与溶液中所加入的碘化钾发生反应，而析出碘，溶解氧越多，析出的碘也越多，溶液的颜色也就越深2KI+H2SO4=2HI+K2SO4MnMnO3+2H2SO4+2HI=2MnSO4+I2+3H2012+2Na2S203=2Nal+Na2S406用移液管取一定量的反应完毕的水样，以淀粉做指示剂，用标准溶液滴定，计算出水样中溶解氧的含量。三、实验材料、试剂和仪器（1）材料、仪器1.250ml一300ml溶解氧瓶2.50ml酸式滴定管。3.250ml锥形瓶4.移液管5.250ml碘量瓶6.洗耳球(2）试剂9
9 实验四校园内水体富营养化的状态测定-DO 的测定 实验学时：3 实验类型：综合 实验要求：必修 一、实验目的 1．理解碘量法测定水中溶解氧的原理： 2．学会溶解氧采样瓶的使用方法： 3．掌握碘量法测定水中溶解氧的操作技术要点。 二、实验原理 溶于水中的氧称为溶解氧，当水受到还原性物质污染时，溶解氧即下降，而有藻 类繁殖时，溶解氧呈过饱和，因此，水中溶解氧的变化情况在一定程度上反映了 水体受污染的程度。 碘量法测定溶解氧的原理：在水中加入硫酸锰及碱性碘化钾溶液，生成氢氧化锰 沉淀。此时氢氧化锰性质极不稳定，迅速与水中溶解氧化合生成锰酸锰： MnSO4+2NaOH=Mn（OH）2↓（白色）++Na2SO4 2Mn（OH）2+O2=2MnO（OH）2（棕色） H2MnO3十Mn（OH）2＝MnMnO3↓（棕色沉淀）+2H2O 加入浓硫酸使棕色沉淀（MnMn02）与溶液中所加入的碘化钾发生反应，而析出 碘，溶解氧越多，析出的碘也越多，溶液的颜色也就越深 2KI+H2SO4=2HI+K2SO4 MnMnO3+2H2SO4+2HI=2MnSO4+I2+3H2O I2+2Na2S2O3=2NaI+Na2S4O6 用移液管取一定量的反应完毕的水样，以淀粉做指示剂，用标准溶液滴 定，计算出水样中溶解氧的含量。 三、实验材料、试剂和仪器 （1）材料、仪器 1.250ml—300ml 溶解氧瓶 2.50ml 酸式滴定管。 3.250ml 锥形瓶 4.移液管 5.250ml 碘量瓶 6.洗耳球 （2）试剂
1、硫酸锰溶液。溶解480g分析纯硫酸锰（MnS04·H20）溶于蒸馏水中，过滤后稀释成1000ml.此溶液加至酸化过的碘化钾溶液中，遇淀粉不得产生蓝色。2、碱性碘化钾溶液。取500g氢氧化钠溶解于300一400ml蒸馏水中（如氢氧化钠溶液表面吸收二氧化碳生成了碳酸钠，此时如有沉淀生成，可过滤除去）。另取得气150g碘化钾溶解于200ml蒸馏水中，待氢氧化钠冷却后，将两溶液合并，混匀，用水稀释至1000ml。如有沉淀，则放置过夜后，倾出上层清液，贮于棕色瓶中，用橡皮塞塞紧，闭光保存。此溶液酸化后，与淀粉应不呈蓝色。3.1%淀粉溶液：称取1g可溶性淀粉，用少量调成糊状，再用刚刚煮沸的水稀释至100mL.冷却后加入0.1g水杨酸或0.4g氯化锌（ZnCI2）防腐剂。此溶液遇碘应变为蓝色，如变成紫色表示已有部分变质，要重新调配。4.（1+5）硫酸溶液：取1体积1.84g/mL的浓硫酸慢慢的加到盛有5体积水的烧杯中，搅匀冷却后，转入试剂瓶中。5.重铬酸钾标准溶液【1/6（K2Cr207）=0.0250mol/L】：称取于105一110℃烘干2h并冷却至恒重的优级纯重铬酸钾102258g，溶于水，移入1000mL容量瓶中，用水稀释至标线，摇匀。6.硫代硫酸钠标准溶液。溶解6.2g分析纯硫代硫酸钠（Na2S2O35H20）于煮沸放冷的蒸馏水中，然后在加入0.2g无水碳酸钠，用水稀释至1000mL，贮于棕色瓶中，使用前用0.0250mol/L重铬酸钾标准溶液标定。标定：用0.0250mol/L重铬酸钾标准溶液标定硫代硫酸钠的浓度。在250ml的碘量瓶中加入1g固体碘化钾及100mL蒸馏水。用滴定管加入10.00ml0.0250mol/重铬酸钾溶液，再加入5mll：5的硫酸溶液，此时发生下列反应：K2Cr07+6KI+7H2S04=4K2S04十Cr2（S04)）3十3I2+7H20在暗处静置5分钟后，由滴定管滴入硫代硫酸钠溶液至溶液呈浅黄色，加入1ml淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚退去为止。记下硫代硫酸钠溶液的用量。M=10.00X0.0250/V式中：M一一硫代硫酸钠溶液浓度，mol/LV一一硫代硫酸钠溶液消耗量，mL。四、操作步骤（1）溶解氧的固定。用移液管插入溶解瓶的液面下，加入1mL硫酸锰溶液、2mL碱性碘化钾溶液，盖好瓶盖，颠倒混合数次，静置。一般在取样现场固定。（2）析出碘。打开瓶塞，立即用移液管插入液面下加入2.0mL硫酸，盖好10
10 l、硫酸锰溶液。溶解 480g 分析纯硫酸锰（MnS04· H20）溶于蒸馏水中， 过滤后稀释成 1000ml.此溶液加至酸化过的碘化钾溶液中，遇淀粉不得产生蓝色。 2、碱性碘化钾溶液。取 500g 氢氧化钠溶解于 300—400ml 蒸馏水中（如氢 氧化钠溶液表面吸收二氧化碳生成了碳酸钠，此时如有沉淀生成，可过滤除去）。 另取得气 150g 碘化钾溶解于 200ml 蒸馏水中，待氢氧化钠冷却后，将两溶液合 并，混匀，用水稀释至 1000ml。如有沉淀，则放置过夜后，倾出上层清液，贮 于棕色瓶中，用橡皮塞塞紧，闭光保存。此溶液酸化后，与淀粉应不呈蓝色。 3.1%淀粉溶液：称取 1g 可溶性淀粉，用少量调成糊状，再用刚刚煮沸的水 稀释至 100mL.冷却后加入 0.1g 水杨酸或 0.4g 氯化锌（ZnCl2）防腐剂。此溶液 遇碘应变为蓝色，如变成紫色表示已有部分变质，要重新调配。 4.（1+5）硫酸溶液：取 1 体积 1.84g/mL 的浓硫酸慢慢的加到盛有 5 体积水 的烧杯中，搅匀冷却后，转入试剂瓶中。 5.重铬酸钾标准溶液【1/6（K2Cr2O7）=0.0250mol/L】：称取于 105—110℃ 烘干 2h 并冷却至恒重的优级纯重铬酸钾 102258g，溶于水，移入 1000mL 容量 瓶中，用水稀释至标线，摇匀。 6.硫代硫酸钠标准溶液。溶解 6.2g 分析纯硫代硫酸钠（Na2S2O3·5H20） 于煮沸放冷的蒸馏水中，然后在加入 0.2g 无水碳酸钠，用水稀释至 1000mL， 贮于棕色瓶中，使用前用 0.0250mol/L 重铬酸钾标准溶液标定。 标定：用 0.0250mol／L 重铬酸钾标准溶液标定硫代硫酸钠的浓度。在 250ml 的碘量瓶中加入 1g 固体碘化钾及 100mL 蒸 馏 水 。 用 滴 定 管 加 入 10.00ml 0.0250mol/重铬酸钾溶液，再加入 5ml l：5 的硫酸溶液，此时发生下 列反应： K2Cr07 十 6KI 十 7H2S04＝4K2S04 十 Cr2（S04）3 十 3I2 十 7H20 在暗处静置 5 分钟后，由滴定管滴入硫代硫酸钠溶液至溶液呈浅黄色，加入 1ml 淀粉溶液，继续滴定至蓝色刚退去为止。记下硫代硫酸钠溶液的用量。 M＝10.00×0.0250／V 式中：M——硫代硫酸钠溶液浓度，mol/L V——硫代硫酸钠溶液消耗量，mL。 四、操作步骤 （1）溶解氧的固定。用移液管插入溶解瓶的液面下，加入 1mL 硫酸锰溶液、 2mL 碱性碘化钾溶液，盖好瓶盖，颠倒混合数次，静置。一般在取样现场固定。 （2）析出碘。打开瓶塞，立即用移液管插入液面下加入 2.0mL 硫酸，盖好