南京发业大学动物医学院College ofVeterinary Medicine,Nanjing Agricultural University兽医微生物学实验马家乐jialema@njau.edu.cn教学楼OIE实验室B421
兽医微生物学实验 马家乐 jialema@njau.edu.cn 教学楼OIE实验室 B421
南京发业大学。动物医学院CollegeofVeterinary Medicine,Nanjing Agricultural University实验六细菌的生化试验
实验六 ◆ 细菌的生化试验
南京農大学动物医学院College ofVeterinary Medicine, Nanjing Agricultural University实验目的1、了解细菌生化试验在细菌学诊断上的重要意义2、掌握几种生化试验的方法
1、了解细菌生化试验在细菌学诊断上的重要意义 2、掌握几种生化试验的方法 实验目的
南京農业大学·动物医学院College of Veterinary Medicine, Nanjing Agricultural University实验材料1、菌种：大肠杆菌，沙门氏菌、变形杆菌、产气荚膜梭菌；2、生化鉴定管：微量发酵管若干；3、其他：接种环、砂轮、酒精灯、记号笔等
1、菌种：大肠杆菌，沙门氏菌、变形杆菌、产气荚膜梭菌； 2、生化鉴定管：微量发酵管若干； 3、其他：接种环、砂轮、酒精灯、记号笔等。 实验材料
南京農业大学。动物医学院Collegeof VeterinaryMedidicine,NanjingAgricultural University实验内容+1、吲哚（靛基质）试验+2、甲基红（M一R）试验+ 3、V一P试验★4、糖或醇发酵试验★5、枸橡酸盐利用实验+6、硫化氢实验+7、尿素实验+8、细菌的运动性实验
实验内容 1、吲哚（靛基质）试验 2、甲基红（M－R）试验 3、V－P试验 4、糖或醇发酵试验 5、枸椽酸盐利用实验 6、硫化氢实验 7、尿素实验 8、细菌的运动性实验
南京農业大学·动物医学院Collegeof VeterinaryMedicine,NanjingAgricultural University》1、吲哚（靛基质）试验→原理：细菌若含有色氨酸酶，可分解蛋白陈中的色氨酸，生成靛基质（吲哚），靛基质与试剂对二甲基氨基苯甲醛作用，生成玫瑰靛基质。+培养基：蛋白陈水+试剂：靛基质试剂（含对二甲基氨基苯甲醛）+结果：培养基出现红色液面：+培养基液面为黄色：+应用：用于肠道杆菌的鉴定
➢ 1、吲哚（靛基质）试验 原理：细菌若含有色氨酸酶，可分解蛋白胨中的色氨酸，生 成靛基质（吲哚），靛基质与试剂对二甲基氨基苯甲醛作用， 生成玫瑰靛基质。 培养基：蛋白胨水 试剂：靛基质试剂（含对二甲基氨基苯甲醛） 结果：培养基出现红色液面：+ 培养基液面为黄色： － 应用：用于肠道杆菌的鉴定
南京農业大学。动物医学院Collegeof VeterinaryMedicine,NanjingAgricultural University试验>1、吲哚（靛基质）INDOLEPRODUCTIONUninoculatedNegativePositive
➢ 1、吲哚（靛基质）试验
南京農业大学。动物医学院College ofVeterinary Medicine, Nanjing Agricultural University>2、甲基红试验+原理：细菌分解糖，产生丙酮酸，进一步生成大量混合酸，使培养基pH维持在4.4以下，加入甲基红后，使甲基红呈现红色反应。此为甲基红试验阳性。+培养基：葡萄糖蛋白陈水+试剂：甲基红试剂(pH4.2红色-pH6.3黄色）+结果：培养基呈现红色：+培养基不变色：+应用：肠道杆菌常用生化反应试验，主要用于区别大肠肝菌和产气肠杆菌
➢ 2、甲基红试验 原理：细菌分解糖，产生丙酮酸，进一步生成大量混合酸，使培养 基pH维持在4.4以下，加入甲基红后，使甲基红呈现红色反应。此 为甲基红试验阳性。 培养基：葡萄糖蛋白胨水 试剂：甲基红试剂(pH4.2红色- pH6.3黄色） 结果：培养基呈现红色：+ 培养基不变色： － 应用：肠道杆菌常用生化反应试验，主要用于区别大肠肝菌和产气肠杆菌
南京農业大学。动物医学院Collegeof VeterinaryMedicine,NanjingAgriculturalUniversity>2、甲基红试验METHYLRED TESTMRVPBrothNegativePositiveUninoculated
➢ 2、甲基红试验
南京農业大学·动物医学院College ofVeterinary Medicine, NanjingAgricultural University>3、V-P试验+原理：细菌发酵葡萄糖，产生丙酮酸，丙酮酸脱羧生成乙酰甲基甲醇，在碱性环境中乙酰甲基甲醇被氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白陈中的精氨酸所含的胍基结合，生成红色化合物。+培养基：葡萄糖蛋白陈水+结果：培养基呈现红色：+培养基不变色：+应用：肠道杆菌常用生化反应试验，主要用于区别大肠肝菌和产气肠杆菌
➢ 3、V-P试验 原理：细菌发酵葡萄糖，产生丙酮酸，丙酮酸脱羧生成乙酰甲基甲 醇，在碱性环境中乙酰甲基甲醇被氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白胨 中的精氨酸所含的胍基结合，生成红色化合物。 培养基：葡萄糖蛋白胨水 结果：培养基呈现红色：+ 培养基不变色： － 应用：肠道杆菌常用生化反应试验，主要用于区别大肠肝菌和产气肠杆菌