南京农业大学：《动物生物化学》实验教学课件（讲稿）实验一 蛋白质的沉淀反应

动物生物化学实验教学2008/03/2712:29地点：逸夫楼20032008/08

动物生物化学实验教学 地点：逸夫楼2003

实验实验基本教育和基本操作训练蛋白质的沉淀反应和两性反应蛋白质透析脱盐动物医学院动物生物化学教研室

实验基本教育和基本操作训练 蛋白质的沉淀反应和两性反应 蛋白质透析脱盐 实验一 动物医学院 动物生物化学教研室

目的口了解生化实验的基本自的和要求口熟悉生化实验的常用仪器口了解蛋白质的沉淀、盐析、两性反应及透析脱盐的原理口掌握蛋白质盐析和透析等操作技术

了解生化实验的基本目的和要求 熟悉生化实验的常用仪器 了解蛋白质的沉淀、盐析、两性反应及透 析脱盐的原理 掌握蛋白质盐析和透析等操作技术 目的

实验基本教育和基本操作训练口动物生化实验的重要性口生化分析技术与本专业之间的关系口本学期实验安排与要求口考核总分100：40%为实验理论（闭卷）30%为实验技能操作40%平时（包括实验报告和平时）

实验基本教育和基本操作训练  动物生化实验的重要性  生化分析技术与本专业之间的关系  本学期实验安排与要求  考核 总分100 ：40%为实验理论（闭卷） 30%为实验技能操作 40%平时（包括实验报告和平时）

实验安排共有9个实验：动医、动药专业27学时（包括1-8个实验）动科、水产专业18学时（包括1-6个实验）实验实验基本教育和基本操作训练蛋白质的沉淀反应和两性反应，口蛋白质透析脱盐（3学时）实验二口蛋白质的定量测定-—--双缩脲法测定蛋白质浓度（3学时）*口实验三睡液淀粉酶的活性观察（3学时）口实验四电泳技术概论口血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳（3学时）口实验五聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳分离血清蛋白（3学时）*实验六口层析技术概论口分子筛凝胶过滤分离血红蛋白和核黄素（3学时）#口实验七无蛋白血滤液的制备口血糖的测定（3学时）*实验八口动物肝脏中DNA的提取和鉴定（3学时）*实验九口脂质的提取与薄层层析（3学时）#注：*为综合性实验#为设计性实验

实验安排 共有9个实验：动医、动药专业27学时（包括1-8个实验） 动科、水产专业18学时（包括1-6个实验）  实验一 实验基本教育和基本操作训练 蛋白质的沉淀反应和两性反应， 蛋白质透析脱盐（3学时）  实验二 蛋白质的定量测定-双缩脲法测定蛋白质浓度（3学时）*  实验三 唾液淀粉酶的活性观察（3学时）  实验四 电泳技术概论  血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳（3学时）  实验五 聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳分离血清蛋白（3学时）*  实验六 层析技术概论  分子筛凝胶过滤分离血红蛋白和核黄素（3学时）#  实验七 无蛋白血滤液的制备  血糖的测定（3学时）*  实验八 动物肝脏中DNA的提取和鉴定（3学时）*  实验九 脂质的提取与薄层层析（3学时）# 注：* 为综合性实验 # 为设计性实验

实验报告口实验目的口实验原理（简明，扼要）口试剂与器材（简单，主要试剂与器材）口实验步骤（详细）口结果讨论（实事求是，准确）

实验报告  实验目的  实验原理（简明，扼要）  试剂与器材（简单，主要试剂与器材）  实验步骤（详细）  结果讨论（实事求是，准确）

实验1蛋白质的沉淀反应口蛋白质的水溶液是稳定性的胶体溶液稳定的原因有两个{1 水膜l2 电荷口蛋白质沉淀物理化学因素影响下，蛋白质稳定性遭到破坏，以固体的形式从溶液中析出的作用。包括可逆沉淀和不可逆沉淀

实验1 蛋白质的沉淀反应  蛋白质的水溶液是稳定性的胶体溶液 稳定的原因有两个 1 水膜 2 电荷  蛋白质沉淀 物理化学因素影响下，蛋白质稳定性遭到破坏，以固体的形 式从溶液中析出的作用。包括可逆沉淀和不可逆沉淀

可逆沉淀（盐析和盐溶）口盐溶（saltingin）纯水或低盐溶液中溶解度较低的蛋白质，通过增加无机盐使溶解度增加口盐析（saltingout）高浓度的中性盐类可以脱去蛋白质分子表面的水膜并中和蛋白质分子的电荷，从而使蛋白质从溶液中沉淀下来的过程常用的中性盐：硫酸铵，氯化钠，硫酸钠等

可逆沉淀（盐析和盐溶）  盐溶（salting in） 纯水或低盐溶液中溶解度较低的蛋白质，通过增加无机 盐使溶解度增加  盐析（salting out） 高浓度的中性盐类可以脱去蛋白质分子表面的水膜， 并中和蛋白质分子的电荷，从而使蛋白质从溶液中沉淀 下来的过程 常用的中性盐：硫酸铵，氯化钠，硫酸钠等

不可逆沉淀口有机溶剂沉淀：如乙醇、丙酮、口生物碱试剂沉淀：如苦味酸、三氯醋酸（TCA）、钨酸等.在pH值小于蛋白质pI时，其酸根负离子能与蛋白质分子上的正离子相结合重金属盐沉淀：金属正离子与蛋白质分子中负电荷同结合口加热或改变pH等

不可逆沉淀  有机溶剂沉淀：如乙醇、丙酮、  生物碱试剂沉淀 :如苦味酸、三氯醋酸（TCA) 、钨 酸等.在pH值小于蛋白质pI时，其酸根负离子能与蛋白 质分子上的正离子相结合  重金属盐沉淀：金属正离子与蛋白质分子中负电荷 结合  加热或改变pH等

口本实验选用卵蛋白（结合蛋白）卵清蛋白球蛋白角蛋白粘蛋白等口从卵蛋白中分离出清蛋白和球蛋白？

 本实验选用卵蛋白（结合蛋白） 卵清蛋白 球蛋白 角蛋白 粘蛋白等  从卵蛋白中分离出清蛋白和球蛋白？